一种肝脏病理大组织的脱水方法技术

本发明专利技术涉及病理切片技术领域，具体涉及一种肝脏病理大组织的脱水方法。具体地，本发明专利技术基于肝门胆管癌大范围肝切除组织，提供了制备可用于诊断及科学研究的肝脏5厘米以上病理大切片的肝脏组织脱水方法。采用本发明专利技术提供的脱水方法对肝脏病理大组织进行脱水，制备得到的肝脏病理大切片，可以全景展示肝脏肿瘤周围微环境及肝脏肿瘤与周围组织的关系，用于全面临床诊断及科学研究。床诊断及科学研究。

【技术实现步骤摘要】
一种肝脏病理大组织的脱水方法


[0001]本专利技术涉及病理切片
，具体涉及一种肝脏病理大组织的脱水方法。

技术介绍

[0002]20世纪70年代的脑组织病理学最早使用病理大切片组织，将大脑的正常组织学及其结构和改变进行可视化。实现了宏观和微观特征以及异常与临床表现相关联，也为当时新兴的成像技术提供信息。大切片组织学的应用对了解组织的正常解剖具有重要的意义，尤其适合正在接受培训的病理学家和放射科医生，藉由与放射影像的相关性来改善其诊断前的“临床观点”，病理大切片的获得具科学研究和学习价值。
[0003]例如，在泌尿生殖系统癌症标本制备中，整个病理组织大切片技术可以用于比较三个前列腺区域的不同结构，通过大切片技术，病理学家定义并转发给临床医生的精确信息有：诊断和预后信息、具有临床意义的其他特点和具有潜在临床意义的其他特征。
[0004]肝脏病理大切片技术在肝脏恶性肿瘤的研究方面有着有极大的作用，该技术可全景观察肿瘤周围微环境、定位肿瘤与周围组织关系，肿瘤的生物学边界。肝脏组织的脱水是整个肝脏病理大切片制备环节的关键，由于肝脏质地柔软易碎，针对肝脏的5厘米以上大标本的系统性脱水程序尚无报道。一个有研究价值的肝脏病理大切片在制备时，肝脏病理组织脱水应以防止皱缩和保持组织韧性为目标。

技术实现思路

[0005]本专利技术在制作肝脏病理大切片时，由于大切片中，包含不同组织，采用传统的切片标本制作方法，不能满足脱水需求。
[0006]为了解决现有技术中的缺陷，本专利技术的目的是提供一种肝脏病理大组织的脱水方法。
[0007]第一方面，本专利技术提供一种肝脏病理大组织的脱水方法，所述脱水方法中的脱水程序为：
[0008](1)10％福尔马林1.7
‑
2.2h；
[0009](2)70％乙醇3
‑
3.5h；
[0010](3)80％乙醇2
‑
2.5h；
[0011](4)95％乙醇1.3
‑
1.8h；
[0012](5)95％乙醇0.8
‑
1.2h；
[0013](6)95％乙醇0.8
‑
1.2h；
[0014](7)100％乙醇0.8
‑
1.2h；
[0015](8)100％乙醇0.8
‑
1.2h；
[0016]所述脱水程序在32
‑
38℃下进行。
[0017]在本专利技术提供的脱水方法中，所述脱水程序可以为：
[0018](1)10％福尔马林2h；
[0019](2)70％乙醇3.5h；
[0020](3)80％乙醇2.5h；
[0021](4)95％乙醇1.3
‑
1.8h；
[0022](5)95％乙醇0.8
‑
1.2h；
[0023](6)95％乙醇0.8
‑
1.2h；
[0024](7)100％乙醇0.8
‑
1.2h；
[0025](8)100％乙醇0.8
‑
1.2h；
[0026]所述脱水程序在35℃下进行。
[0027]在本专利技术提供的脱水方法中，所述脱水程序还可以为：
[0028](1)10％福尔马林2h；
[0029](2)70％乙醇3.5h；
[0030](3)80％乙醇2.5h；
[0031](4)95％乙醇1.5h；
[0032](5)95％乙醇1h；
[0033](6)95％乙醇1h；
[0034](7)100％乙醇1h；
[0035](8)100％乙醇1h；
[0036]所述脱水程序在32
‑
38℃下进行。
[0037]70％乙醇处理3.5h，可增加组织渗透，继续增加乙醇处理梯度为80％乙醇处理2.5h，可增加组织渗透，进行缓慢脱水，防止组织骤缩，70％乙醇处理3.5h和80％乙醇处理2.5h搭配进行，有利于肝脏大组织适应高浓度乙醇的脱水处理，且有利于在脱水的同时，保持组织完整性。
[0038]作为本专利技术的一个具体实施例，在本专利技术提供的脱水方法中，所述脱水程序为：
[0039](1)10％福尔马林2h；
[0040](2)70％乙醇3.5h；
[0041](3)80％乙醇2.5h；
[0042](4)95％乙醇1.5h；
[0043](5)95％乙醇1h；
[0044](6)95％乙醇1h；
[0045](7)100％乙醇1h；
[0046](8)100％乙醇1h；
[0047]所述脱水程序在35℃下进行。
[0048]固定后的病理组织中含有较多水分，必须将组织中的水分置换出来。针对病理大组织进行水分置换时，要考虑脱水剂是否可以进入到大组织深层，同时要防止脱水剂对组织产生剧烈收缩作用，导致大组织变脆。
[0049]更具难度的是，本次病理大组织中包含不同类型的细胞及组织。本专利技术采用由低浓度逐级至高浓度的乙醇，作为脱水液，逐步置换组织内的水分。组织在乙醇中脱水时，需要准确把握脱水时间，特别是在高浓度乙醇时，若脱水时间过短则脱水不足，影响了下一步的透明；若脱水时间过长，则导致组织收缩变硬，难以切出理想切片。
[0050]在本专利技术进行病理大组织的脱水程序中，通过低浓度乙醇与高浓度乙醇(梯度乙醇)以及适当处理时间的配合，为后续使用二甲苯作为透明剂提供良好的基础。
[0051]在本专利技术提供的脱水方法中，所述肝脏病理大组织为肝门胆管癌大范围肝切除组织。
[0052]在本专利技术提供的脱水方法中，还包括，在所述脱水程序结束后，使用透明剂对所述肝脏病理大组织进行透明化，所述透明化处理为：二甲苯，2h，35℃；二甲苯，2h，35℃。
[0053]若病理组织在二甲苯中，时间过短，采用石蜡包埋后会影响切片，若组织在二甲苯中，透明时间过长，会引起组织变脆，较难切出完整切片。
[0054]在本专利技术提供的脱水方法中，二甲苯处理结束后，在60
‑
65℃下，进行石蜡包埋处理，使用石蜡1h、石蜡1h、石蜡1h和石蜡1h进行透明后病理组织的包埋。在包埋时，本专利技术发现石蜡温度过高或时间过长,均可使组织收缩、变硬、变脆、切不成片。
[0055]第二方面，本专利技术提供一种肝脏病理组织大切片的制备方法，在所述制备方法中，使用上述的脱水方法对所述肝脏病理组织进行脱水。
[0056]第三方面，本专利技术提供一种肝脏病理石蜡切片，所述石蜡切片使用上所述的脱水方法进行所述肝脏病理组织的脱水；所述石蜡切片为5cm以上的肝脏病理切片。
[0057]根据本领域技术人员的理解，本专利技术还要求保护上述脱水方法或上述的制备方法或上述石蜡切片在肝门胆管癌研究中的应用。
[0058]病理大切片的脱水目标本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种肝脏病理大组织的脱水方法，其特征在于，脱水程序包括：(1)10％福尔马林1.7
‑
2.2h；(2)70％乙醇3
‑
3.5h；(3)80％乙醇2
‑
2.5h；(4)95％乙醇1.3
‑
1.8h；(5)95％乙醇0.8
‑
1.2h；(6)95％乙醇0.8
‑
1.2h；(7)100％乙醇0.8
‑
1.2h；(8)100％乙醇0.8
‑
1.2h；所述脱水程序在32
‑
38℃下进行。2.根据权利要求1所述的脱水方法，其特征在于，所述脱水程序为：(1)10％福尔马林2h；(2)70％乙醇3.5h；(3)80％乙醇2.5h；(4)95％乙醇1.3
‑
1.8h；(5)95％乙醇0.8
‑
1.2h；(6)95％乙醇0.8
‑
1.2h；(7)100％乙醇0.8
‑
1.2h；(8)100％乙醇0.8
‑
1.2h；所述脱水程序在35℃下进行。3.根据权利要求1所述的脱水方法，其特征在于，所述脱水程序为：(1)10％福尔马林2h；(2)70％乙醇3.5h；(3)80％乙醇2.5h；(4)95％乙醇1.5h；(5)95％乙醇1h；(6)95％乙醇1h；(7)100％...

【专利技术属性】
技术研发人员：金烁，李纯，董家鸿，卢倩，项灿宏，曾建平，王良，王思远，于劭勍，姜楠，
申请(专利权)人：北京清华长庚医院，
类型：发明
国别省市：