一种分段式发酵制备畜禽抗病毒中草药制剂的方法技术

本发明专利技术属于畜禽抗病毒制剂技术领域，具体公开一种分段式发酵制备畜禽抗病毒中草药制剂的方法。将黄连20

【技术实现步骤摘要】
一种分段式发酵制备畜禽抗病毒中草药制剂的方法


[0001]本专利技术属于畜禽抗病毒制剂
，具体涉及一种分段式发酵制备畜禽抗病毒中草药制剂的方法。

技术介绍

[0002]发酵中药是一种绿色的饲料添加剂，利用益生菌对中草药进行发酵，将中草药中的大分子物质分解转化为小分子物质，可直接被动物消化道吸收利用，从而提高中草药药效，增强其作用效果，是一种极具应用潜力的健康安全的抗生素替代物。
[0003]中草药中的有效成分经过提纯后，其中还含有大量不易降解的成分，如果不加以利用，将会对生态环境的污染造成一定的影响。因此，中草药通过合理有效的利用，不仅可以提高资源利用率，节约资源，减少浪费，还可以减少对生态环境造成的污染，中药与益生菌相结合，可以为解决环境污染问题和资源再利用提供一种新的方法。

技术实现思路

[0004]针对上述现有技术的缺陷与不足，本专利技术的目的在于提供一种分段式发酵制备畜禽抗病毒中草药制剂的方法。
[0005]为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案如下：一种分段式发酵制备畜禽抗病毒中草药制剂的方法，制备步骤如下：（1）、以重量份计，称取黄连20
‑
25份、黄芩10
‑
15份、黄柏15
‑
20份、连翘10
‑
15份，分别粉碎，备用；（2）、发酵液制备：（2.1）、将凝结芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和植物乳杆菌分别活化后扩大培养，获得对应的菌液；（2.2）、将凝结芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液、植物乳杆菌菌液按照（8.5
‑
9.5）∶（1.8
‑
2.2）∶1的体积比混合，获得发酵培养液；（3）、液态发酵：（3.1）、提取工艺：将步骤（1）所得的黄芩粉和连翘粉放入水中浸润至少30 min，随后煮沸搅拌提取至少1 h，再离心过滤，获得中药提取液和药渣；（3.2）、将步骤（2.2）所得发酵培养液和步骤（3.1）所得中药提取液按照1∶（3
‑
5）的体积比加入发酵罐中，再向发酵罐中加入复合培养基，发酵培养液和中药提取液的总量与复合培养基的体积比为（0.5
‑
1.5）∶100，在搅拌速率50
‑
80 rpm、通气量1.5
‑
2.5 vvm条件下发酵48
‑
72 h，获得液体发酵液；所述复培养基的组成为：牛肉膏0.8
‑
1.2 g/L、蛋白胨8
‑
12 g/L、酵母浸出物4
‑
6 g/L、葡萄糖18
‑
22 g/L、NaCl 4
‑
6 g/L、柠檬酸三铵4
‑
6 g/L、碳酸氢钾1
‑
3 g/L、吐温
‑
80 0.5
‑
1.5 g/L、七水硫酸镁0.1
‑
0.3 g/L、硫酸锰0.04
‑
0.06 g/L，余量为水；（4）、固态发酵：
（4.1）、将步骤（3.1）所得药渣与步骤（1）所得黄连粉、黄柏粉混合；（4.2）、将步骤（3.2）所得液体发酵液和步骤（4.1）所得固体混合物按照1∶（3
‑
5）的质量比进行混合，均匀混合后分装到带有单向排气阀的发酵袋中密封，30
‑
32 ℃发酵48
‑
72 h，即得目标产物
‑‑
畜禽抗病毒中草药制剂。
[0006]较好地，步骤（1）中，粉碎至40
‑
80目。
[0007]较好地，步骤（2.1）中，凝结芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液和植物乳杆菌菌液分别按照下述过程制备获得：凝结芽孢杆菌菌液和地衣芽孢杆菌菌液的制备：将保存的凝结芽孢杆菌/地衣芽孢杆菌接种到种子斜面培养基中，35
‑
37 ℃活化培养24
‑
48 h ；然后将活化的培养液按体积比（0.5
‑
1.5）∶100接种到基础发酵培养基中，35
‑
37 ℃、150
‑
200 r/min震荡扩大培养24
‑
48 h后，制得凝结芽孢杆菌菌液/地衣芽孢杆菌菌液；所述种子斜面培养基的组成为：蛋白胨8
‑
12 g/L、牛肉膏14
‑
16 g/L、氯化钠14
‑
16 g/L、琼脂16
‑
20 g/L，余量为水；基础发酵培养基的组成为：蛋白胨8
‑
12 g/L、牛肉膏14
‑
16 g/L、氯化钠14
‑
16 g/L，余量为水；植物乳杆菌菌液的制备：将保存的植物乳杆菌接种到MRS培养基中，35
‑
37 ℃、150
‑
200 r/min震荡活化培养24
‑
48 h；然后将活化的培养液按体积比（0.5
‑
1.5）∶100接种到MRS培养基中，35
‑
37 ℃、150
‑
200 r/min震荡扩大培养24
‑
48 h后，制得植物乳杆菌菌液。
[0008]由于液态发酵和固态发酵时所用到的培养基和培养条件不一样，同一种中药液态发酵和固态发酵的产物不一样，pH产量也不一样，有些中药成分在固态发酵过程中pH出现变化或者某些代谢产物下会发生降解，失去功效，因此不是所有的中药都能利用固态发酵处理。本专利技术在发酵过程中采用分段式发酵，黄芩、连翘先经过提取，然后再将提取液和益生菌进行混合液体发酵，提取后的药渣和黄连、黄柏混合，再与液体发酵液进行混合发酵。
[0009]本专利技术制备的中草药制剂具有清热解毒、补气益气、巩固根本和增强食欲的功效，可增强提高养殖动物抗病能力，提高养殖动物机体免疫力；本专利技术制备的微生态制剂还具有绿色无残留的特点，有效提高畜禽养殖效益和养殖质量。
具体实施方式
[0010]为使本专利技术更加清楚、明确，以下对本专利技术进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。
[0011]实施例1一种分段式发酵制备畜禽抗病毒中草药制剂的方法，制备步骤如下：（1）、以重量份计，称取黄连20份、黄芩15份、黄柏15份、连翘10份，分别粉碎至60目，备用；（2）、发酵液制备：（2.1）、凝结芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液和植物乳杆菌菌液分别按照下述过程制备获得：凝结芽孢杆菌菌液和地衣芽孢杆菌菌液的制备：将保存的凝结芽孢杆菌/地衣芽孢杆菌接种到种子斜面培养基中，37 ℃活化培养24 h ；然后将活化的培养液按体积比1∶100接种到基础发酵培养基中，37 ℃、180 r/min震荡扩大培养48 h后，制得凝结芽孢杆菌菌液/地衣芽孢杆菌菌液；所述种子斜面培养基的组成为：蛋白胨10 g/L、牛肉膏15 g/L、氯
化钠15 g/L、琼脂18 g/L，余量为水；基础发本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种分段式发酵制备畜禽抗病毒中草药制剂的方法，其特征在于，制备步骤如下：（1）、以重量份计，称取黄连20
‑
25份、黄芩10
‑
15份、黄柏15
‑
20份、连翘10
‑
15份，分别粉碎，备用；（2）、发酵液制备：（2.1）、将凝结芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和植物乳杆菌分别活化后扩大培养，获得对应的菌液；（2.2）、将凝结芽孢杆菌菌液、地衣芽孢杆菌菌液、植物乳杆菌菌液按照（8.5
‑
9.5）∶（1.8
‑
2.2）∶1的体积比混合，获得发酵培养液；（3）、液态发酵：（3.1）、提取工艺：将步骤（1）所得的黄芩粉和连翘粉放入水中浸润至少30 min，随后煮沸搅拌提取至少1 h，再离心过滤，获得中药提取液和药渣；（3.2）、将步骤（2.2）所得发酵培养液和步骤（3.1）所得中药提取液按照1∶（3
‑
5）的体积比加入发酵罐中，再向发酵罐中加入复合培养基，发酵培养液和中药提取液的总量与复合培养基的体积比为（0.5
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1.5）∶100，在搅拌速率50
‑
80 rpm、通气量1.5
‑
2.5 vvm条件下发酵48
‑
72 h，获得液体发酵液；所述复培养基的组成为：牛肉膏0.8
‑
1.2 g/L、蛋白胨8
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12 g/L、酵母浸出物4
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6 g/L、葡萄糖18
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22 g/L、NaCl 4
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6 g/L、柠檬酸三铵4
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6 g/L、碳酸氢钾1
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3 g/L、吐温
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80 0.5
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1.5 g/L、七水硫酸镁0.1
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0.3 g/L、硫酸锰0.04
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0.06 g/L，余量为水；（4）、固态发酵：（4.1）、将步骤（3.1）所得药渣与步骤（1）所得黄连粉、黄柏粉混合；（4.2）、将步骤（3.2）所得液体发酵液和步骤（4.1）所得固体混合物按照...

【专利技术属性】
技术研发人员：李登云，柴保国，韩露，陈佩格，乔彬，崔俊亚，李小佳，申雅琼，
申请(专利权)人：河南牧翔生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：