阿托伐他汀在制备治疗新生儿缺氧缺血性脑病的药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了阿托伐他汀在制备治疗新生儿缺氧缺血性脑病的药物中的应用。实验表明，HI+阿托伐他汀组在HI模型建立后，灌胃给予10mg/kg/天的阿托伐他汀，经苏木素

【技术实现步骤摘要】
阿托伐他汀在制备治疗新生儿缺氧缺血性脑病的药物中的应用


[0001]本专利技术涉及阿托伐他汀的用途，尤其是在制药中的用途。

技术介绍

[0002]新生儿缺氧缺血性脑病(hypoxic
‑
ischemic encephalopathy,HIE)会影响婴儿的神经发育，也被认为是全球新生儿死亡的重要原因。新生儿HIE的发病率高达每千名活产儿26例，但它也影响到每千名活产儿中1到8例新生儿。尚存的儿童中约有25％患有永久性神经功能缺损，例如智力低下、发育迟缓、运动或认知障碍、脑瘫和癫痫病。临床上现有的治疗手段非常有限，主要是亚低温和对症支持治疗，缺乏特异的有效治疗手段，因此积极探寻新生儿HIE的干预和治疗手段具有重要和积极意义。
[0003]阿托伐他汀，其化学名称为(3R,5R)
‑7‑
[2
‑
(4
‑
氟苯基)
‑3‑
苯基
‑4‑
(苯基氨基甲酰基)
‑5‑
异丙基
‑
吡咯
‑1‑
基]‑
3,5
‑
二羟基庚酸，分子式为C
66
H
68
CaF2N4O
10
，分子量为1155.34，化学结构式如下：
[0004][0005]阿托伐他汀为他汀类血脂调节药，可减少胆固醇的合成，降低血清胆固醇水平并降低发生心血管疾病的风险。阿托伐他汀现在主要用于治疗高胆固醇血症和冠心病。
专利
技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于证明阿托伐他汀的新用途，即在制药中的新用途，为治疗新生儿HIE提供新的药品。
[0007]本专利技术通过实验证明：新生7日龄(postnatal day 7,P7)SD大鼠缺氧缺血(hypoxic
‑
ischemic,HI)后灌胃给予阿托伐阿汀治疗3天(10mg/kg/天和20mg/kg/天)，血肝肾功能结果显示，20mg/kg/天阿托伐他汀组的碱性磷酸酶水平增加，可能有肝损伤，而10mg/kg/天阿托伐他汀组的谷丙转氨酶、碱性磷酸酶和血尿素氮无明显变化，无明显肝肾损伤，故后续选择用10mg/kg/天阿托伐他汀处理大鼠来进行实验。对于10mg/kg/天阿托伐
他汀处理的大鼠，苏木素
‑
伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色显示，阿托伐他汀可减轻HI后大脑皮层的组织溶解、细胞坏死和和核固缩。TTC(2,3,5—氯化三苯基四氮唑)染色显示，与假手术组(Sham组)相比，缺氧缺血组(HI组)的脑梗体积增加，而经10mg/kg/天阿托伐他汀治疗后可减少HI后的脑梗死体积。Morris水迷宫实验显示，阿托伐他汀治疗降低了HI大鼠平均逃逸潜伏期并增加了平台穿越次数。上述结果差异均具有统计学意义，说明阿托伐他汀可减少HI诱导的脑梗塞和改善学习记忆能力。用NeuN标记神经元，然后NeuN和TUNEL共染，发现经10mg/kg/天阿托伐他汀治疗，可减少HI后神经元TUNEL的阳性细胞数目。进一步将NeuN和cleaved caspase
‑
3共染，结果显示，经10mg/kg/天阿托伐他汀治疗可减少HI后神经元cleaved caspase
‑
3的阳性细胞数目。上述结果差异均具有统计学意义，说明阿托伐他汀可减少HI诱导的神经元凋亡。因此，可将阿托伐他汀作为治疗新生儿HIE的药品。
[0008]本专利技术具有以下有益结果：
[0009]1本专利技术对已知的降胆固醇药物阿托伐他汀发掘了新的医疗用途，开拓了一个新的应用领域。
[0010]2本专利技术为新生儿HIE的治疗提供一种有效的新药品，具有明显的社会效益和经济效益。
附图说明
[0011]图1是SD大鼠缺氧缺血后灌胃给予不同剂量阿托伐他汀对肝肾功能的影响图，其中，A图为不同剂量阿托伐他汀与谷丙转氨酶的关系图，B图为不同剂量阿托伐他汀与碱性磷酸酶的关系图，C图为不同剂量阿托伐他汀与血尿素氮的关系图。
[0012]图2是HE染色观察实验大鼠脑组织病理改变的照片，其中，Sham为假手术组，HI为缺氧缺血组，HI+阿托伐他汀为阿托伐他汀处理组。
[0013]图3是TTC检测实验大鼠的脑梗死结果照片，其中，Sham为假手术组，HI为缺氧缺血组，HI+阿托伐他汀为阿托伐他汀处理组，缺氧缺血后给予阿托伐他汀72小时。
[0014]图4是实验大鼠脑梗死的TTC定量分析结果图。
[0015]图5是Morris水迷宫实验中，实验大鼠训练天数与潜伏期时间的变化曲线图。
[0016]图6是Morris水迷宫实验中，实验大鼠穿越平台次数图。
[0017]图7是实验大鼠大脑皮层TUNEL和NeuN共染的照片，其中，Sham为假手术组，HI为缺氧缺血组，HI+阿托伐他汀为阿托伐他汀处理组，TUNEL为凋亡的细胞，NeuN为神经元，Merge为TUNEL和NeuN的整合。
[0018]图8是实验大鼠大脑皮层TUNEL和NeuN共染的定量分析结果图。
[0019]图9是免疫荧光检测实验大鼠大脑皮层cleaved caspase
‑
3和NeuN共染的照片，其中，Sham为假手术组，HI为缺氧缺血组，HI+阿托伐他汀为阿托伐他汀处理组，cleaved caspase
‑
3为凋亡的细胞，NeuN为神经元，Merge为cleaved caspase
‑
3和NeuN的整合。
[0020]图10是免疫荧光检测实验大鼠大脑皮层cleaved caspase
‑
3和NeuN共染的定量分析结果图。
具体实施方式
[0021]1实验材料与试剂
[0022]1.1实验动物
[0023]健康清洁级7日龄新生SD大鼠，雌雄不限，体重14
‑
22克，购自成都达硕实验动物有限公司。实验分为两部分，第一部分确定适合的阿托伐他汀浓度。实验动物随机分为假手术组(Sham)、缺氧缺血组(HI)、10mg/kg/天阿托伐他汀处理组和20mg/kg/天阿托伐他汀处理组，每组6
‑
8只大鼠。根据血肝肾功能评判药物的安全性，选择安全的阿托伐他汀剂量。第二部分随机分为Sham组、HI组和阿托伐他汀处理组(HI+阿托伐他汀)，每组30只大鼠。HI+阿托伐他汀组在缺氧缺血后灌胃给予10mg/kg/天阿托伐他汀，共3天。Sham组和HI组灌胃给予10mg/kg/天溶剂(0.5v.％DMSO+99.5v.％PBS)。术后3天(P10)取脑组织进行HE染色、TTC染色、TUNEL染色和免疫荧光，观察脑组织病理和脑梗体积变化及神经元的凋亡情况。术后21天(P28)取三组大鼠进行Morris水迷宫实验，为期6天。
[0024]1.2主要试剂
[0025]阿托伐他汀和2,3,5
‑
氯化三苯本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.阿托伐他汀在制备治疗新生儿缺氧缺血性脑病的药物中的应用。2.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：屈艺，母得志，余露婷，应俊杰，李世平，唐军，石晶，王华，夏斌，李晋辉，赵凤艳，刘倩，岳艳，周睿曦，黄凌依，
申请(专利权)人：四川大学华西第二医院，
类型：发明
国别省市：