针对降钙素基因相关肽(CGRP)的肽免疫原及其用于预防和治疗偏头痛的制剂制造技术

本公开是关于靶向降钙素基因相关肽(CGRP)之部分的肽免疫原构建体、含有此构建体的组合物、利用此构建体所引发的抗体以及用以制备和使用此构建体及其组合物的方法。公开的肽免疫原构建体具有超过约30个的氨基酸，且含有(a)具有来自全长CGRP蛋白之CGRP受体结合或活化区域的约7个以上连续氨基酸残基的B细胞表位，(b)异源性Th表位；以及(c)任选的异源性间隔区。公开的CGRP肽免疫原构建体可刺激针对CGRP的高特异性抗体的产生，用于预防及/或治疗偏头痛。疗偏头痛。疗偏头痛。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】针对降钙素基因相关肽(CGRP)的肽免疫原及其用于预防和治疗偏头痛的制剂
本申请是PCT国际申请，其要求2018年12月31日提交的美国临时申请序列号62/787,102的优先权(其全部内容通过引用并入本文)。


[0001]本公开是关于靶向降钙素基因相关肽(CGRP)的肽免疫原构建体及其制剂，以用于预防和治疗偏头痛。

技术介绍

[0002]偏头痛是一种常见的身体病况，在美国影响多达3700万人。偏头痛被认为是一种全身性疾病，而不仅是头痛。最近的研究表明，早在偏头痛症状出现前24小时，大脑中的变化就可能开始发生。偏头痛的症状因患病个体而异，但可能包括严重的搏动性头痛(通常仅在头部的一侧)、恶心、呕吐、光敏感(畏光)、声音敏感(畏声)或这些症状的组合。即使在头痛消失后，这些症状仍然持续。
[0003]偏头痛有多种亚型，其症状包括虚弱、麻木、视力改变或丧失、眩晕和说话困难(一些患者可能看起来像是中风)。由这种慢性疾病引起的无能是非常严重的，可导致工作日的中断和丧失参加家庭活动的能力。
[0004]有时人们可能会使用“顿挫性(Abortive)”药物治疗，这种药物在早期服用时可以阻止偏头痛的发作。对于许多患者而言，预防性药物可以减少偏头痛的发生频率和严重程度。但是，许多用于预防或治疗偏头痛的药物主要是针对其他疾病(例如癫痫发作、抑郁、高血压和肌肉痉挛)而开发的。
[0005]研究人员数十年来一直致力于开发专门针对偏头痛的“靶向”预防疗法。降钙素基因相关肽(CGRP)是在周围和中枢神经元中合成的分子。它涉及包括偏头痛在内的不同疼痛过程，并且作用如同血管扩张剂。用于偏头痛的顿挫性药物治疗着重在于在偏头痛开始时阻止CGRP活化。已显示小分子CGRP拮抗剂药物可基于某些措施减轻偏头痛，但这些拮抗剂可能具有包括肝毒性在内的严重的副作用。
[0006]靶向CGRP分子的单株抗体对疼痛过程具有抑制效果，且可用作顿挫性药物治疗。针对CGRP的单株抗体可具有长半衰期，这意味着其与每日给药的常规的偏头痛药物(除了肉毒杆菌毒素以外，肉毒杆菌毒素为每90天注射一次) 相比可以较低的频率给药。用于偏头痛的单株抗体可以每月一次的频率进行皮下注射，且到目前为止已证实其在偏头痛的天数方面有统计学上显著的减少。多家不同的制药公司正在开发这些新的抗体以供FDA批准。
[0007]虽然可以证明此种单株抗CGRP或抗CGRP受体抗体在偏头痛的免疫治疗是有效的，但是它们昂贵且必须每月给药以维持对血清和体液CGRP水平的充分抑制以及由此产生的临床效益。通过安全且耐受性良好的疫苗接种方法之靶向CGRP分子的具有成本效益的免疫治疗对于偏头痛治疗而言仍是令人兴奋的新干预手段和发展。
[0008]典型的肽/半抗原
‑
载体蛋白免疫原制备方法存在许多缺点和不足。例如，制备方
法涉及复杂的化学耦合步骤，它们使用昂贵的药物级KLH或类毒素蛋白作为T辅助细胞载体，利用此蛋白免疫原所引发的大多数抗体都是针对载体蛋白而不是针对目标B细胞表位等。
[0009]鉴于使用单株抗体治疗和典型的肽/半抗原
‑
载体蛋白制剂在经济和实践上的缺点和局限性，显然仍有需求(此需求在于要开发能够针对CGRP上之功能位点引发高特异性免疫反应的有效免疫治疗组合物，此组合物须可易于患者使用，能够按照严格的优良制备作业规范(GMP)生产，并且需具有成本效益以在全球应用治疗偏头痛患者)未被满足。
[0010]针对位于以上
技术介绍
部分中的陈述可以找到引用其他支持文献的两篇文献回顾，在此以引用的方式将其整体并入本文。第一篇文献包含有关CGRP和CGRP受体的最新评论(网站：en.wikipedia.org/wiki/Calcitonin_gene
‑
related_peptide)，而第二篇文献探讨CGRP讯息传递的生物学特性、CGRP在偏头痛中的作用的重要临床证据(包括靶向CGRP治疗的疗效)、CGRP在三叉血管系统中的作用，以及对于三叉神经节在偏头痛病理生理学中之重要作用的新见解(Edvinsson，etal.，2018)。
[0011]参考文献
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″
AdjuvantactivityofincompleteFreund
′
sadjuvant，
″
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″
Calcitoningene
‑
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″
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‑
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‑
875(2004).
[0019]8.WATKINS，H.A.，etal.，“Structure...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种CGRP肽免疫原构建体(immunogen construct)，其具有约30个或更多个的氨基酸，以以下分子式表示：(Th)
m
‑
(A)
n
‑
(CGRP功能性B细胞表位肽)
‑
X或(CGRP功能性B细胞表位肽)
‑
(A)
n
‑
(Th)
m
‑
X或(Th)
m
‑
(A)
n
‑
(CGRP功能性B细胞表位肽)
‑
(A)
n
‑
(Th)
m
‑
X其中Th为一异源性T辅助细胞表位(epiptope)；A为一异源性间隔区；(CGRP功能性B细胞表位肽)为具有衍生自CGRP受体结合或活化区域的7至约30个氨基酸残基的一B细胞表位肽，该CGRP受体结合或活化区域具有CGRP(SEQ ID NOs：1
‑
3)之SEQ ID NOs：4
‑
13和15
‑
24；X为一氨基酸的一α
‑
COOH或α
‑
CONH2；m为1至约4；以及n为0至约10。2.如权利要求1所述的CGRP肽免疫原构建体，其中该CGRP受体结合或活化区域系选自由SEQ ID NOs：4
‑
13和15
‑
24组成之群组。3.如权利要求1或2任一所述的CGRP肽免疫原构建体，其中该Th表位系选自由SEQ ID NOs：74
‑
115组成之群组。4.如权利要求1所述的CGRP肽免疫原构建体，其中该肽免疫原构建体系选自由SEQ ID NOs：120
‑
127和130
‑
180组成之群组。5.一种CGRP肽免疫原构建体，包含：a.一B细胞表位，其包含来自该CGRP序列SEQ ID NOs：1至3的约7至约30个的氨基酸残基；b.一T辅助细胞表位，其包含选自由SEQ ID NOs：74
‑
115及其任意组合组成之群组的一氨基酸序列；以及c.一任选的异源性间隔区，其系选自由一氨基酸、Lys
‑
、Gly
‑
、Lys
‑
Lys
‑
Lys
‑
、(α，ε
‑
N)Lys、ε
‑
N
‑
Lys
‑
Lys
‑
Lys
‑
Lys(SEQ ID NO：72)、Lys
‑
Lys
‑
Lys
‑
ε
‑
N
‑
Lys(SEQ ID NO：73)和Pro
‑
Pro
‑
Xaa
‑
Pro
‑
Xaa
‑
Pro(SEQ ID NO：71、)及其任意组合组成之群组，其中该B细胞表位系直接或通过该任选的异源性间隔区共价连接至该T辅助细胞表位。6.如权利要求5所述的CGRP肽免疫原构建体，其中该B细胞表位系选自由SEQ ID NOs：4
‑
13和15
‑
24组成之群组。7.如权利要求5所述的CGRP肽免疫原构建体，其中该T辅助细胞表位系选自由SEQ ID NOs：68、71、74
‑
82、87、89...

【专利技术属性】
技术研发人员：王长怡，
申请(专利权)人：联脑科学有限公司，
类型：发明
国别省市：