检测猫血清中新型冠状病毒SARS-CoV-2抗体的试纸条及制备方法技术

本发明专利技术公开了新型冠状病毒RBD抗原表位SEQ ID：01和SEQ ID：02，含有该抗原表位的重组蛋白可用于抗新型冠状病毒的IgG抗体检测的制备。本发明专利技术进一步公开了新型冠状病毒RBD抗原在制备检测猫血清中新型冠状病毒抗体的免疫层析产品尤其是胶体金免疫层析试纸条中的应用。本发明专利技术本与核酸检测技术相比，具有检测快速、简单操作、价格便宜、适应于广泛使用的优点。点。点。

【技术实现步骤摘要】
检测猫血清中新型冠状病毒SARS-CoV-2抗体的试纸条及制备方法


[0001]本专利技术涉及免疫检测
，尤其涉及一种检测猫血清中新冠病毒SARS-CoV-2抗体的胶体金试纸条及制备方法。

技术介绍

[0002]新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的病原体最近已经确认，是一种正链RNA病毒，基因组为单链RNA，含有Poly(A)，总长接近30kb。病毒表面有约20nm左右的棒状结构，呈皇冠状。新型冠状病毒(SARS-CoV-2)是目前第7种已知的可以感染人类的冠状病毒，其可以引起新型冠状病毒肺炎(COVID-19)。其余6种冠状病毒分别是HCoV-229E、HCoV-OC43、HCoV-NL63、HCoV-HKU1、SARS-CoV(引发重症急性呼吸综合征)和MERS-CoV(引发中东呼吸综合征)。人感染了SARS-CoV-2后常见体征有呼吸道症状、发热、咳嗽、气促和呼吸困难等。在较严重病例中，可导致肺炎、严重急性呼吸综合征、肾衰竭，甚至死亡。目前已在全球造成了大量的感染病例以及严重的经济损失。由于还没有针对SARS-CoV-2的特效药物和疫苗产品。因此，检测SARS-CoV-2病例并将其隔离成为了阻断这场疫病大流行的唯一办法。
[0003]蝙蝠最先被认为是SARS-CoV-2的自然宿主，但蝙蝠并不是SARS-CoV-2的唯一自然宿主。华南农业大学的研究者率先在穿山甲上鉴定到了同源性极高的毒株。随后，比利时的研究人员和哈尔滨兽医研究所的研究人员也都发现猫可以被SARS-CoV-2感染并且传播该病毒。穿山甲作为国家二级保护动物，其受到国家严格的管控。尽管偶尔还有偷猎的情况存在，但是总体上穿山甲与人类直接接触的几率较小，因此未来成为COVID-19爆发的病毒源头的可能性也较小。然而猫作为人类饲养的主要伴侣动物受到民众的普遍喜爱，普通民众家中的饲养量极大。一旦发生SARS-CoV-2通过猫感染人的事件，极有可能成为下次人群COVID-19爆发的导火索。目前，由于民众害怕被猫感染SARS-CoV-2，全国各地已经出现多起虐杀猫的事件，使得因疫情恐慌的民众与爱猫的民众之间产生严重的对立情绪。因此，快速筛查出感染了SARS-CoV-2的猫，对疫情的全面防控和缓解民众对立情绪至关重要。
[0004]核酸检测是目前判定COVID-19的主要技术手段，但是核酸检测本身也存在着检测准确率低的问题。并且核酸检测需要专业技术人员操作、购买昂贵的设备、耗时长等问题，不适合普通民众快速筛查感染了SARS-CoV-2的猫。因此，现在急需一种快速、简单操作、价格便宜、广泛使用的猫用COVID-19检测手段。

技术实现思路

[0005]为了解决现有技术的问题，本专利技术提供了一种简便、快速的检测猫血清中SARS-CoV-2抗体(IgG)的检测胶体金试纸条的技术。
[0006]一方面，本专利技术公开了一种新型冠状病毒RBD抗原，其基因序列如SEQ ID NO：1：
[0007][0008][0009]另一方面，本专利技术公开了一种新型冠状病毒RBD抗原，其氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示：
[0010][0011]需要说明的是，上述新型冠状病毒RBD抗原可以为重组蛋白如重组新型冠状病毒SARS-CoV-2纤突蛋白rRBD。
[0012]在其他可实施的方式中，还可以使用其他表达系统制备重组rRBD蛋白。
[0013]又一方面，本专利技术公开了上述新型冠状病毒RBD抗原在制备检测猫血清中新型冠状病毒抗体的免疫层析产品中的应用。
[0014]作为本专利技术实施方式的进一步改进，所述免疫层析产品为胶体金免疫层析试纸条。
[0015]再一方面，本专利技术公开了上述检测新型冠状病毒抗体的胶体金免疫层析试纸条，以SEQ ID NO：1所示基因序列或SEQ ID NO：2所示氨基酸序列的蛋白为检测抗原。
[0016]作为本专利技术实施方式的进一步改进，所述检测新型冠状病毒抗体的胶体金免疫层析试纸条包括背衬以及粘贴在所述背衬上的样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜和吸收垫，所述硝酸纤维素膜上划有包被SEQ ID NO：1所示基因序列或SEQ ID NO：2所示氨基酸序列的蛋白的检测线。
[0017]作为本专利技术实施方式的进一步改进，所述硝酸纤维素膜置于所述背衬的上面，所述样品垫平贴于所述硝酸纤维素膜的一侧，所述吸收垫平贴于所述硝酸纤维素膜的另一
侧；
[0018]所述胶体金结合垫平贴于所述样品垫与硝酸纤维素膜之间，所述胶体金结合垫的一端压于所述样品垫之下，另一端覆盖于所述硝酸纤维素膜之上，形成试纸条真空封装。
[0019]作为本专利技术实施方式的进一步改进，所述硝酸纤维素膜上划有质控线(C线)，所述质控线为包被羊抗猫lgG抗体的质控线，或包被兔抗猫lgG抗体的质控线，或包被其他来源的抗猫lgG抗体的质控线。
[0020]作为本专利技术实施方式的进一步改进，所述胶体金结合垫喷涂有胶体金颗粒标记的金黄色葡萄球菌蛋白A、链球菌蛋白A或链球菌蛋白G的复合物。
[0021]作为本专利技术实施方式的进一步改进，所述背衬为聚乙烯背衬。
[0022]在其他可实施的方式中，也存在使用链球菌蛋白A或者链球菌蛋白G作为T线。
[0023]再一方面，本专利技术还公开了一种体外检测样品中是否存在新型冠状病毒抗体的方法，包括步骤：
[0024](a)将样品与上述的新型冠状病毒RBD抗原接触；
[0025](b)检测是否形成抗原-抗体复合物：若形成复合物就表示样品中存在新型冠状病毒抗体。
[0026]其中，步骤(b)的检测方法是使用上述的检测新型冠状病毒抗体的胶体金免疫层析试纸条。
[0027]本专利技术进一步公开了检测新型冠状病毒抗体的胶体金免疫层析试纸条在猫血清中新型冠状病毒早期诊断中的应用。
[0028]本专利技术具有如下有益效果：
[0029]1、本专利技术通过对新冠病毒潜在抗原蛋白的序列分析，找到了具有很强抗原性的氨基酸序列，通过合成多肽合成这些潜在抗原靶位，再由这些多肽免疫获得的抗体，研制出一种通过检测猫血清新冠病毒，进行猫临床早期新冠病毒诊断的试剂条；
[0030]2、本专利技术可显著提高诊断效率，并且简便、准确率高，克服了现有技术中假阳性率高的问题；
[0031]3、因为本专利技术的新冠病毒特异性多肽、多肽偶联物与抗新冠病毒抗体的亲和力高，本专利技术抗体与新冠病毒的亲和力高，因此，本专利技术的检测方法灵敏、简便、准确率高；
[0032]4、与现有技术中的核酸检测技术相比，具有检测快速、简单操作、价格便宜、适应于广泛使用的优点。
附图说明
[0033]为了更清楚地说明本专利技术实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0034]图1是本专利技术实施例提供的检测新型冠状本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种新型冠状病毒RBD抗原，其特征在于，其基因序列如SEQID NO：1：2.一种新型冠状病毒RBD抗原，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示：3.根据权利要求1或2中所述新型冠状病毒RBD抗原在制备检测猫血清中新型冠状病毒抗体的免疫层析产品中的应用。4.根据权利要求3所述新型冠状病毒RBD抗原在制备检测猫血清中新型冠状病毒抗体的免疫层析产品中的应用，其特征在于，所述免疫层析产品为胶体金免疫层析试纸条。5.一种检测新型冠状病毒抗体的胶体金免疫层析试纸条，其特征在于，以权利要求1所示基因序列或权利要求2所示氨基酸序列的蛋白为检测抗原。6.根据权利要求5所述检测新型冠状病毒抗体的胶体金免疫层析试纸条，其特征在于，包括背衬以及粘贴在所述背衬上的样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜和吸收垫，所述硝酸纤维素膜上划有包被权利要求1所示基因序列或权利要求2所示氨基酸序列的蛋白的检测线。7.根据权利要求6所述检测新型冠状...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈博，王儒恺，
申请(专利权)人：武汉当康兴众生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：