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一种测量补体蛋白C3表达量的方法技术

技术编号:30423999 阅读:31 留言:0更新日期:2021-10-24 16:53
本发明专利技术属于生物医药技术领域,涉及测量补体蛋白C3表达量的方法,具体涉及血清中补体蛋白C3的MRM/SRM靶向定量方法及其应用。该方法使用质谱检测和/或定量补体蛋白C3的肽段片段的含量,通过步骤:血清蛋白质的前处理,包括血清样品的收集,还原烷基化与酶解;MRM/SRM方法开发,包括C3蛋白标志性肽段的设计,同位素内标肽的合成,监测母子离子对的筛选以及LC-MRM条件的优化;临床血清样本中C3的MRM/SRM检测与数据分析。本方法可用于辅助胃癌的诊断、检测、病程监测以及预后评估。病程监测以及预后评估。

【技术实现步骤摘要】
JE.Complement C3 Is Activated in Human AD Brain and Is Required for Neurodegeneration in Mouse Models of Amyloidosis and Tauopathy.Cell Rep.2019Aug 20;28(8):2111-2123.e6.
[0011]7)Zhu D,Wang J,Ren L,Li Y,Xu B,Wei Y,Zhong Y,Yu X,Zhai S,Xu J,Qin X.Serum proteomic profiling for the early diagnosis of colorectal cancer.J Cell Biochem.2013 Feb;114(2):448-55.
[0012]8)Yuan K,Ye J,Liu Z,Ren Y,He W,Xu J,He Y,Yuan Y.Complement C3 overexpression activates JAK2/STAT3 pathway and correlates with gastr本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种测量补体蛋白C3表达量的方法,其特征在于,包括使用质谱检测和/或定量补体蛋白C3的肽段片段的含量;所述的含量是绝对含量或者相对含量。2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的质谱包括三重四级杆质谱,Q-TOF质谱,串联离子阱质谱,MALDI-TOF质谱或者QE-Orbitrap质谱。3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的质谱的模式是选择反应检测或多反应检测。4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的补体蛋白C3的肽段片段是序列如SEQ ID NO 1所示的补体蛋白C3标志性肽段,以及被同位素标记、序列相同的重标内标肽。5.如权利要求4所述的方法,其特征在于,所述的重标内标肽是一个或多个氨基酸残基被一种或多种同位素标记的、序列与SEQ ID NO 1相同的多肽。6.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的方法检测的生物样品包括血液样品,血液样品,血清/血浆/血液样品,脑脊液样品,唾液样品,流泪样品,腹水样品,淋巴液样品,肺积液样品,细胞或实体组织样品。7.如权利要求6所述的方法,其特征在于,所述的实体组织样品包括临床/基础研究中取得的新鲜或福尔马林固定的各种人体组织。8.如权利要求6所述的方法,其特征在于,所述的实体组织样品是多种上皮组织,多种脏器组织或者多种神经组织。9.如权利要求1所述的方法,其特征在于,使用该方法检测的样本中包括蛋白质消化物。10.如权利要求1所述的方法,其特征在于,使用该方法检测的样本中含有蛋白酶消化物或者胰蛋白酶消化物。11.如权利要求1-10中任意一项所述的方法,其特征在于,包括以下步骤:血清蛋白质的前处理;MRM/SRM方法开发;和/或样本中C3的MRM/SRM检测与数据分析。12.如权利要求11所述的方法,其特征在于,所述的血清蛋白质的前处理包括血清样品的收集和/或还原烷基化与酶解。13.如权利要求11所述的方法,其特征在于,所述的MRM/SRM方法开发包括C3蛋白标志性肽段的设计,同位素内标肽的合成,监测母子离子对的筛选和/或LC-MRM条件的优化。14.如权利要求...

【专利技术属性】
技术研发人员:钟凡张扬
申请(专利权)人:复旦大学
类型:发明
国别省市:

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