微流控检测芯片制造技术

本实用新型专利技术涉及一种微流控检测芯片，所述微流控检测芯片包括包括至少一个检测单元，所述检测单元包括加样腔体、免疫结合池、免疫检测池、免疫清洗液池、免疫缓冲液池、核酸检测池和废液池。本实用新型专利技术的微流控检测芯片以微流控技术作为载体，将肿瘤标志物检测的免疫学检测方法和分子生物学检测方法结合于封闭的微流控芯片中，实现少量的样本同时完成不同类别肿瘤标志物的检测与分型，得出针对性的基于免疫及分子检测项目的测试结果，能够为临床判断提供更加细致、全面、多维度的数据，而且简化了流程和仪器设备的需求，缩短了检测周期，减少了交叉污染，也提高了检测结果的有效性和准确性。性。性。

【技术实现步骤摘要】
微流控检测芯片


[0001]本技术涉及微流控
，特别是涉及一种微流控检测芯片。

技术介绍

[0002]肿瘤标志物检测的免疫学检测方法是以体液中的蛋白标志物作为抗原并与用酶、同位素、生物素和亲和素、荧光素等标记的抗体产生特异性结合而被定位和检测，常规的用于酶联免疫分析、化学发光免疫分析、放射免疫分析等。虽然已经发现了很多种蛋白标志物，但并不是所有的癌症都有蛋白标志物，也不是所有的蛋白标志物升高都是癌症引起的，某些非癌症的情况也会导致某些蛋白标志物升高。
[0003]此外，分子生物学检测方法(液体活检)已经持续应用于癌症病人的病程管理当中，近些年来，其应用潜力也得到了积极开发，它能够弥补免疫学检测方法的一些缺陷。液体活检通过采集患者血液、尿液等体液标本中的肿瘤相关产物，包括血液中游离的循环肿瘤细胞(CTC)、循环肿瘤DNA(ctDNA)和外泌体等，再结合肿瘤靶基因的分子生物学检测方法，实现高通量、高特异性和高敏感性检测结果，对血浆和其他体液中游离DNA(cfDNA)的检测分析已经成功鉴别到了多种癌症相关分子类型，包括基因突变、拷贝数变异、移位、甲基化变异、基因表达变异及病毒DNA等。
[0004]以上提及的肿瘤检测手段，无论是免疫学检测方法(蛋白标志物检测)还是分子生物学检测方法(液体活检)均有各自的优势，又具有很强的互补性，两者本质上是针对不同时间段、不同测试靶对象的诊断手段。将二者的检测结果结合，将能够得到更加全面、综合的针对不同肿瘤阶段的患者在免疫水平和分子水平上的动态数据和指标，能够为临床医生在实际诊断中提供更好的参考依据。但是以常规方式分别进行免疫学检测方法和分子生物学检测方法不仅流程复杂，而且需要分别独立使用多种仪器设备，存在大量繁琐的人工操作，检测周期长，设备间的样本转移也使得检测过程有极大的风险出现交叉污染，从而影响检测结果。

技术实现思路

[0005]基于此，有必要提供一种既能进行免疫学检测方法又能进行分子生物学检测方法的微流控检测芯片。
[0006]一种微流控检测芯片，包括至少一个检测单元，所述检测单元包括加样腔体、免疫结合池、免疫检测池、免疫清洗液池、免疫缓冲液池、核酸检测池和废液池；
[0007]所述加样腔体用于样本液的输入和存储；所述免疫结合池与所述加样腔体连接，所述免疫结合池用于预装包被有捕获抗体或捕获抗原的捕获载体；所述免疫检测池与所述免疫结合池连接，所述免疫检测池用于预装标记抗体；所述免疫清洗液池与所述免疫检测池连接，所述免疫清洗液池用于预装能够洗去所述标记抗体的清洗缓冲液；所述免疫缓冲液池与所述免疫检测池连接，所述免疫缓冲液池用于预装检测缓冲液；所述废液池与所述免疫检测池连接以用于收容废液；所述核酸检测池与所述加样腔体连接，所述核酸检测池
用于预装能够扩增靶序列的PCR反应试剂；
[0008]所述微流控检测芯片具有旋转中心，所述免疫结合池、所述免疫检测池和所述废液池自所述旋转中心近心端至远心端依次分布，所述免疫清洗液池和所述免疫缓冲液池相对于所述免疫检测池更靠近所述旋转中心，所述核酸检测池相对于所述废液池更靠近所述旋转中心，所述免疫结合池、所述免疫检测池和所述废液池之间均设有阀门。
[0009]本技术的微流控检测芯片在使用时，可将样本液加至加样腔体，然后将样本液释放至免疫结合池与捕获载体孵育，则待测抗原被捕获载体所捕获。然后将捕获载体和样本液释放至免疫检测池以与标记抗体孵育，从而形成标记抗体
‑
待测抗原
‑
捕获载体复合物，将孵育后的液体排入废液池并将捕获载体留存于免疫检测池。接着释放免疫清洗液池的清洗缓冲液至免疫检测池进行清洗，然后将清洗液排入废液池并将捕获载体留存于免疫检测池，则未结合至捕获载体的标记抗体及杂质等被洗至废液池。然后释放免疫缓冲液池的检测缓冲液至免疫检测池，检测免疫检测池中的标记物，即可完成免疫学检测。同时，还可以将加样腔体中的部分样本液释放至核酸检测池，然后进行PCR扩增和检测，即可完成分子生物学检测。本技术的微流控检测芯片以微流控技术作为载体，将肿瘤标志物检测的免疫学检测方法(蛋白标志物检测)和分子生物学检测方法(液体活检)结合于封闭的微流控芯片中，实现少量的样本同时完成不同类别肿瘤标志物的检测与分型，得出针对性的基于免疫及分子检测项目的测试结果，能够为临床判断提供更加细致、全面、多维度的数据，而且简化了流程和仪器设备的需求，缩短了检测周期，减少了交叉污染，也提高了检测结果的有效性和准确性。
[0010]在其中一个实施例中，所述加样腔体包括第一加样池和第二加样池，所述免疫结合池与所述第一加样池连接，所述核酸检测池与所述第二加样池连接。
[0011]在其中一个实施例中，所述检测单元还包括分流池，所述分流池与所述免疫结合池连接，所述免疫检测池通过所述分流池与所述免疫结合池连接，所述核酸检测池通过所述分流池和所述免疫结合池与所述加样腔体连接；所述分流池相对于所述免疫结合池更远离所述旋转中心，且相对于所述免疫检测池和所述核酸检测池更靠近所述旋转中心，所述分流池与所述免疫检测池和所述核酸检测池之间均设有阀门。
[0012]在其中一个实施例中，所述检测单元还包括样本裂解池和裂解液池，所述样本裂解池用于预装能够使核酸释放的酶，所述裂解液池用于预装样本裂解液；所述样本裂解池分别与所述加样腔体和所述裂解液池连接，所述核酸检测池与所述样本裂解池连接，所述样本裂解池相对于所述加样腔体更远离所述旋转中心，且相对于所述核酸检测池更靠近所述旋转中心，所述裂解液池相对于样本裂解池更靠近所述旋转中心。
[0013]在其中一个实施例中，所述检测单元还包括核酸富集池、核酸清洗液池和核酸洗脱液池，所述核酸富集池用于预装能够结合核酸的核酸载体，所述核酸清洗液池用于预装能够洗去非核酸杂质的清洗液，所述核酸洗脱液池用于预装能够使核酸与所述核酸载体分离的洗脱液；所述核酸富集池分别与所述样本裂解池、所述核酸清洗液池和所述核酸洗脱液池连接，所述核酸检测池和所述废液池分别与所述核酸富集池连接，所述核酸富集池相对于所述样本裂解池、所述核酸清洗液池和所述核酸洗脱液池更远离所述旋转中心，且相对于所述核酸检测池和所述废液池更靠近所述旋转中心。
[0014]在其中一个实施例中，所述核酸检测池的数量为多个，所述检测单元还包括分液
流道和第二虹吸通道，所述分液流道通过所述第二虹吸通道与所述核酸富集池连接并自该连接端围绕所述旋转中心延伸，多个所述核酸检测池在所述分液流道的外侧围绕所述旋转中心分布，且各所述核酸检测池均分别与所述分液流道连接。
[0015]在其中一个实施例中，所述核酸清洗液池的数量为至少两个，其中至少一个所述核酸清洗液池用于预装含有醇类清洗剂的清洗液，且至少一个所述核酸清洗液池用于预装能够洗去所述醇类清洗剂的清洗液。
[0016]在其中一个实施例中，所述检测单元还包括沉淀池、分离池和第一虹吸通道，所述分离池相对于所述沉淀池更靠近所述旋转中心，所述沉淀池与所述加样本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种微流控检测芯片，其特征在于，包括至少一个检测单元，所述检测单元包括加样腔体、免疫结合池、免疫检测池、免疫清洗液池、免疫缓冲液池、核酸检测池和废液池；所述加样腔体用于样本液的输入和存储；所述免疫结合池与所述加样腔体连接，所述免疫结合池用于预装包被有捕获抗体或捕获抗原的捕获载体；所述免疫检测池与所述免疫结合池连接，所述免疫检测池用于预装标记抗体；所述免疫清洗液池与所述免疫检测池连接，所述免疫清洗液池用于预装能够洗去所述标记抗体的清洗缓冲液；所述免疫缓冲液池与所述免疫检测池连接，所述免疫缓冲液池用于预装检测缓冲液；所述废液池与所述免疫检测池连接以用于收容废液；所述核酸检测池与所述加样腔体连接，所述核酸检测池用于预装能够扩增靶序列的PCR反应试剂；所述微流控检测芯片具有旋转中心，所述免疫结合池、所述免疫检测池和所述废液池自所述旋转中心近心端至远心端依次分布，所述免疫清洗液池和所述免疫缓冲液池相对于所述免疫检测池更靠近所述旋转中心，所述核酸检测池相对于所述废液池更靠近所述旋转中心，所述免疫结合池、所述免疫检测池和所述废液池之间均设有阀门。2.根据权利要求1所述的微流控检测芯片，其特征在于，所述加样腔体包括第一加样池和第二加样池，所述免疫结合池与所述第一加样池连接，所述核酸检测池与所述第二加样池连接。3.根据权利要求1所述的微流控检测芯片，其特征在于，所述检测单元还包括分流池，所述分流池与所述免疫结合池连接，所述免疫检测池通过所述分流池与所述免疫结合池连接，所述核酸检测池通过所述分流池和所述免疫结合池与所述加样腔体连接；所述分流池相对于所述免疫结合池更远离所述旋转中心，且相对于所述免疫检测池和所述核酸检测池更靠近所述旋转中心，所述分流池与所述免疫检测池和所述核酸检测池之间均设有阀门。4.根据权利要求1所述的微流控检测芯片，其特征在于，所述检测单元还包括样本裂解池和裂解液池，所述样本裂解池用于预装能够使核酸释放的酶，所述裂解液池用于预装样本裂解液；所述样本裂解池分别与所述加样腔体和所述裂解液池连接，所述核酸检测池与所述样本裂解池连接，所述样本裂解池相对于所述加样腔体更远离所述旋转中心，且相对于所述核酸检测池更靠近所述旋转中心，所述裂解液池相对于...

【专利技术属性】
技术研发人员：程晓宇，钱纯亘，刘笔锋，陈鹏，邹畅，胡鹍辉，
申请(专利权)人：深圳市亚辉龙生物科技股份有限公司，
类型：新型
国别省市：