P4HB抑制剂在治疗或预防肿瘤恶病质中的用途制造技术

本发明专利技术提供P4HB抑制剂作为用于制备治疗或预防肿瘤恶病质的药物的用途。其中所述P4HB抑制剂是特异地结合并抑制P4HB蛋白质的抗体、核酸抑制剂、小分子化合物。本发明专利技术所提供的P4HB抑制剂可以靶向结合P4HB基因或蛋白，使得P4HB基因表达下调，从而治疗或预防肿瘤恶病质。质。质。

【技术实现步骤摘要】
No.1序列为：5
’-
CAGAGGCCAUCGAUGACAUACCAUU-3
’
；SEQ ID No.2序列为：5
’-
GCUUCAAGGGCAAGAUCCUGUUCAU-3
’
。
[0011]优选地，所述小分子化合物为CCF642，化学式为C
15
H
10
N2O4S3，结构如下式(I)所述：
[0012][0013]本专利技术提供一种治疗或预防哺乳动物肿瘤恶病质的方法，包括向遭受所述癌症恶病质症状的机体给药治疗的P4HB抑制剂。通过免疫组化芯片分析P4HB 与临床指标的相关性，发现蛋白P4HB在人食管鳞癌患者组织中高表达，并且与肿瘤的分化程度显著相关，具有重要的临床意义；通过P4HB核酸抑制剂 siRNA，使得P4HB蛋白表达下调，从而抑制肌肉细胞凋亡和促进肌肉细胞生长，由此说明P4HB是诱导肿瘤恶病质过程中潜在的关键靶点；通过P4HB的小分子化合物抑制剂抑制肌肉细胞凋亡和裸鼠骨骼肌降解，从而治疗或预防肿瘤恶病质。
[0014]本专利技术的有益效果在于：
[0015]本专利技术提供一种P4HB抑制剂作为用于制备治疗或预防肿瘤恶病质的药物中的用途，通过P4HB抑制剂使得P4HB基因表达下调，从而治疗或预防肿瘤恶病质。
附图说明
[0016]图1A为P4HB在77对食管鳞状细胞癌组织和配对的癌旁组织的表达切片照片。
[0017]图1B为P4HB在77对食管鳞状细胞癌组织和配对的癌旁组织的表达卡方统计结果图。
[0018]图2为P4HB在10株食管鳞状细胞癌细胞系和2株永生化正常食管上皮细胞的表达的Western Blot结果图。
[0019]图3为P4HB在食管鳞状细胞癌细胞系及能够诱导恶病质的其他消化道肿瘤分泌的外泌体中的表达的Western Blot结果图。
[0020]图4A为P4HB在KYSE150 Control细胞和KYSE150 Flag-P4HB细胞中的表达结果图。
[0021]图4B为P4HB在KYSE150 Control细胞和KYSE150 Flag-P4HB细胞外泌体中的表达结果图。
[0022]图5A为加入KYSE150 Control exo外泌体处理的C2C12细胞的流式细胞结果图。
[0023]图5B为加入KYSE150 Flag-P4HB exo处理的C2C12细胞的流式细胞结果图。
[0024]图5C为图5A和图4B的t-test统计结果图。
[0025]图6A为P4HB在KYSE150 LV-Flag-P4HB细胞和KYSE150 LV-control细胞外泌体中的表达结果图。
[0026]图6B为KYSE150 LV-Flag-P4HB外泌体和KYSE150 LV-control外泌体对 C2C12成肌细胞生长的结果比较图。
Structural Variations in Esophageal Squamous Cell Carcinoma.Am J Hum Genet 98,256-274(2016).)。
[0049]运用生物信息学对我国食管鳞状细胞癌的基因组研究结果进行了统计分析 (Song Y.等人(2014).”Identification of genomic alterations in oesophageal squamous cell cancer.”Nature 509,91-95.和Cheng,C.等人(2016).
”ꢀ
Whole-Genome Sequencing Reveals Diverse Models of Structural Variations in Esophageal Squamous Cell Carcinoma.”Am J Hum Genet 98,256-274.)，出人意料地发现，P4HB在食管鳞状细胞癌中高表达，具有9.09％的扩增率。通过免疫组织化学分析发现，P4HB在77对食管鳞状细胞癌患者组织中的表达水平显著高于其配对的癌旁组织。随后我们的功能实验证明，高表达P4HB的外泌体处理肌肉细胞可以促进肌肉细胞凋亡和抑制肌肉细胞生长，抑制基因P4HB表达的外泌体处理肌肉细胞能显著抑制肌肉细胞凋亡和促进肌肉细胞生长。因此，基因P4HB有望成为食管鳞状细胞癌恶病质的治疗靶点。
[0050]为此，本专利技术提供P4HB抑制剂作为用于制备治疗或预防肿瘤恶病质的药物中的用途。
[0051]特别地，根据本专利技术所述的P4HB抑制剂是特异地结合并抑制P4HB蛋白质的抗体。
[0052]术语“抗体”用于文中，指所有类型的特异地结合P4HB多肽，并抑制P4HB 活性的抗体。优选地，本专利技术的该抑制性抗体特异地结合位于配体结合结构域的P4HB多肽中的表位。优选地，本专利技术的抗体是单克隆抗体、多克隆抗体、单链抗体、嵌合抗体或任何该抗体的片段或衍生物。包含在术语抗体中的这样的片段或衍生物用于文中，包括双特异抗体、合成的抗体、Fab、F(ab)2、Fv或 scFv片段、或这些抗体中任何一个的化学修饰的衍生物。在本专利技术抗体的上下文中使用的特异的结合，指抗体不与其他多肽交叉反应。可使用公知技术检测特异的结合。
[0053]更特别地，根据本专利技术所述的P4HB抑制剂是核酸抑制剂。
[0054]优选地，所述的核酸抑制剂特异地结合编码P4HB，并抑制P4HB的转录或翻译的多核苷酸。
[0055]“核酸抑制剂”用于文中，指如适体的核酸分子，其通过以类似于对上述抗体所描述的方式结合多肽来抑制P4HB多肽活性，或者指与编码P4HB多肽的多核苷酸互补而结合所述多核苷酸的核酸分子，其抑制多核苷酸的转录或翻译。例如，抑制性核酸可通过干扰P4HB基因的正确转录作为三螺旋形成寡核苷酸发挥作用。而且，抑制性核酸可以是核酶，其特异地结合并降解P4HB转录物。可替换地，其可以是能够结合、降解转录物或至少抑制其有效翻译的反义(核酸)、siRNA或microRNA。后一类型的抑制性核酸的特征在于其通常包含于 P4HB转录物中的序列互补的核酸序列。该互补序列应该足够长，且应当包含足够数目的匹配核苷酸，从而允许与细胞中转录物的特异杂交。
[0056]进一步地，根据本专利技术所述的核酸抑制剂选自核酶、反义分子、寡核苷酸抑制剂、适体、microRNA或siRNA。
[0057]根据本专利技术的“核酶”是包含与P4HB转录物互补的序列的RNA分子。核酶技术是本领域公知的，本领域技术人员能够设计和应用合适的核酶，而无需周折；参见，例如，Khan 2006,Clin.Chim.Acta 367(1-2):20-7；Kalota 2004,Cancer Biology&Therapy 3(1):4-12。
[0058]“反义分子”用于文中，指与P4HB转录物互补的治疗性反义RNA或能够结合P4HB转录物的吗啉代寡核苷酸。包括吗啉代寡核苷酸应用的反义技本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.P4HB抑制剂作为用于制备治疗或预防肿瘤恶病质的药物的用途。2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述P4HB抑制剂为特异地结合并抑制P4HB蛋白质的抗体、核酸抑制剂、小分子化合物。3.如权利要求2所述的用途，其特征在于，所述抗体为单克隆抗体、多克隆抗体、单链抗体、嵌合抗体或任何该抗体的片段或衍生物。4.如权利要求3所述的用途，其特征在于，所述抗体的片段或衍生物为双特异抗体、合成的抗体、Fab、F(ab)2、Fv或scFv片段、或这些抗体中任何一...

【专利技术属性】
技术研发人员：詹启敏，王嫣，高晓寒，
申请(专利权)人：北京肿瘤医院北京大学肿瘤医院，
类型：发明
国别省市：