本发明专利技术涉及一株淡水小球藻Chlorella sorokiniana及其培养方法与应用。本发明专利技术的淡水小球藻Chlorella sorokiniana，于2021年6月4日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号：CGMCC NO.22395。本发明专利技术利用淡水小球藻Chlorella sorokiniana和蛋白核小球藻的共培养体系处理畜禽废水时，不仅可以有效去除废水中的污染物质，净化水质，同时还可以有效促进微藻生长，培养得到的微藻可以回收利用，加工为有价值的产品，进一步降低废水的处理成本。进一步降低废水的处理成本。
【技术实现步骤摘要】
一株淡水小球藻Chlorella sorokiniana及其培养方法与应用
[0001]本专利技术涉及一株淡水小球藻Chlorella sorokiniana及其培养方法与应用，属于微生物废水处理
技术介绍
[0002]随着人类生活水平的不断提高，对肉类的需求量也与日俱增，畜禽业的发展导致畜禽养殖废水的达标处理成为一个棘手的问题。畜禽养殖废水主要是由畜禽的尿液、粪便、饲料残渣及圈舍冲刷水组成，其中圈舍冲刷水占了大部分。畜禽养殖废水的污染物浓度高、危害大，任其排放对地表水、地下水均会造成污染，影响人畜饮水安全。
[0003]废水处理是解决水污染，缓解水资源短缺的有效方法。传统的生化二级处理是污水处理中应用较广泛的技术，虽然其工艺成熟、处理效果理想，但建造、运行、管理费用过高。此外，对于污水的处理，通常还有化学法(如加入硫酸铜等)和换水法等，虽然均有一定效果，但化学法易产生二次污染，换水法不够方便、经济，且仅适宜于小型水体。
[0004]微藻是自然界中广泛分布、种类多样、数目巨大的微生物群之一，具有对生存环境要求简单、不受气候控制、占地少等优势。微藻在污水处理中有很大的优点：除去氮和磷，分解有机物，吸收重金属，另一方面，微藻也可以用于制备生物能源和作为养殖业饲料以及食品业原料。藻类可吸收污水中大量的N、部分的P及COD来净化污水，微藻处理废水不仅能起到净化水质的作用，还能改善生态环境，促进退化水生态系统的恢复，同时，收获的生物质还可用于农业、畜牧业及活性物质提取等多种领域，进一步降低废水的处理成本。
[0005]中国专利文献CN107055946A(申请号201710139296.9)提出了一种利用小球藻净化猪场发酵废水的方法，是将驯化培养后获得的能在体积分数为50％～70％的猪场发酵废水中快速生长的藻种，接种到猪场发酵废水中培养，完成废水处理。该专利技术最好的废水TN、TP及COD的去除率为89.8％、88.8％、88.2％，达到畜禽养殖废水的排放标准；但是该专利技术没有公开驯化得到的藻种信息。
[0006]中国专利文献CN110029065A(申请号201910195806.3)公开了一种利用养牛场废水培养小球藻的方法，具体是将养牛场废水进行厌氧发酵，发酵后得到的沼液用水稀释，以此溶液作为培养基培养小球藻FACHB
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1227。该方法获得小球藻的生物量可以达到6.2g/L，养牛场废水中主要污染物的最高去除率分别为：COD：63.6％，氨氮：73.56％，总氮：65.4％，总磷：76.48％，经过微藻培养处理后的污水养分浓度较低，可以进入一般污水处理环节。但是该专利技术在培养小球藻时需要将沼液培养基用水稀释，一方面会造成水资源的浪费，另一方面也会导致废水的处理效率降低。
[0007]中国专利文献CN103739075A(申请号201310657281.3)公开了一种水产养殖废水的处理方法，该处理方法采用蛋白核小球藻、斜生珊藻和月牙藻三种藻类进行水产养殖废水处理。但是该专利技术并没有对水产养殖废水中氮、磷等物质的去除效果以及微藻之间的相互作用关系加以说明。
[0008]现有技术中给出了藻
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藻共培养的方式处理废水，但是复合藻种混合培养时出现的藻种间的拮抗作用或竞争关系，导致废水处理效果并不理想。
技术实现思路
[0009]针对现有技术的不足，本专利技术提供了一株淡水小球藻Chlorella sorokiniana及其培养方法与应用。本专利技术通过前期实验，筛选出适合共培养的两株藻种：淡水小球藻Chlorella sorokiniana(保藏号CGMCC NO.22395)和蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)，用于废水处理。在本专利技术优选的技术方案中，采用藻
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藻共培养的方式，通过不同微藻间的相互作用来提高废水中污染物质的去除并达到微藻生物量的积累。
[0010]本专利技术的技术方案如下：
[0011]一株淡水小球藻Chlorella sorokiniana，于2021年6月4日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号：CGMCC NO.22395。
[0012]优选的，所述淡水小球藻Chlorella sorokiniana的18S rDNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
[0013]上述淡水小球藻Chlorella sorokiniana的培养方法，包括如下步骤：
[0014]将淡水小球藻Chlorella sorokiniana接种于BG11固体培养基平板上进行固体培养，获得单藻落，从BG11固体培养基平板上挑取一单株藻，接种到BG11液体培养基中进行液体培养，待其颜色变深且无杂菌产生，得淡水小球藻Chlorella sorokiniana培养液。
[0015]优选的，所述固体培养的条件为温度25～28℃、光照2000～2500lux；进一步优选为温度25℃、光照2000lux。
[0016]优选的，所述液体培养的条件为温度25～28℃、光照2000～2500lux、转速100～150r/min；进一步优选为温度25℃、光照2000lux、转速140r/min。
[0017]上述淡水小球藻Chlorella sorokiniana在处理畜禽废水中的应用。
[0018]一种处理畜禽废水的微藻复合制剂，包括上述淡水小球藻Chlorella sorokiniana和蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)。
[0019]优选的，所述蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)为现有藻株，可购自中国科学院水生生物研究所淡水藻种库。
[0020]优选的，所述淡水小球藻Chlorella sorokiniana和蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)的质量比为(1:3)～(3:1)；进一步优选为1:3、1:1或3:1。
[0021]上述微藻复合制剂的制备方法，包括如下步骤：
[0022]将淡水小球藻Chlorella sorokiniana和蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)分别接种至BG11液体培养基中，培养至生长对数期，得淡水小球藻Chlorella sorokiniana种子液和蛋白核小球藻种子液，将淡水小球藻Chlorella sorokiniana种子液和蛋白核小球藻种子液混合，即得微藻复合制剂。
[0023]优选的，所述培养的条件为温度25～28℃、光照2000～2500lux、转速100～150r/min；进一步优选为温度25℃、光照2000lux、转速140r/min。
[0024]优选的，所述微藻复合制剂中淡水小球藻Chlorella sorokiniana和蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)的质量比为(1:3)～(3本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一株淡水小球藻Chlorella sorokiniana，于2021年6月4日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号：CGMCC NO.22395。2.如权利要求1所述的淡水小球藻Chlorella sorokiniana，其特征在于，所述淡水小球藻Chlorella sorokiniana的18S rDNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。3.权利要求1所述的淡水小球藻Chlorella sorokiniana的培养方法，其特征在于，包括如下步骤：将淡水小球藻Chlorella sorokiniana接种于BG11固体培养基平板上进行固体培养，获得单藻落，从BG11固体培养基平板上挑取一单株藻，接种到BG11液体培养基中进行液体培养，待其颜色变深且无杂菌产生，得淡水小球藻Chlorella sorokiniana培养液；优选的，所述固体培养的条件为温度25～28℃、光照2000～2500lux；进一步优选为温度25℃、光照2000lux；优选的，所述液体培养的条件为温度25～28℃、光照2000～2500lux、转速100～150r/min；进一步优选为温度25℃、光照2000lux、转速140r/min。4.权利要求1所述的淡水小球藻Chlorella sorokiniana在处理畜禽废水中的应用。5.一种处理畜禽废水的微藻复合制剂，其特征在于，包括权利要求1所述的淡水小球藻Chlorella sorokiniana和蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)；优选的，所述蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)为现有藻株。6.如权利要求5所述的微藻复合制剂，其特征在于，所述淡水小球藻Chlorella sorokiniana和蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)的质量比为(1:3)～(3:1)；进一步优选为1:3、1:1或3:1。7.权利要求5所述的微藻复合制剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：将淡水小球藻Chlorella sorokiniana和蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)分别接种至BG11液体培养基中，培养至生长对数期，得淡水小球藻Chlorella sorokiniana种子液和蛋白核小球藻种子液，将淡水小球藻Chlorella sorokiniana种子液和蛋白核小球藻种子液混合...
【专利技术属性】
技术研发人员：崔红利，朱晓丽，李润植，徐雯，于杰，
申请(专利权)人：山西农业大学，
类型：发明
国别省市：
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