基于RAA扩增和CRISPR-Cas12a的新型冠状病毒ORF1ab基因检测方法技术

本发明专利技术提供了一种crRNA分子及用于CRISPR

【技术实现步骤摘要】
基于RAA扩增和CRISPR
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Cas12a的新型冠状病毒ORF1ab基因检测方法


[0001]本专利技术涉及一种病毒核酸的检测方法，属于微生物检测应用领域。

技术介绍

[0002]新型冠状病毒(Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus
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2， SARS
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CoV
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2)是单股正链RNA病毒，其功能性编码基因包括开放阅读框1ab 基因(Open Reading Frame 1ab，ORF1ab)、刺突蛋白基因(Spike protein，S)、 包膜蛋白基因(Envelope protein，E)、膜蛋白基因(Membrane，M)和核蛋 白基因(Nucleocapsid，N)。新型冠状病毒感染人体后可造成新型冠状病毒肺 炎(Corona Virus Disease 2019，COVID
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19)，患者出现发热、咳嗽、胸闷、乏 力等流感样症状，严重者可出现呼吸困难、急性呼吸窘迫综合征甚至死亡。新 型冠状肺炎本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于CRISPR
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Cas12a技术检测SARS
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CoV
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2核酸的crRNA分子，所述crRNA分子的序列选自SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.7中任一序列。2.一种应用权利要求1所述crRNA分子基于非诊断目的的CRISPR
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Cas12a技术检测SARS
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CoV
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2核酸的方法，所述方法包括以下步骤：(1)制备样本核酸模板；(2)使步骤(1)获取的核酸模板，Cas12a蛋白、荧光基团和荧光淬灭基团双标记的DNA探针，以及所述crRNA分子在CRISPR
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Cas12a反应体系里反应；(3)对步骤(2)的反应体系进行荧光强度的检测。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述的样本核酸模板由重组酶聚合酶核酸扩增方法制备。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述重组酶聚合酶核酸扩增的上游引物选自含有SEQ ID NO.10
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14任一所示序列的核酸，所述重组酶聚合酶核酸扩增的下游引物选自含有SEQ ID NO.15
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19任一所示序列的核酸。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述重组酶聚合酶核酸扩增的上游引物的序列由SEQ ID NO.14所示，所述重组酶聚合酶核酸扩增的下游引物的序列由SEQ ID NO.17所示。6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述crRNA分子的序列如SEQ ID NO.7所示。7.根据权利要求2
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6任一所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述DNA探针的序列如SEQ ID NO.9所示。8.一种CRISPR
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Cas12a技术检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘鸿博，宋宏彬，邱少富，杜悦，昌帅磊，陈思嘉，段广才，杜昕颖，向莹，杨明娟，杨超杰，刘洪波，王辉，
申请(专利权)人：中国人民解放军疾病预防控制中心，
类型：发明
国别省市：