烟用香精中九种天然活性成分含量的测定方法技术

本发明专利技术所提出的烟用香精中九种天然活性成分含量的测定方法；采用超高液相色谱分析，最优的色谱条件为采用HSS T3(2.1

【技术实现步骤摘要】
烟用香精中九种天然活性成分含量的测定方法


[0001]本专利技术涉及烟用香精中天然活性成分的定量分析
，尤其涉及一种烟用香精中九种天然活性成分含量的测定方法。

技术介绍

[0002]烟用香精香料具有改善卷烟吸味品质，赋予卷烟特征香气的作用，是构成卷烟品牌风格的重要因素。烟用香精中一些天然活性成分对健康吸味均有一定的影响，因此有必要对烟用香精香料中活性成分的质量进行全面评估。而其中的九种天然活性成分就是检测的重点，但是这九种天然活性成分的均属不同类物质，且吸收波长也不尽相同，如果强行取一个中间波长来检测不同物质，必定会造成有些物质的检出限太低，无法达到基最低检出限，而造成误差；在现有技术中，也多是针对某一种物质或者某一类具有共同特性的物质采用HPLC法进行同时检测，因为其可以采用相对常规的流动相和洗脱梯度，并且波长选择也是折中选择即可。但是，烟用香精的检测是需要将不同类物质的同时检出，那么其洗脱特性和分离度是需要考究的，而流动相的选择及梯度洗脱程度都是直接影响到不同类物质的检测成功与否，也决定了这个检测过程所需时间，因此，针对包含多种不同类成分的烟用香精的检测，如何解决不同类物质共用的流动相的选择和洗脱梯度设置；以及采用何种波长吸收峰来做到同时检测，都是在烟用香精检测中需要解决的问题。

技术实现思路

[0003]针对上述技术中存在的如:还未有一种高效、快速测定烟用香精中不同类的九种天然活性成分的测定方法；本申请所涉及九种天然活性成分为：没食子酸、天麻素、绿原酸、表没食子儿茶素没食子酸酯、表儿茶素、葛根素、芦丁、槲皮素、姜黄素；且计量单位均为mg/g。
[0004]具体为一种烟用香精中九种天然活性成分含量的测定方法，包括以下步骤:
[0005](1)对照工作溶液配制
[0006]称取九种天然活性成分对照品混合，并采用50％甲醇水溶液作为提取液定容并超声，得到浓度为1000μg/mL的溶液A；再采用提取液50％甲醇水溶液稀释溶液A得到10μg/mL、30μg/mL、50μg/mL、100μg/mL、500μg/mL的梯度浓度对照工作液；九种天然活性成分为：没食子酸、天麻素、绿原酸、表没食子儿茶素没食子酸酯、表儿茶素、葛根素、芦丁、槲皮素、姜黄素；
[0007](2)待测品制备
[0008]称取待测品1.0000g定容至25mL棕色容量瓶中，用提取液溶解超声萃取10分钟后，冷却至室温后再用提取液稀释并定容得到滤液，滤液供液相色谱检测；
[0009](3)液相色谱分析
[0010]采用高效合相色谱仪对步骤(1)得到的梯度浓度对照工作液和步骤(2)得到的滤液进行分析，利用PDA检测器进行检测；
[0011]色谱条件：采用HSS T3(2.1
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100mm,1.7μm)；色谱柱温度为32℃，进样量10μL；流动相包括有A相和B相，A相为浓度为体积百分比为5:95的甲醇：0.1％甲酸，B相为0.1％浓度的甲酸甲醇；流速为0.3mL/min；梯度洗脱条件为：
[0012]0min
‑
2min流动相A为100％，
[0013]5min时流动相A为85％、流动相B为15％，
[0014]7min时流动相A为80％、流动相B为20％，保留5min，
[0015]14min时流动相A为40％、流动相B为60％，保留2min，
[0016]18min时流动相A为20％、流动相B为80％，保留5min，
[0017]24min时流动相A为100％，且平衡5min后进下一针；
[0018]检测器PDA的波长条件为：206nm、221nm、325nm、428nm。
[0019]作为优选，在步骤(2)中，称取超声后的溶液10mL置于离心管中，在8000r/min下离心10min后，用0.22μm微孔滤膜过滤。
[0020]作为优选，九种天然活性成分对照品为色谱级别。
[0021]本专利技术的有益效果是:本专利技术所提出的烟用香精中九种天然活性成分含量的测定方法；因为该九种天然活性成分不属于同类物质，因此其物质极性和分离洗脱程度均不相同；故而本专利技术首次建立了测定烟用香精中九种天然活性成分含量的测定方法；采用超高液相色谱分析，最优的色谱条件为采用HSS T3(2.1
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100mm,1.7μm)；色谱柱温度为32℃，进样量10μL；流动相包括有A相和B相，A相为浓度为体积百分比为5:95的甲醇：0.1％甲酸，B相为体积百分比为浓度为0.1％的甲酸甲醇；流速为0.3mL/min；梯度洗脱条件为：0min
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2min流动相A为100％，5min时流动相A为85％、流动相B为15％，7min时流动相A为80％、流动相B为20％，保留5min，14min时流动相A为40％、流动相B为60％，保留2min，18min时流动相A为20％、流动相B为80％，保留5min，24min时流动相A为100％，且平衡5min后进下一针，该测定方法能够准确、快速地测定出这九种物质的含量。
附图说明
[0022]图1为本专利技术烟用香精中九种物质对照品的液相色谱图；
[0023]图2为本专利技术1号烟用香精样品的液相色谱图；
[0024]图3为本专利技术2号烟用香精样品的液相色谱图；
[0025]图4为本专利技术3号烟用香精样品的液相色谱图；
[0026]图5为本专利技术4号烟用香精样品的液相色谱图；
[0027]图6为本专利技术5号烟用香精样品的液相色谱图；
[0028]图7为本专利技术6号烟用香精样品的液相色谱图；
[0029]图8为本专利技术实施例2的液相色谱图。
具体实施方式
[0030]为了更清楚地表述本专利技术，下面结合实施例对本专利技术作进一步地描述。
[0031]首先，对于本专利技术的专利技术初衷和思路，是因为烟用香精中含有九种不同类的天然活性物质，而不同类的物质如果采用超高液相法进行检测的话，如何根据各种物质的极性来设计梯度洗脱都是一个现有技术中无法解决的问题，并且，对于这些不同类物质的吸收
波长也不同的情况下，采用何种波长进行能够让其吸收峰快速呈现并且准确分离也是难点所在。
[0032]实施例1
[0033]一种烟用香精中九种天然活性成分含量的测定方法包括以下步骤:九种天然活性成分对照品为色谱级别；
[0034](1)对照工作溶液配制
[0035]准确称取九种天然活性成分适量于25mL棕色容量瓶中，加提取液超声5min，待全部溶解后，再用浓度为50％的甲醇水溶液作为提取溶定容至刻度，使其浓度约为：1000μg/mL；作为溶液A保存至4℃冰箱中，保存期为3个月；再采用50％的甲醇水溶液作为提取液稀释溶液A得到10μg/mL、30μg/mL、50μg/mL、100μg/mL、500μg/mL的梯度浓度对照工作液；九种天然活性成分为：没食子酸、天麻素、绿原酸、表没食子儿茶素没食子酸酯、表儿茶素本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种烟用香精中九种天然活性成分含量的测定方法，其特征在于，包括以下步骤:(1)对照工作溶液配制称取九种天然活性成分对照品混合，并采用50％甲醇水溶液作为提取液进行定容并超声，得到浓度为1000μg/mL的溶液A；再采用50％甲醇水溶液作为提取液稀释溶液A得到10μg/mL、30μg/mL、50μg/mL、100μg/mL、500μg/mL的梯度浓度对照工作液；九种天然活性成分为：没食子酸、天麻素、绿原酸、表没食子儿茶素没食子酸酯、表儿茶素、葛根素、芦丁、槲皮素、姜黄素；(2)待测品制备称取待测品1.0000g定容至25mL，用提取液溶解超声萃取10分钟后，冷却至室温后再用提取液稀释并定容得到滤液，滤液供液相色谱检测；(3)液相色谱分析采用高效合相色谱仪对步骤(1)得到的梯度浓度对照工作液和步骤(2)得到的滤液进行分析，利用PDA检测器进行检测；色谱条件：采用HSS T3(2.1
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100mm,1.7μm)；色谱柱温度为32℃，进样量10μL；流动相包括有...

【专利技术属性】
技术研发人员：程勇，李剑政，徐潇，王晶，罗婷，
申请(专利权)人：深圳波顿香料有限公司，
类型：发明
国别省市：