一种猪呼吸道病三重荧光PCR检测试剂盒及其检测方法技术

本发明专利技术公开了一种猪呼吸道病三重荧光PCR检测试剂盒及其检测方法，该方法是利用3种不同颜色编号标记的TaqMan荧光探针，分别标记猪肺炎支原体、猪多杀性巴氏杆菌、猪胸膜肺炎放线杆菌的特异性基因探针，使得该方法能够在一个反应中实现同时检测猪肺炎支原体、猪多杀性巴氏杆菌、猪胸膜肺炎放线杆菌靶基因的检测方法，该方法检测灵敏度高，特异性好，操作简便，临床上具有极高的应用价值。临床上具有极高的应用价值。临床上具有极高的应用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种猪呼吸道病三重荧光PCR检测试剂盒及其检测方法


[0001]本专利技术涉及病菌检测
，具体为一种猪呼吸道病三重荧光PCR检测试剂盒及其检测方法。

技术介绍

[0002]猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae，MHP)、多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida，Pm)和胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae，App)是猪常见的3种呼吸道病原菌，分别引起猪传染性胸膜肺炎、猪肺疫等，导致猪呼吸道的急慢性炎症，引起高死亡率、低增重率以及治疗成本增加等。呼吸系统疾病是现代养猪生产中面临的最严重的问题之一，且这3种病原菌混合感染十分普遍，引起的临床症状也很难区分，不仅提高了猪群呼吸道疾病的发病率和严重程度，也增加了疾病的复杂性和诊断难度。因此，建立一种能同时快速检测这3种病原菌的诊断方法十分必要。
[0003]目前，以实时荧光定量PCR技术为基础的核酸诊断方法是国内应用最为广泛的方法之一，该方法的原理主要基于标记不同颜色Taq
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种猪呼吸道病三重荧光PCR检测试剂盒，其特征在于：试剂盒包括引物组，引物组的核苷酸序列如下所示：猪肺炎支原体引物：MHPF2：5'
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GATATTAAATCTGGATTTTTC
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3'，MHPR2：5'
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ATTGTATTTACCAAAGTCATA
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3'；猪多杀性巴氏杆菌引物：SAPF2：5'
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TCTCTTCATTATTAGTTGCAT
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3'，SAPR1：5'
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ACTATTTGATTGAACCGGTT
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3'；猪胸膜肺炎放线杆菌引物：APPF3：5'
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GGTATTGAACCTCTTGGTAA
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3'，APPR2：5'
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GTCGATAATACTTTCCAAAC
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3'；试剂盒还包括探针，探针核苷酸序列如下所示：猪肺炎支原体探针：MHPP1：5'
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ACAAGAGATCCAGTCATACCAAGGCA
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3'；猪多杀性巴氏杆菌探针：SAPP1：5'
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TTCCTACACGGTCAGCACGATTTC
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3'；猪胸膜肺炎放线杆菌探针：APPP1：5'
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ACTAAGTTAGACCAAAAGCCGCC
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3'。2.根据权利要求1所述的一种猪呼吸道病三重荧光PCR检测试剂盒，其特征在于：所述探针中还标记有荧光基团和淬灭基团，所述荧光基团选自FAM、HEX、VIC、TEXASRED、ROX、CY3和CY5中的一种；所述淬灭基团选自BHQ1、BHQ2和BHQ3中的一种；不同探针标记的荧光基团各不相同。3.一种根据权利要求1所述的猪呼吸道病三重荧光PCR检测试剂盒的检测方法，其特征在于：包含以下步骤：1)提取样本DNA...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄健，田华，
申请(专利权)人：江西中科基因检测技术有限公司，
类型：发明
国别省市：