一种检测猪圆环病毒不同型别的三重荧光定量PCR引物组、试剂盒及应用制造技术

本发明专利技术提供了一种检测猪圆环病毒不同型别的三重荧光定量PCR引物组、试剂盒及应用，涉及生物检测技术领域。本发明专利技术根据Genbank中猪圆环病毒2型、猪圆环病毒3型和猪圆环病毒4型的保守序列合成引物和探针，同时还构建了试剂盒，并用于猪疫病检测。本发明专利技术利用建立的荧光定量PCR体系对来自浙江省内83份猪组织样品进行检测，结果显示所述引物组特异性良好，重复性和稳定性俱佳，并且具有较高的一致性，准确率较高。在本发明专利技术中，PCV2、PCV3最低检测值均为10拷贝/μl，而PCV4最低检测值为1拷贝/μl，克服了当前猪圆环病毒2型、猪圆环病毒3型和猪圆环病毒4三重PCR检测方法敏感性低，易污染实验室等缺点。室等缺点。室等缺点。

【技术实现步骤摘要】
一种检测猪圆环病毒不同型别的三重荧光定量PCR引物组、试剂盒及应用


[0001]本专利技术属于生物检测
，具体涉及一种检测猪圆环病毒不同型别的三重荧光定量PCR引物组、试剂盒及应用。

技术介绍

[0002]猪圆环病毒(Porcine circovirus，PCV)是为环状单链DNA病毒，能在哺乳动物细胞中自主复制。PCV目前已发现4种型别，分别为猪圆环病毒1型(PCV1)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪圆环病毒3型(PCV3)和猪圆环病毒4型(PCV4)。PCV1是PK15细胞培养过程中发现的病毒，研究认为对猪无致病性；PCV2具有致病性，主要感染家猪和野猪，大多数在4～11周龄时感；2016年首次报道PCV3与心肌炎和肾小球肾炎有关；湖南大学生物学院兽禽病毒学研究组发现一种新型猪圆环病毒(暂定名PCV4)，该病毒发现于具有严重临床症状的猪只中。
[0003]目前，对于猪圆环病毒的检测，主要有病毒分离鉴定、琼脂扩散试验、微量血清中和试验、ELISA和PCR方法。而且常规的病原学分离和血清学检测方法，又存在操作繁杂、费时费力、敏感性本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测猪圆环病毒不同型别的三重荧光定量PCR引物组，其特征在于，所述引物组包括分别针对猪圆环病毒2型、猪圆环病毒3型和猪圆环病毒4型的特异性引物对和探针；针对猪圆环病毒2型的特异性引物对包括PCV2
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2020F2和PCV2
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2020R1，所述PCV2
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2020F2的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述PCV2
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2020R1的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，对应的探针PCV2
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2020 probe的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；针对猪圆环病毒3型的特异性引物对包括PCV3
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real
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F2和PCV3
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real
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R2，所述PCV3
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real
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F2的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，所述PCV3
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real
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R2的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示，对应的探针PCV3 probe的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示；针对猪圆环病毒4型的特异性引物对包括PCV4
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r21
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R3和PCV4
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F3，所述PCV4
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R3的核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示，所述PCV4
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F3的核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示，对应的探针PCV4 probe3的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示。2.根据权利要求1所述引物组，其特征在于，在所述探针的3
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端还修饰有淬灭基团，在所述探针的5
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端还修饰有荧光基团。3.根据权利要求2所述引物组，其特征在于，所述淬灭基...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢荣辉，徐辉，安慧婷，赵灵燕，王雅婷，黄靖，刘霞，张红丽，孙冰冰，董建斐，冯肖肖，张璐，陈伟良，薛银，柴娟，虞一聪，
申请(专利权)人：浙江省动物疫病预防控制中心，
类型：发明
国别省市：