针对Sorcin调控环路诊断、预测、逆转卵巢癌紫杉醇耐药制造技术

本发明专利技术涉及针对Sorcin调控环路诊断、预测、逆转卵巢癌紫杉醇耐药。本发明专利技术通过细胞实验和肿瘤大数据证实可溶性耐药相关钙结合蛋白(Sorcin)，锌指E盒结合蛋白1(ZEB1)在人紫杉醇耐药卵巢癌中高表达，而微小干扰RNA miR

【技术实现步骤摘要】
针对Sorcin调控环路诊断、预测、逆转卵巢癌紫杉醇耐药


[0001]本专利技术涉及生物医药
，具体地说，涉及针对Sorcin调控环路诊断、预测、逆转卵巢癌紫杉醇耐药。

技术介绍

[0002]目前，铂类联合紫杉醇的化疗方案是晚期卵巢癌术后的标准治疗模式，多数患者初始化疗效果明显，但是后期约80％的患者又会出现化疗耐药和复发，化疗耐药的发生是卵巢癌治疗的重大难题。但是目前临床上并没有预测卵巢癌病人化疗反应的标志物。
[0003]文献(张淑军,邓梦霞,王前,等.Sorcin表达水平影响卵巢癌患者化学药物治疗耐药及生存时间.)探讨了可溶性耐药相关钙结合蛋白质(soluble resistance
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related calcium
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binding protein，Sorcin，SRI)与卵巢癌化学药物治疗耐药的关系及对患者生存时间的影响，发现Sorcin可能与卵巢癌化疗耐药相关，Sorcin表达水平可能影响卵巢癌患者的生存时间。文献(王斌.过氧化物酶(PXDN)在卵巢癌中的功能和机制初步研究[D].南方医科大学.)公开了过氧化物酶促进卵巢癌增殖侵袭转移，分子机制是通过促进TGF
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β通路中Snaill和Smad4的表达以及Smad2和Smad3的活化。
[0004]然而，锌指E盒结合蛋白1(Zinc Finger E
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box Binding Homeobox 1，ZEB1)在人紫杉醇耐药卵巢癌中高表达，微小干扰RNA miRr/>‑
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5p和TGF
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β信号转导蛋白Smad4在人紫杉醇耐药卵巢癌中低表达，Sorcin与三者形成Smad4/ZEB1/miRNA
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5p/Sorcin负反馈环路介导卵巢癌紫杉醇耐药目前尚未见报道。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是针对现有技术中的不足，提供Smad4/ZEB1/miRNA
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5p/Sorcin负反馈环路在卵巢癌紫杉醇耐药中的用途。
[0006]第一方面，本专利技术提供了Sorcin、Smad4、ZEB1和miR
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5p中的一个或几个作为诊断标志物在制备卵巢癌个体紫杉醇耐药性的检测试剂盒或卵巢癌紫杉醇耐药个体预后试剂盒中的应用。
[0007]作为本专利技术一种优选的实施方式，所述卵巢癌为高级别浆液型卵巢癌。
[0008]第二方面，本专利技术提供了检测Sorcin、Smad4、ZEB1和miR
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5p中的一个或几个的表达水平的试剂在制备卵巢癌个体紫杉醇耐药性的检测试剂盒或卵巢癌紫杉醇耐药个体预后试剂盒中的应用。
[0009]作为本专利技术一种优选的实施方式，所述卵巢癌为高级别浆液型卵巢癌。
[0010]作为本专利技术另一种优选的实施方式，所述试剂选自：特异性扩增Sorcin、Smad4、ZEB1蛋白的编码基因的引物；或特异性识别Sorcin、Smad4、ZEB1蛋白的编码基因或其转录本的探针；或特异性抗Sorcin、Smad4、ZEB1蛋白的抗体；或特异性结合miR
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5p或miR
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5p对应的cDNA的探针；或特异性结合miR
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5p或miR
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5p对应的cDNA的引物。
[0011]作为本专利技术另一种优选的实施方式，所述试剂通过荧光染料法、数字PCR、共振光
散射法、实时荧光定量PCR、测序或生物质谱法检测Sorcin、Smad4、ZEB1和miR
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5p中的任一个或几个的表达水平。
[0012]第三方面，本专利技术提供了Sorcin的抑制剂、ZEB1的抑制剂、Smad4的促进剂和miR
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5p的促进剂中的一个或几个在制备逆转卵巢癌紫杉醇耐药的药物中的应用。
[0013]作为本专利技术一种优选的实施方式，所述抑制剂选自以蛋白或其转录本为靶序列、且能够抑制蛋白表达或基因转录的小干扰RNA、dsRNA、shRNA、微小RNA、反义核酸；或能表达或形成所述小干扰RNA、dsRNA、微小RNA、反义核酸的构建物；所述Smad4的促进剂选自Smad4或其活性片段或它们的编码序列的过表达载体；所述miR
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5p的促进剂选自其模拟核酸。
[0014]更优选地，所述Sorcin的抑制剂为序列如SEQ ID NO:4所示的小干扰RNA。
[0015]第四方面，本专利技术提供了一种筛选逆转卵巢癌紫杉醇耐药的潜在物质的方法，包括：(1)用候选物质处理表达Sorcin、Smad4、ZEB1和/或miR
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5p的体系；(2)检测所述体系中Sorcin、Smad4、ZEB1和/或miR
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5p的表达；若所述候选物质可降低Sorcin、ZEB1的表达或升高ZEB1、miR
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5p的表达，则表明该候选物质是需要的潜在物质，反之则表明该候选物质是非需要的潜在物质。
[0016]本专利技术优点在于：
[0017]本专利技术通过细胞实验和肿瘤大数据证实可溶性耐药相关钙结合蛋白(Sorcin)，锌指E盒结合蛋白1(ZEB1)在人紫杉醇耐药卵巢癌中高表达，而微小干扰RNA miR
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5p和TGF
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β信号转导蛋白Smad4在人紫杉醇耐药卵巢癌中低表达，且表达量均与卵巢癌患者的生存期密切相关，其四者之间形成Smad4/ZEB1/miRNA
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5p/Sorcin负反馈环路介导卵巢癌紫杉醇耐药，作用于这一环路(如用miRNA
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5p降低Sorcin)可以逆转卵巢癌紫杉醇耐药。基于此，本专利技术提供了检测卵巢癌紫杉醇耐药和预测卵巢癌紫杉醇耐药病人预后的分子标志物，为逆转卵巢癌紫杉醇耐药提供了新的靶点。
附图说明
[0018]图1：(A)与卵巢癌紫杉醇敏感细胞OVCAR
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3比，Sorcin在卵巢癌紫杉醇耐药细胞OV3R
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PTX中高表达；(B)与卵巢癌紫杉醇敏感细胞SKOV
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3比，Sorcin在卵巢癌紫杉醇耐药细胞SK3R
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PTX中高表达；(C)在GSE51373数据集中，与化疗敏感的卵巢癌患者组织相比，Sorcin在人卵巢癌化疗耐药的组织中趋向于高表达；(D本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.Sorcin、Smad4、ZEB1和miR
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5p中的一个或几个作为诊断标志物在制备卵巢癌个体紫杉醇耐药性的检测试剂盒或卵巢癌紫杉醇耐药个体预后试剂盒中的应用。2.检测Sorcin、Smad4、ZEB1和miR
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5p中的一个或几个的表达水平的试剂在制备卵巢癌个体紫杉醇耐药性的检测试剂盒或卵巢癌紫杉醇耐药个体预后试剂盒中的应用。3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述卵巢癌为高级别浆液型卵巢癌。4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述试剂选自：特异性扩增Sorcin、Smad4、ZEB1蛋白的编码基因的引物；或特异性识别Sorcin、Smad4、ZEB1蛋白的编码基因或其转录本的探针；或特异性抗Sorcin、Smad4、ZEB1蛋白的抗体；或特异性结合miR
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5p或miR
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5p对应的cDNA的探针；或特异性结合miR
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5p或miR
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5p对应的cDNA的引物。5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述试剂通过荧光染料法、数字PCR、共振光散射法、实时荧光定量PCR、测序或生物质谱法检测Sorcin、Smad4、ZEB1和miR
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【专利技术属性】
技术研发人员：许国雄，张劲国，
申请(专利权)人：复旦大学附属金山医院上海市金山区核化伤害应急救治中心，上海市金山区眼病防治所，
类型：发明
国别省市：