一种鲁氏酵母CJ1及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种鲁氏酵母CJ1及其应用，所述鲁氏酵母CJ1保藏于中国微生物菌种管理委员会普通微生物中心，保藏名称为CJ1，其保藏号为：CGMCC NO.22581。本发明专利技术所述鲁氏酵母CJ1的SOD酶活达到8000U/g细胞以上，且将其用于原味酱油发酵，油中SOD酶活达到126U/mL。油中SOD酶活达到126U/mL。

【技术实现步骤摘要】
一种鲁氏酵母CJ1及其应用


[0001]本专利技术涉及酱油酿造工艺
，具体涉及一种鲁氏酵母CJ1及其应用。

技术介绍

[0002]超氧阴离子是一种对细胞有毒性的活性氧自由基，超氧化物歧化酶(SOD)能够催化超氧阴离子发生歧化反应产生分子氧和过氧化氢，使生物体免受伤害。SOD已应用于生物医药和化妆品生产，在食品领域的研究较少，特别是高SOD微生物育种方面鲜见报道。
[0003]酱油酿造跟其他发酵食品最大的区别在于发酵条件的特异性，即高盐的外部发酵环境。目前国内基本都采用高盐稀态发酵方式，发酵氯化钠浓度在16％左右。鲁氏接合酵母耐盐性能较好，在酱油增香中得到广泛应用。但是关于鲁氏接合酵母的SOD活性未见报道。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种鲁氏酵母CJ1及其应用，该鲁氏酵母CJ1的SOD酶活达到8000U/g细胞以上，且将其用于原味酱油发酵，油中SOD酶活达到126U/mL。
[0005]本专利技术通过下述技术方案实现：
[0006]一种鲁氏酵母CJ1，所述鲁氏酵母CJ1保藏于中国微生物菌种管理委员会普通微生物中心，保藏名称为CJ1，其保藏号为：CGMCC NO.22581，分类命名为Saccharomyces rouxii。
[0007]所述鲁氏酵母CJ1菌株具有以下特征：
[0008](1)所述菌株的形态特征：所述鲁氏酵母CJ1菌株在平板上呈乳白色，菌落边缘规整，菌落表面隆起，在显微镜下椭圆形；
[0009](2)所述菌株的部分生理生化特征：所述鲁氏酵母CJ1能够利用葡萄糖、果糖、乳糖、阿拉伯糖以及蔗糖，菌株SOD在高盐条件下具备高SOD酶活，菌株最适生长温度为30℃。
[0010]本专利技术所述鲁氏酵母CJ1以鲁氏接合酵母(CGMCC 2.181)为出发菌株，经常温等离子束诱变、筛选，获得高盐胁迫环境条件下的高SOD酶活酵母菌株，该菌株能在高盐胁迫环境下大量SOD酶，在高盐胁迫环境下SOD酶活达到8000U/g细胞。所述鲁氏酵母CJ1于2021年5月24日保藏于中国微生物菌种管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏编号为CGMCC 22581，保藏地址：中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮编：100101。
[0011]鲁氏接合酵母菌株诱变的具体步骤为：
[0012]1)、取10μL培养24～48h的鲁氏接合酵母至无菌培养皿中，用ARTP诱变仪进行处理，然后将诱变后的菌悬液稀释后，涂布培养皿，每个培养皿加入0.1mL，30℃下高盐培养基避光培养2
‑
3d；
[0013]2)、挑取直径大且表面光滑圆润的菌落进行摇瓶发酵，测定SOD酶活进行复筛。
[0014]通过ARTP诱变，在20％盐浓度条件下筛得一株高SOD酶活鲁氏接合酵母(鲁氏酵母CJ1)，该菌株最高耐盐浓度为24％，在高盐胁迫环境下SOD酶活得到大幅度提升，将该菌株用于酱油酿造，在高盐胁迫环境下SOD酶活达到8000U/g细胞以上。
[0015]一种鲁氏酵母CJ1的应用，所述鲁氏酵母CJ1用于原味酱油生产工艺。
[0016]进一步地，鲁氏酵母CJ1用于生产原味酱油包括以下步骤：
[0017]S1、接种酵母种子液的制备：斜面上鲁氏酵母CJ1经转种子培养基中培养获得种子液；
[0018]S2、扩大培养：将种子液按照0.2～1.2％的接种量接入扩培培养基中培养获得扩培酵母；
[0019]S3、将扩培酵母接种于酱醪中；
[0020]S4、恒温30℃发酵160
‑
180天后进行压榨获得酱油。
[0021]进一步地，步骤S3中，扩培酵母的接种时间为发酵第10～30d的酱醪中。
[0022]进一步地，扩培酵母的接种时间为发酵第10～20d的酱醪中。
[0023]进一步地，骤S3中，鲁氏酵母CJ1接种到酱醪中的接种量为104～107个g/酱醪。
[0024]进一步地，步骤S3中，所述酱醪为酱油成曲和相对于所述酱油成曲为1.5～3倍(W/W)的23％的食盐水混合物；所述酱油成曲为大豆和小麦的混合物接种米曲霉制成，大豆和小麦的配比为大豆相当于小麦含量的1～4倍(W/W)。
[0025]进一步地，步骤S1中，所述种子培养基以下组分组成：
[0026]酱油原油10
‑
15％，葡萄糖3
‑
6％，食用盐6
‑
8％，余量为水。
[0027]进一步地，步骤S2中，所述扩培培养基由以下组分组成：
[0028]酱油原油10
‑
15％、葡萄糖3
‑
6％，食用盐10
‑
14％，余量为水。
[0029]进一步地，还包括对压榨后的酱油进行过滤处理：
[0030]压榨出的酱油先经过硅藻土进行粗滤，之后通过0.5μm微孔膜进行过滤除菌后进行灌装。
[0031]本专利技术与现有技术相比，具有如下的优点和有益效果：
[0032]1、本专利技术所述鲁氏酵母CJ1在高盐胁迫环境下SOD酶活达到8000U/g细胞以上。
[0033]2、将鲁氏酵母CJ1用于生产高SOD酶活酱油，酱油中SOD酶活达到126U/mL。
[0034]3、本专利技术利用鲁氏酵母CJ1生产高SOD酶活酱油，能为功能性高端酱油的生产提供新的途径，也能为高盐胁迫环境下高SOD酶活酵母的育种提供有益借鉴。
具体实施方式
[0035]为使本专利技术的目的、技术方案和优点更加清楚明白，下面结合实施例，对本专利技术作进一步的详细说明，本专利技术的示意性实施方式及其说明仅用于解释本专利技术，并不作为对本专利技术的限定。
[0036]实施例1
[0037]耐盐高SOD酶活鲁氏酵母CJ1菌株筛选
[0038]以鲁氏接合酵母(Zygosaccharomyces rouxii)CGMCC 2.181为出发菌株，选择致死率为90％的ARTP诱变(照射90s)对鲁氏接合酵母进行诱变，将诱变后的菌液稀释后均匀涂布于高浓度氯化钠平板(氯化钠浓度100g/L)上，30℃避光培养2
‑
3d后挑取聚落较大的突变株接种到发酵培养基中。测定接种到发酵培养基中突变株的SOD酶活，与出发株做对照，获得一株高盐胁迫环境下高SOD酶活鲁氏接合酵母菌株，菌株的SOD酶活较出发菌株有大幅提升，结果见表1、表2和表3。结果表明，随着盐浓度的提高出发菌株SOD酶活呈现逐渐减弱
的趋势，而诱变菌株CJ1在低盐和高盐条件下SOD酶活均较稳定，耐盐性能好、SOD酶活较出发菌株有了大幅度提升，明显优于出发菌株。
[0039]所述发酵培养基为：酱油原油10％、葡萄糖4％，食用盐12％或16％或20％，其余用水补足。
[0040]表1. 12％盐度下突变菌株S96与出发菌株SOD酶活比较
[0041][0042]表2. 16％盐度下突变菌株S96与出发菌株SOD酶活本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种鲁氏酵母CJ1，其特征在于，所述鲁氏酵母CJ1保藏于中国微生物菌种管理委员会普通微生物中心，保藏名称为CJ1，其保藏号为：CGMCC NO.22581。2.一种鲁氏酵母CJ1的应用，其特征在于，所述鲁氏酵母CJ1用于原味酱油生产工艺。3.根据权利要求2所述的一种鲁氏酵母CJ1的应用，其特征在于，鲁氏酵母CJ1用于生产原味酱油包括以下步骤：S1、接种酵母种子液的制备：斜面上鲁氏酵母CJ1经转种子培养基中培养获得种子液；S2、扩大培养：将种子液按照0.2～1.2％的接种量接入扩培培养基中培养获得扩培酵母；S3、将扩培酵母接种于酱醪中；S4、恒温30℃发酵160
‑
180天后进行压榨获得酱油。4.根据权利要求3所述的一种鲁氏酵母CJ1的应用，其特征在于，步骤S3中，扩培酵母的接种时间为发酵第10～30d的酱醪中。5.根据权利要求4所述的一种鲁氏酵母CJ1的应用，其特征在于，扩培酵母的接种时间为发酵第10～20d的酱醪中。6.根据权利要求3所述的一种鲁氏酵母CJ1的应用，其特征在于，步骤S3中，鲁氏酵母C...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭建，齐艳宇，罗雯，康雪梅，伍学明，
申请(专利权)人：千禾味业食品股份有限公司，
类型：发明
国别省市：