一种可诊断带状疱疹的血液tsRNA标志物、制备及应用制造技术

针对当前带状疱疹诊断方法存在成本昂贵、检测时间长等不足，本发明专利技术公开一种可诊断带状疱疹的血液tsRNA标志物tRF

【技术实现步骤摘要】
一种可诊断带状疱疹的血液tsRNA标志物、制备及应用


[0001]本专利技术涉及带状疱疹的生物诊断
，具体涉及一种可诊断带状疱疹的血液tsRNA标志物、制备及应用。

技术介绍

[0002]众所周知，水痘
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带状疱疹病毒(Varicella
‑
Zoster Virus,VZV)是引起带状疱疹(Herpes Zoster)的直接原因。在初次感染后，水痘
‑
带状疱疹病毒就会寄宿在脊神经背根神经节或者脑神经。当人体免疫力下降时，它又会被再次激活，沿着神经不断迁移至周围神经纤维，最终在皮肤上表现出疱疹，并伴随着疼痛，更严重者则会发展为带状疱疹后遗神经痛，严重影响患者的生活质量，并增加医疗负担。早诊断早治疗是避免该病的严重危害性和并发症的有效措施，因此，在带状疱疹的早期阶段进行确诊并针对性干预治疗变得极为重要。
[0003]目前为止，VZV感染的诊断通常是通过皮疹来实现的，其他的诊断手段相对较少。有研究者通过对唾液和循环血液中VZV DNA的定量分析，探索了不同体液的病毒DNA含量对带状疱疹的诊断价值；也有学者研究分析了不同的疾病程度与循环血液中VZV DNA含量的相关性；还有从皮肤病损中可以培养VZV，但这些方法成本昂贵，检测时间长，不易获得，敏感性低。因此，当前对带状疱疹的明确诊断还存在困难。

技术实现思路

[0004]针对当前带状疱疹诊断方法存在成本昂贵、检测时间长等不足，本专利技术的目的在于提供一种可诊断带状疱疹的血液tsRNA标志物，与带状疱疹表现出显著的相关性，可用于检测带状疱疹，与当前带状疱疹诊断方法相比，可明显降低检测成本。
[0005]本专利技术提供如下的技术方案：一种可诊断带状疱疹的血液tsRNA标志物，所述血液tsRNA标志物为tRF
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Pro
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AGG
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006，其序列如SEQ ID NO.1所示；SEQ ID NO.1：GGCTCGTTGGTCTAGGGGTATGATTCTCGCTT。
[0006]本专利技术提供的血液tsRNA标志物在带状疱疹患者血浆中的表达显著性的低于健康者。
[0007]上述血液tsRNA标志物作为检测靶标在制备带状疱疹诊断试剂中的应用。
[0008]一种检测上述血液tsRNA标志物的检测试剂，所述检测试剂为检测如权利要求1所述的血液tsRNA标志物的特异性引物、探针或芯片。
[0009]作为本专利技术的优选，所述特异性引物的上游引物序列如SEQ ID NO.2所示，下游引物序列如SEQ ID NO.3所示：SEQ ID NO.2：F：5
’
GATCGGCTCGTTGGTCTAGG 3
’
；SEQ ID NO.3：R：5
’
GACGTGTGCTCTTCCGATCTAAG 3
’
。
[0010]上述检测试剂在制备带状疱疹诊断试剂中的应用。
[0011]一种带状疱疹的诊断试剂盒，所述诊断试剂盒含有上述检测试剂。
[0012]作为本专利技术的优选，所述诊断试剂盒用于检测血液tsRNA标志物的表达量。
[0013]本专利技术的有益效果如下：本专利技术的血液tsRNA标志物tRF
‑
Pro
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AGG
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006在带状疱疹患者血浆中的表达显著性的低于健康患者，与带状疱疹表现出显著的相关性，可作为诊断带状疱疹的标志物，将其应用于带状疱疹诊断试剂以及诊断试剂盒的制备，用于带状疱疹检测，与当前带状疱疹诊断方法存在成本昂贵、检测时间长等不足，可明显降低检测成本，提高检测效率。
附图说明
[0014]图1是tRF
‑
Pro
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AGG
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006在N组、A组和B组中的差异性表达。
[0015]图2是tRF
‑
Pro
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AGG
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006的标准曲线。
[0016]图3是tRF
‑
Pro
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AGG
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006的扩增曲线。
[0017]图4是tRF
‑
Pro
‑
AGG
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006的熔解曲线。
[0018]图5是管家基因U6的标准曲线。
[0019]图6是管家基因U6的扩增曲线。
[0020]图7是管家基因U6的熔解曲线。
[0021]图1中***p<0.001。
具体实施方式
[0022]下面就本专利技术的具体实施方式作进一步说明。
[0023]如无特别说明，本专利技术中所采用的原料均可从市场上购得或是本领域常用的，如无特别说明，下述实施例中的方法均为本领域的常规方法。
[0024]本专利技术的可诊断带状疱疹的血液tsRNA标志物为tRF
‑
Pro
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AGG
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006，其序列如下：SEQ ID NO.1：GGCTCGTTGGTCTAGGGGTATGATTCTCGCTT。
[0025]1.病例筛选1.1带状疱疹患者定义为皮肤出现典型疱疹，沿神经分布，伴有烧灼感或神经痛。带状疱疹后遗神经痛(PHN)患者定义为发生带状疱疹且持续疼痛时间至少大于1个月的患者。正常健康受试者为门诊同期健康体检者。所有受试者均签署知情同意书。
[0026]1.2选择2018年12月至2019年12月在嘉兴市第一医院疼痛科就诊住院的带状疱疹患者共75例分为三组，分别是N组、A组和B组：N组为正常健康者组，血浆25份；A组为发生带状疱疹但后期未发展为带状疱疹后遗神经痛的患者，血浆25份；B组为发生带状疱疹但后期发展为带状疱疹后遗神经痛的患者，血浆25份；其中各组5份用于NGS分析，其余各组20份用于qRT
‑
PCR分析验证。
[0027]1)带状疱疹患者纳入如下标准(需同时满足)：(1)发疹前有轻度乏力、低热、食欲不振等全身症状，自觉灼热感或神经痛，触之有明显的痛觉敏感，也可无前驱症状即发疹；(2)病变皮肤出现簇集成群水疱，沿一侧周围神经呈带状分布；(3)可有明显的神经痛，可为钝痛、抽搐痛或跳痛，常伴有烧灼感，多为阵发性，也
可为持续性伴局部淋巴结肿大；(4)经带状疱疹相关针对性治疗有效；(5)美国麻醉医师学会(ASA)分级Ⅰ、Ⅱ级；(6)签署知情同意书者，并接受后续电话随访。
[0028]2)排除标准(符合任一条件即可)：(1)发热等其他全身或局部感染者；(2)交感系统疾病者；(3)经药物或其他物理治疗者；(4)精神类疾病者；(5)误诊者(如心绞痛、肋间神经痛、胆结石、胆囊炎、阑尾炎等)；(6)其他疾病者(如接触性皮炎、丹毒、虫咬皮炎、脓疱疮、大疱性类天疱疮等)；(7)经后续治疗排除带状疱疹诊断者。
[0029]2.RNA抽提及质量检测2.1样品的R本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种可诊断带状疱疹的血液tsRNA标志物，其特征在于，所述血液标志物tsRNA为tRF
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Pro
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AGG
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006，其序列如SEQ ID NO.1所示；SEQ ID NO.1：GGCTCGTTGGTCTAGGGGTATGATTCTCGCTT。2.如权利要求1所述的血液tsRNA标志物作为检测靶标在制备带状疱疹诊断试剂中的应用。3.一种检测如权利要求1所述的血液tsRNA标志物的检测试剂，其特征在于，所述检测试剂为检测如权利要求1所述的血液tsRNA标志物的特异性引物、探针或芯片。4.根据权利要求3所述的检测试剂，其特征在于，所述特异性引物的上游引物序...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐龙生，姚明，朱建军，
申请(专利权)人：嘉兴市第一医院，
类型：发明
国别省市：