诊断疾病状态的方法技术

本发明专利技术涉及用于神经退行性病症的诊断、监测和治疗的微小RNA生物标志物，所述神经退行性病症包括帕金森病、阿尔茨海默病和朊病毒病。病。病。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】诊断疾病状态的方法


[0001]本专利
涉及用于神经退行性病症，包括帕金森病(Parkinson
’
s Disease)和朊病毒病的诊断、监测和治疗的生物标志物。

技术介绍

[0002]神经退行性病症是与脑结构或功能的进行性损失(包括神经元死亡)相关的疾病或病症。许多神经退行性疾病，包括帕金森病(Parkinson'sdisease，PD)、额颞痴呆、朊病毒病、阿尔茨海默病(Alzheimer's disease，AD)、τ蛋白病、肌萎缩侧索硬化症和亨廷顿病(Huntington's disease)，均作为神经退行性过程和痴呆的结果出现。
[0003]对痴呆相关症状的神经退行性病症(例如PD和朊病毒病)的诊断的确定通常涉及神经心理和记忆评估、脑活检或尸检，使得这样的确定、监测和干预成为问题。
[0004]朊病毒病(或传染性海绵状脑病)是进行性神经退行性病症中常常具有致命性的类别，包括人中的克罗伊茨费尔特
‑
雅各布病(Creutzfeldt
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Jakob disease，CJD)或散发性克罗伊茨费尔特
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雅各布病(sporadic Creutzfeldt
‑
Jakob disease，sCJD)和Gerstmann
‑
Stra
ü
ssler
‑
Scheinker(GSS)综合征，以及动物中的牛海绵状脑病和羊瘙痒病。由于朊病毒病的长期无症状和慢性性质，因此目前没有治疗方法或有效的死前诊断方法。虽然疾病病理由正常细胞PrP
C
的构象转化为疾病相关同种型PrP
Sc
促成，但在表现出朊病毒病的临床症状之前，已经观察到脑中特征性的海绵状空泡形成和神经元的进行性损失。在其中已经发生神经元损失的临床症状出现之前，逐渐的病理变化通常伴随着神经元功能障碍(例如异常的神经炎萌芽和突触缺陷)。在人中，散发性CJD通常表现为痴呆性脑病伴肌阵挛、小脑性共济失调，并且(通常)病程的中位生存期为4个月。朊病毒病的临床诊断在神经衰退的晚期阶段进行，其中受影响的个体通常无法活动(immobile)且无法交流。因此，由于高PrP浓度和神经元损失，在该晚期阶段很难达到成功的治疗干预。如上所述，朊病毒病的诊断确定通过进行脑活检或尸检进行。对朊病毒病的发病机制以及感染期间驱动朊病毒感染性和疾病传播的分子过程的关键调节物知之甚少。
[0005]PD是第二最常见形式的神经退行性疾病。其特征在于α
‑
突触核蛋白聚集(α
‑
syn)、活性氧物质(reactive oxygen specy，ROS)排放提高以及黑质(substantia nigra，SN)中多巴胺能神经元的变性。随着时间的推移，神经功能障碍导致参与平滑肌控制的多巴胺损失，随后出现临床症状。PD的临床表现包括肌僵硬、震颤、行动迟缓、姿势不稳、单侧运动和持续不对称。PD的早期诊断是最困难的，并且依赖于一系列神经和体格检查、实验室测试和脑成像。疾病的进展在很大程度上依赖于临床症状的出现和主观临床评估。改善早期诊断和监测疾病进展将有助于患者护理，例如开处方，和监测用于管理症状的当前治疗方案。
[0006]认知损害常用于评估所有类型的痴呆和神经退行性疾病。记忆、思维和/或语言能力的损害影响被诊断患有AD的大多数患者，然而认知损害影响少于30％的PD患者。临床上使用了多种认知测试，例如帕金森病认知评定量表(Parkinson
’
s Disease
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Cognitive Rating Scale，PD
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CRS)和帕金森病
‑
认知结果量表(SCales for Outcomes of PArkinson
’
s disease
–
cognition，SCOPA
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Cog)，其中评分越高反映认知表现越好。用于评估记忆和脑功能的当前认知测试可提供不同水平的灵敏度和准确度，使这些评估具有高度主观性。此外，神经退行性病症(包括痴呆)的诊断通常基于对患者认知功能的分析。由于脑中有效的代偿机制，因此认知功能的下降通常仅在疾病处于其晚期阶段并且可用的治疗较少时才会被诊断出来。
[0007]一些PD患者不经历任何认知问题，而其他患者可能患有痴呆相关PD，并且如果他们确实患有，则通常是在帕金森病的晚期阶段。进行临床表型分析以将运动功能和损害评估为Hoeyn和Yahr(HY)量表(范围1至5)的定义类别。HY评分为1指示患者仅表现出单侧运动，而在量表的顶端，HY为5指示患者必须坐轮椅或卧床不起。发现在死亡时临床诊断患有PD的患者的平均HY评分平均为4.8，并且尸检显示黑质细胞损失严重。需要研究在症状出现之前对发生黑质损失的病理变化的进一步理解。
[0008]需要例如用于改进痴呆相关病症的基于群体的筛查和患者护理的较低侵入性的诊断测试，以便转诊患者进行进一步检查、诊断和治疗以减轻症状。本领域需要能够区分神经退行性疾病和痴呆相关病症和/或协助对象(例如老年人)的临床前监测的较低侵入性的诊断测试。此外，需要用于监测神经退行性疾病状态或神经退行性疾病阶段的较低侵入性的测试，例如响应于治疗。

技术实现思路

[0009]本专利技术人已经表明，与来自对象的样品中的外排体相关的一种或更多种小非编码RNA的表达水平可用于诊断神经退行性疾病状态或神经退行性疾病状态(例如痴呆、AD、PD和/或朊病毒病)的发展阶段。
[0010]因此，在一个方面中，本专利技术提供了诊断人对象的疾病状态的方法，所述方法包括以下步骤：a)在来自对象的样品中测量包含选自SEQ ID NO:1至79的核苷酸序列的至少一种小非编码RNA的表达水平，其中所述样品包含胞外囊泡；以及b)将所述至少一种小非编码RNA的表达水平与所述至少一种小非编码RNA的参考表达水平进行比较，其中与参考水平相比，所述至少一种小非编码RNA的表达水平提高或降低指示疾病状态或疾病状态的发展阶段。
[0011]在另一个方面中，至少一种小非编码RNA的参考表达水平是来自正常对象的样品中至少一种小非编码RNA的表达水平。在另一个方面中，至少一种小非编码RNA的参考表达水平是阈值表达水平。在一个方面中，阈值表达水平是截止值。
[0012]在一个方面中，至少一种小非编码RNA是微小RNA(miRNA)。
[0013]在另一个方面中，样品中的胞外囊泡是微囊泡。在另一个方面中，包含微囊泡的样品是富含微囊泡的样品。
[0014]本专利技术人已经表明血液样品和脑来源组织包含含有在疾病状态中脱调节(deregulate)的miRNA的外排体。因此，在一个方面中，样品是血液、血清或血浆。在另一个方面中，胞外囊泡是外排体。
[0015]本专利技术人已经表明，与来自对象的样品中的外排体相关的一种或更多种小非编码RNA的表达水平可用于诊断神本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.对人对象的疾病状态进行诊断的方法，所述方法包括以下步骤：a)在来自所述对象的样品中测量包含选自SEQ ID NO:1至79的核苷酸序列的至少一种小非编码RNA的表达水平，其中所述样品包含胞外囊泡；以及b)将所述至少一种小非编码RNA的表达水平与所述至少一种小非编码RNA的参考表达水平进行比较，其中与参考水平相比，所述至少一种小非编码RNA的表达水平提高或降低指示疾病状态或疾病状态的发展阶段。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述至少一种小非编码RNA的参考表达水平是来自正常对象的样品中所述至少一种小非编码RNA的表达水平。3.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述至少一种小非编码RNA的参考表达水平是阈值表达水平。4.根据权利要求3所述的方法，其中所述阈值表达水平是截止值。5.权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述至少一种小非编码RNA是微小RNA(miRNA)。6.权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述样品中的胞外囊泡是微囊泡。7.权利要求1至6中任一项所述的方法，其中包含微囊泡的样品是富含微囊泡的样品。8.权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述样品是血液、血清或血浆。9.权利要求1至8中任一项所述的方法，其中所述胞外囊泡是外排体。10.权利要求1至9中任一项所述的方法，其中所述疾病是神经退行性疾病。11.权利要求1至10中任一项所述的方法，其中所述疾病状态是帕金森病或帕金森病倾向。12.根据权利要求11所述的方法，其中与一个或更多个参考水平相比，选自SEQ ID NO:1至28的至少一种小非编码RNA的表达水平提高或降低指示帕金森病或帕金森病倾向。13.权利要求12所述的方法，其中与所述参考水平相比，选自SEQ ID NO:1至28的至少三种小非编码RNA的表达水平提高或降低指示帕金森病或帕金森病倾向。14.权利要求12所述的方法，其中与所述参考水平相比，选自SEQ ID NO:1、5、7和22的至少三种小非编码RNA，以及选自SEQ ID NO:2至4、6、8至21和23至28的至少五种小非编码RNA的表达水平提高或降低指示帕金森病或帕金森病倾向。15.权利要求12所述的方法，其中与所述参考水平相比，SEQ ID NO:22以及选自SEQ ID NO:7、10、23和3的至少三种小非编码RNA，以及选自SEQ ID NO:61和71至79的至少五种小非编码RNA的表达水平提高或降低指示帕金森病或帕金森病倾向。16.权利要求1至10中任一项所述的方法，其中所述疾病状态是朊病毒病或朊病毒病倾向。17.权利要求1至10中任一项所述的方法，其中所述疾病状态是克罗伊茨费尔特
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雅各...

【专利技术属性】
技术研发人员：安德鲁，
申请(专利权)人：拉筹伯大学，
类型：发明
国别省市：