【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】确定样品中PH和钙浓度或氯浓度的方法
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2018年12月2日提交的美国临时专利申请No.62/774,314的优先权权益，以引用的方式将其全部内容整体并入。
[0003]关于联邦政府资助研究或开发的声明
[0004]本专利技术是在由美国国立卫生研究院(NIH)的国家转化科学促进中心(NCATS)授予的基金号1UL1TR002389
‑
01的美国政府支持下完成的。美国政府对本专利技术享有一定的权利。
[0005]本公开涉及用于确定生物样品中的pH以及钙(Ca
2+
)浓度或氯(Cl
‑
)浓度的方法。更具体地说，本公开涉及能够使用核酸复合物同时确定pH和Ca
2+
浓度或者同时确定pH和Cl
‑
浓度的方法。
技术介绍
[0006]溶酶体是高度融合的细胞器，其调节细胞过程，例如通过与吞噬体融合的先天免疫、经由与质膜融合的细胞膜修复、通过与自噬体融合的自噬、以及经由...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.用于同时确定样品中的1)pH、和2)Ca
2+
浓度或Cl
‑
浓度的方法，所述方法包括：提供核酸复合物，所述核酸复合物包含第一单链核酸分子和第二单链核酸分子，所述第一单链核酸分子包含交联至所述第一链的Ca
2+
荧光团或Cl
‑
荧光团，所述第二单链核酸分子与所述第一单链分子部分地或完全地互补，其中，所述核酸复合物进一步包含第一标记物，所述第一标记物缀合至所述第一单链核酸分子或所述第二单链核酸分子，并且所述第一标记物能够产生信号，其中，所述信号的强度取决于pH的变化；测量所述信号的强度；以及由所测量的信号确定所述pH与Ca
2+
浓度或Cl
‑
浓度。2.如权利要求1所述的方法，其中，测定在早期内体、晚期内体、质膜、溶酶体、自噬溶酶体、循环内体、顺式高尔基体网络、反式高尔基体网络、内质网、过氧化物酶体或分泌囊泡中进行。3.如权利要求1或2所述的方法，其中，所述核酸复合物包含交联至所述第一链的Cl
‑
荧光团。4.如权利要求3所述的方法，其中，所述Cl
‑
荧光团包括10,10'
‑
双[3
‑
羧丙基]
‑
9,9'
‑
二吖啶鎓二硝酸盐。5.如权利要求1或2所述的方法，其中，所述核酸复合物包含交联至所述第一链的Ca
2+
荧光团。6.如权利要求5所述的方法，其中，所述Ca
2+
荧光团为单波长指示剂。7.如权利要求5所述的方法，其中，所述交联的Ca
2+
荧光团为：或者其中，包含Ca
2+
荧光团的所述第一单链核酸分子为下式：
其中，R为接头。8.如权利要求1
‑
7中任一项所述的方法，其中，取决于pH变化的信号的强度根据所述核酸复合物的构象而改变。9.如权利要求1
‑
8中任一项所述的方法，其中，所述核酸进一步包含缀合至所述第一单链核酸或所述第二单链核酸的第二标记物。10.如权利要求9所述的方法，其中，所述信号的强度根据以下中的至少一种而改变：所述第一标记物和第二标记物之间的距离，以及所述第一标记物和所述第二标记物的相对取向。11.如权利要求1
‑
10中任一项所述的方法，其中，所述第一单链核酸分子和第二单链核酸在酸性条件下形成i
‑
基序。12.如权利要求1
‑
10中任一项所述的方法，其中，所述第二单链核酸能够形成分子内复合物，所述分子内复合物包含在酸性条件下以反平行取向插入的两个以C
‑
HC+碱基配对的平行链双链体。13.如权利要求1
‑
12中任一项所述的方法，其中，所述核酸复合物进一步包含第三单链核酸分子，所述第三单链核酸分子与所述第一单链分子部分地互补。14.如权利要求1
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13中任一项所述的方法，其中，所述核酸复合物进一步包含靶向部分。15.如权利要求1
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14中任一项所述的方法，其中，所述第一单链核酸分子和/或第二单链核酸分子少于200个核苷酸；或少于100个核苷酸；或少于50个核苷酸。16.如权利要求1
‑
15中任一项所述的方法，其中，所确定的Ca
2+
浓度在10nM
‑
10mM的范围；或在10nM
‑
1μM的范围；或在1μM
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10mM的范围；或者，其中，所确定的Cl
‑
浓度在10nM
‑
10mM的范围；或在10nM
‑
1μM的范围；或在1μM
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10mM的范围。17.如权利要求1
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16中任一项所述的方法，其中，所确定的pH小于pH 5.5；或者，其中，所确定的...
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