一种电化学DNA传感器及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种电化学DNA传感器及其制备方法和应用，制备工作电极，所述工作电极为修饰的玻碳电极；将修饰的玻碳电极作为工作电极、饱和甘汞电极作为参比电极，铂片为对电极构成三电极体系插入含有浓度为0.1M、pH为7.4的PBS缓冲溶液的检测池中，即制得电化学DNA传感器；所述电化学DNA传感器用于检测玉米转基因MIR162。与现有技术相比，本发明专利技术的电化学DNA传感器可以检测玉米转基因MIR162，而且具有更高的灵敏度，因此这种电化学DNA生物传感器可以有效地用于检测实际检测MIR162事件，具有潜在的应用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种电化学DNA传感器及其制备方法和应用
本专利技术涉及食品检测及电化学传感器
，特别是一种电化学DNA传感器及其制备方法和应用。
技术介绍
转基因作物是指利用生物技术，把从动物、植物或微生物等生物体中经鉴定、分离的基因插入植物基因组中，改变其遗传组成，产生新的农艺性状的植物。其中Mir162玉米是由先正达公司开发的抗鳞翅目昆虫的转基因玉米，该品系是通过DNA重组技术，将一种来自苏云金芽孢杆菌的抗鳞翅类昆虫的特异性抗虫基因Vip3A导入玉米基因组中。目前该品系已在23个国家和28个欧盟国家获得了43个批准。目前转基因检测方法主要有基于蛋白质的酶联免疫吸附法(ELISA)、免疫试纸条法，基于核酸的聚合酶链式反应(PCR)法，荧光定量PCR等。但是，基于蛋白的检测方法背景信号高、蛋白质活性难以长久保持、并且无法用于事件特异性检测。而PCR方法虽然检测灵敏度较高，但常伴有各种假性结果出现，并且操作繁琐、检测时间较长。随着生物、化学、医学、电子技术等多种学科互相渗透，交叉学科的分析手段受到越来越广泛的关注。DNA生物传感器应运而生本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种电化学DNA传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：/nS1、制备工作电极，所述工作电极为修饰的玻碳电极；/nS2、将修饰的玻碳电极作为工作电极、饱和甘汞电极作为参比电极，铂片为对电极构成三电极体系插入含有浓度为0.1M、pH为7.4的PBS缓冲溶液的检测池中，即制得电化学DNA传感器。/n

【技术特征摘要】
1.一种电化学DNA传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、制备工作电极，所述工作电极为修饰的玻碳电极；
S2、将修饰的玻碳电极作为工作电极、饱和甘汞电极作为参比电极，铂片为对电极构成三电极体系插入含有浓度为0.1M、pH为7.4的PBS缓冲溶液的检测池中，即制得电化学DNA传感器。


2.根据权利要求1所述的电化学DNA传感器的制备方法，其特征在于，步骤S1中，修饰的玻碳电极方法为：
S11、将氮掺杂石墨烯金纳米复合物修饰到预处理后的玻碳电极表面，在室温下自然晾干得到Au/NG/GCE；
S12、取5μl捕获探针DNA即ssDNA滴加到Au/NG/GCE表面，室温下避光反应90min后，用超纯水轻轻冲洗掉多余的探针DNA，再将修饰电极浸入MCH中封闭处理1h，最后用超纯水轻轻冲洗后，得到CP/Au/NG/GCE电极；
S13、将S12得到的CP/Au/NG/GCE电极浸入不同浓度的目标DNA即tDNA溶液，35℃温育1h，然后用浓度为0.1M的PBS缓冲溶液淋洗，得到不同浓度的目标DNA修饰的dsDNA/Au/NG/GCE电极；
S14、将S13得到的不同浓度的目标DNA修饰的dsDNA/Au/NG/GCE电极分别浸入电活性指示剂亚甲基蓝MB溶液中反应20min，使亚甲基蓝与DNA链充分结合，然后在空白PBS缓冲液中搅拌浸入5min，最后用超纯水冲洗，得到MB/dsDNA/Au/NG/GCE电极，即为修饰的玻碳电极。


3.根据权利要求2所述的电化学DNA传感器的制备方法，其特征在于，步骤S11中，所述玻碳电极的预处理是指依次用粒径为1.0μm、0.3μm和0.05μm的Al2O3粉末抛光打磨，将玻碳电极抛光至镜面，再用超纯水和无水乙醇超声清洗后备用。


4.根据权利要求2所述的电化学DNA传感器的制备方法，其特征在于，步骤S11中，所述氮掺杂石墨烯金纳米复合物的制备方法包括下列步骤：
1)将石墨氧化成氧化石墨烯GO，然后使用30mL的2.0mg/mL氧化石墨烯溶...

【专利技术属性】
技术研发人员：张晓，刘福利，毛宇，李亮，张玉昆，文婷婷，丁佳麒，
申请(专利权)人：长春理工大学，
类型：发明
国别省市：吉林;22