一种淀粉类食品中甲醛的高效测定方法技术

本发明专利技术公开了一种淀粉类食品中甲醛的高效测定方法，包括以下步骤：(1)标准溶液的配制；(2)样品前处理；(3)对照品标准溶液的制备；(4)建立甲醛标准对照品数据库；(5)含量测定。采用超高效液相色谱‑离子肼质谱联用的方法，建立甲醛标准对照品数据库，并通过谱库检索，将阳性可疑样品EPI谱图与标准谱库进行对比确证，可有效排除假阳性。在质量浓度为0.01μg/mL～1μg/mL的范围内，方法的线性关系良好，相关系数r＞0.995，检出限为0.05mg/kg，加标平均回收率为91.7％，RSD为2.08％。该方法前处理简单、灵敏度高、专属性强，能准确地对样品中非法添加的甲醛进行定性和定量测定。

【技术实现步骤摘要】
一种淀粉类食品中甲醛的高效测定方法
本专利技术涉及食品检测领域，特别涉及一种淀粉类食品中甲醛的高效测定方法。
技术介绍
甲醛，又名蚁醛，英文名为Formaldehyde。甲醛有普通毒性作用，不仅容易损害中枢神经系统、感觉器官、肝脏、肾等；还具有剧烈的刺激作用、诱变作用、致癌作用；高浓度可发生喉部痉挛、肺炎、肺水肿及死亡。动物实验已证实甲醛的致癌性，流行病学研究发现长期接触甲醛的人可能引起鼻腔、口、咽喉癌，消化系统癌，肺癌，皮肤癌和白血病等。甲醛为国家明文规定禁止在食品中使用的非法添加物质，在食品中不得检出，但由于甲醛可以增白，改变色泽，所以甲醛常被不法商贩用来熏蒸或直接加入到米粉、面食、蘑菇或豆制品等食品中，不少食品中都不同程度检出了甲醛的存在。在食品保存中甲醛的非法添加导致了甲醛严重超标，极大地损害了人们的身体健康。目前大米粉或小麦粉中甲醛的检测，主要采用液相色谱法。虽然液相色谱较为简单、方便，但是甲醛在衍生后，进入液相色谱分析的过程中，会有比较多的干扰物，出现假阳性的情况，对甲醛的确证带来较大的困难。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种前处理简单、灵敏度高、专属性强，能准确地对样品中非法添加的淀粉类食品中甲醛的高效测定方法。根据本专利技术的一个方面，提供了一种淀粉类食品中甲醛的高效测定方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)标准溶液的配制乙腈饱和的正己烷：100mL乙腈中加入100mL正己烷，充分振荡后静置分层，取上层液；缓冲溶液：称取5.28g乙酸钠，加水溶解，加入2.0mL冰乙酸，用水定容至1L；2,4-二硝基苯肼溶液：称取2,4-二硝基苯肼盐酸盐600mg，用乙腈溶解并定容至1L；衍生液：量取缓冲溶液和2,4-二硝基苯肼溶液，体积比1：1，混匀；标准溶液中间液：准确移取浓度为100μg/mL甲醛标准溶液1mL，乙腈定容至10mL，得到浓度为10μg/mL标准溶液中间液；(2)样品前处理待测试样的制备：称取样品2g，加入10mL衍生液，充分混匀后置于60℃恒温环境振摇1h，取出冷却至室温，离心分离5min，取上清液过0.22μm有机膜，得到待测试样；(3)对照品标准溶液的制备分别准确移取10μg/mL的标准溶液中间液10μL、50μL、100μL、500μL、1000μL至10mL容量瓶中，加入缓冲液至5mL，再加入5mL2,4-二硝基苯肼溶液，混匀后置于60℃恒温环境振摇1h，取出冷却至室温，离心分离5min，取上清液过0.22μm有机膜，得到标准溶液对照样品；(4)建立甲醛标准对照品数据库将标准溶液对照样品注入超高效液相色谱-离子阱复合型质谱仪，建立甲醛标准对照品数据库；(5)含量测定将待测试样加入液相色谱-离子阱复合型质谱仪，并通过谱库检索，将阳性可疑样品EPI谱图与标准谱库进行对比确证，得到检测结果。在一些实施方式中，步骤(2)所述样品为大米、大米粉、面粉、豌豆粉、或其它淀粉类食品，样品为大颗粒状时需要将样品充分捣碎混匀。在一些实施方式中，所述步骤(4)和(5)中的液相色谱条件为：色谱柱：AcquityUPLCBEHC181.7μm，2.1mm×100mm；进样量：5μL；柱温：40℃，流动相：A为水：B为甲醇；梯度洗脱，流速：0.25mL/min；梯度洗脱程序为：0～2min，90％A；2.5min，70％A；3～5min，10％A；5.5～8min，90％A。在一些实施方式中，所述步骤(4)和(5)中的质谱条件为：电喷雾负离子模式(ESI-)；扫描模式：多反应监测(MRM)→信息关联数据采集(IDA)→增强子离子扫描(EPI)；扫描范围：50～210m/z；毛细管电压：4500V，离子源温度：500℃，气帘气(CUR)流量：30mL/min；碰撞气(CAD)选择“High”；雾化气(GS1)流量：55mL/min，辅助气(GS2)流量：55mL/min。本专利技术的有益效果是：采用超高效液相色谱-离子肼质谱联用的方法，建立甲醛标准对照品数据库，并通过谱库检索，将阳性可疑样品EPI谱图与标准谱库进行对比确证，可有效排除假阳性。在质量浓度为0.01μg/mL～1μg/mL的范围内，方法的线性关系良好，相关系数r＞0.995，检出限为0.05mg/kg，加标平均回收率为91.7％，RSD为2.08％。该方法前处理简单、灵敏度高、专属性强，能准确地对样品中非法添加的甲醛进行定性和定量测定。附图说明图1为本专利技术的一种淀粉类食品中甲醛的高效测定方法的甲醛-2,4-二硝基苯腙标准曲线图；图2为甲醛-2,4-二硝基苯腙二级质谱图；图3为甲醛(甲醛-2,4-二硝基苯腙)对照品、米粉空白基质样品及样品加标总离子流图。具体实施方式下面结合附图对专利技术作进一步详细的说明。一种实施方式的一种淀粉类食品中甲醛的高效测定方法，包括以下步骤：材料和试剂：甲醛标准溶液：100μg/mL，北京北方伟业计量研究院；2，4-二硝基苯肼盐酸盐：国药集团化学试剂有限公司；乙腈、正己烷为高效液相色谱纯：德国默克公司；硫酸铵、乙酸钠、冰乙酸为分析纯：国药集团化学试剂有限公司；实验用水为经超纯水仪处理的一级水；有机微孔滤膜：0.22μm，天津市津腾实验设备有限公司；色谱柱：AcquityUPLCBEHC181.7μm，2.1mm×100mm，美国沃特世公司；刻度比色管：10mL；塑料离心管：50mL；容量瓶：25mL。仪器与设备：4000Q-TRAP超高效液相色谱-串联三重四极杆/线性离子阱复合型质谱仪：美国ABSCIEX公司；恒温水浴振荡器：Heidolph公司；捣碎机：德国莱驰公司；涡旋仪：IKA公司；Millipore超纯水机，Elix5(Millipore公司，美国)；台式高速离心机：湖南湘仪实验室仪器开发有限公司；恒温水浴摇床，WNE10(MEMMERT，美国)。(1)标准溶液的配制乙腈饱和的正己烷：100mL乙腈中加入100mL正己烷，充分振荡后静置分层，取上层液；缓冲溶液：称取5.28g乙酸钠，加水溶解，加入2.0mL冰乙酸，用水定容至1L；2,4-二硝基苯肼溶液：称取2,4-二硝基苯肼盐酸盐600mg，用乙腈溶解并定容至1L；衍生液：量取缓冲溶液和2,4-二硝基苯肼溶液，体积比1：1，混匀；标准溶液中间液：准确移取浓度为100μg/mL甲醛标准溶液1mL，乙腈定容至10mL，得到浓度为10μg/mL标准溶液中间液；(2)样品前处理试样的制备：使用捣碎机将样品充分捣碎混匀，0～4℃冷藏保存以待测定。待测试样的制备：准确称取样品2g，加入10mL衍生液，充分混匀后置于60℃恒温水浴振荡器中水浴振摇1h，每20min取出混匀一次。水浴振摇结束后，取出冷却至室温，放入离心机中8000r/min离心分离5min，取上本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种淀粉类食品中甲醛的高效测定方法，其特征在于，包括以下步骤：/n(1)标准溶液的配制/n乙腈饱和的正己烷：100mL乙腈中加入100mL正己烷，充分振荡后静置分层，取上层液；/n缓冲溶液：称取5.28g乙酸钠，加水溶解，加入2.0mL冰乙酸，用水定容至1L；/n2,4-二硝基苯肼溶液：称取2,4-二硝基苯肼盐酸盐600mg，用乙腈溶解并定容至1L；/n衍生液：量取缓冲溶液和2,4-二硝基苯肼溶液，体积比1：1，混匀；/n标准溶液中间液：准确移取浓度为100μg/mL甲醛标准溶液1mL，乙腈定容至10mL，得到浓度为10μg/mL标准溶液中间液；/n(2)样品前处理/n待测试样的制备：称取样品2g，加入10mL衍生液，充分混匀后置于60℃恒温环境振摇1h，取出冷却至室温，离心分离5min，取上清液过0.22μm有机膜，得到待测试样；/n(3)对照品标准溶液的制备/n分别准确移取10μg/mL的标准溶液中间液10μL、50μL、100μL、500μL、1000μL至10mL容量瓶中，加入缓冲液至5mL，再加入5mL 2,4-二硝基苯肼溶液，混匀后置于60℃恒温环境振摇1h，取出冷却至室温，离心分离5min，取上清液过0.22μm有机膜，得到标准溶液对照样品；/n(4)建立甲醛标准对照品数据库/n将标准溶液对照样品注入超高效液相色谱-离子阱复合型质谱仪，建立甲醛标准对照品数据库；/n(5)含量测定/n将待测试样注入超高效液相色谱-离子阱复合型质谱仪，并通过谱库检索，将阳性可疑样品EPI谱图与标准谱库进行对比确证，得到检测结果。/n...

【技术特征摘要】
1.一种淀粉类食品中甲醛的高效测定方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)标准溶液的配制
乙腈饱和的正己烷：100mL乙腈中加入100mL正己烷，充分振荡后静置分层，取上层液；
缓冲溶液：称取5.28g乙酸钠，加水溶解，加入2.0mL冰乙酸，用水定容至1L；
2,4-二硝基苯肼溶液：称取2,4-二硝基苯肼盐酸盐600mg，用乙腈溶解并定容至1L；
衍生液：量取缓冲溶液和2,4-二硝基苯肼溶液，体积比1：1，混匀；
标准溶液中间液：准确移取浓度为100μg/mL甲醛标准溶液1mL，乙腈定容至10mL，得到浓度为10μg/mL标准溶液中间液；
(2)样品前处理
待测试样的制备：称取样品2g，加入10mL衍生液，充分混匀后置于60℃恒温环境振摇1h，取出冷却至室温，离心分离5min，取上清液过0.22μm有机膜，得到待测试样；
(3)对照品标准溶液的制备
分别准确移取10μg/mL的标准溶液中间液10μL、50μL、100μL、500μL、1000μL至10mL容量瓶中，加入缓冲液至5mL，再加入5mL2,4-二硝基苯肼溶液，混匀后置于60℃恒温环境振摇1h，取出冷却至室温，离心分离5min，取上清液过0.22μm有机膜，得到标准溶液对照样品；
(4)建立甲醛标准对照品数据库
将标准溶液对照样品注入超高效液相色谱-离子阱复合型质谱仪，建立甲醛标准对照品数据库；
(5)含量...

【专利技术属性】
技术研发人员：李红洲，王雪蓉，杨丽，张建，陈学航，彭小东，马义虔，梁桂娟，龙四红，李清伟，陈大鹏，谈晓君，彭祖茂，熊家卉，安睿，
申请(专利权)人：贵州省产品质量检验检测院，
类型：发明
国别省市：贵州;52