一种芳樟醇合酶CcLS及其编码基因与应用制造技术

本发明专利技术提供了一种芳樟醇合酶CcLS及其编码基因与应用，涉及植物基因工程技术领域。所述芳樟醇合酶CcLS的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明专利技术得到了一种新的参与芳樟醇合成的芳樟醇合酶CcLS，证明其可用于合成或制备芳樟醇。

【技术实现步骤摘要】
一种芳樟醇合酶CcLS及其编码基因与应用
本专利技术涉及植物基因工程
，尤其是涉及一种芳樟醇合酶CcLS及其编码基因与应用。
技术介绍
樟树(Cinnamomumcamphora(L.)presl)又称香樟树，别名：香樟、樟木、瑶人柴、栳樟、臭樟、乌樟；樟树为樟科樟属常绿乔木树种，国家Ⅱ级保护植物，是一种集药用、香精香料、油用、风景园林等多用途的经济植物。樟树全体均有樟脑香气，可提取樟油，根据樟油中所含主成分不同，可将樟树分为至少5个不同的化学型(chemotype)，即芳樟醇型(主成分为芳樟醇)、龙脑型(主成分为右旋龙脑)、樟脑型(主成分为樟脑)、1.8-桉叶油型(主成分为1,8-桉叶油素)、异橙花叔醇型(主成分为异橙花叔醇)等(CaihuiC,YongjieZ,YongdaZ,etal.TranscriptomeanalysisandidentificationofgenesrelatedtoterpenoidbiosynthesisinCinnamomumcamphora[J].BMCGenomics,2018,19(1):550.)。其中芳樟醇型樟树主成分为芳樟醇，是提取芳樟醇的理想原料。芳樟醇(linalool)广泛分布于高等植物的腺体、油室和树脂道等分泌组织中，是植物挥发油的主要成分。工业上主要用于做香料或合成中间体，是医药、化妆品等行业的重要原料。近年来研究表明，芳樟醇具有多种生物活性，包括消炎止痛作用(HuoM,CuiX,XueJ等.Anti-inflammatoryeffectsoflinaloolinRAW264.7macrophagesandlipopolysaccharide-inducedlunginjurymodel[J].JSurgRes,2013,180(1):e47-e54；BatistaPA,WernerMF,OliveiraEC等.Evidencefortheinvolvementofionotropicglutamatergicreceptorsontheantinociceptiveeffectof(-)-linaloolinmice[J].NeurosciLett,2008,440(3):299-303.)、肿瘤化疗增敏作用(MiyashitaM,SadzukaY.EffectoflinaloolasacomponentofHumuluslupulusondoxorubicin-inducedantitumoractivity[J].FoodChemToxicol,2013,53:174-179.)、镇静抗焦虑作用(LinckVM,da-SilvaAL,FigueiroM等.EffectsofinhaledLinaloolinanxiety,socialinteractionandaggressivebehaviorinmice[J].Phytomedicine,2010,17(8/9):679-683.)、驱避杀虫作用(de-Oliveira-Souza-SenraT,ZeringotaV,de-Oliveira-MonteiroCM等.Assessmentoftheacaricidalactivityofcarvacrol,(E)-cinnamaldehyde,trans-anethole,andlinaloolonlarvaeofRhipicephalusmicroplusandDermacentornitens(Acari:Ixodidae)[J].ParasitolRes,2013,112(4):1461-1416.)等。芳樟醇(linalool)属于链状含氧单萜衍生物的烯醇类物质。在植物中，通过胞浆的甲羟戊酸途径(mevalonicacid(MVA)pathway)和质体的2-甲基-D-赤藓糖醇-4-磷酸盐(MEP)途径生成萜类的通用底物异戊烯焦磷酸(Isopentenylpyrophosphate，IPP)及其异构体二甲基丙烯焦磷酸酯(Dimethylallylpyrophosphate，DMAPP)。再由此生成单萜(monoterpenes)、倍半萜(sesquiterpenes)、二萜(diterpenes)、三萜(triterpenes)的底物香叶基焦磷酸(Geranyldiphosphate，GPP)、法尼基焦磷酸(Farnesyldiphosphate，FPP)和牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸(Geranylgeranyldiphosphate，GGPP)。单萜合酶(monoterpenesynthase)，又称单萜环化酶(monoterpenecyclase)能够催化GPP形成各种单萜骨架，被认为是合成萜类次生代谢终产物的关键酶(ChenF,ThollD,BohlmannJ等，Thefamilyofterpenesynthasesinplants:amid-sizefamilyofgenesforspecializedmetabolismthatishighlydiversifiedthroughoutthekingdom[J].ThePlantJournal,2011,66(1):212-229；TrappSC,CroteauR.Genomicorganizationofplantterpenesynthasesandmolecularevolutionaryimplications[J].Genetics,2001,158:811-832)。因此，有必要研究具有含氧单萜衍生物芳樟醇合成能力的关键酶基因。鉴于此，特提出本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种含氧单萜衍生物芳樟醇合成的关键酶及其编码基因，以及其在合成芳樟醇中的应用。为解决上述问题，本专利技术提供的技术方案如下：在一个方面，本专利技术提供了一种芳樟醇合酶CcLS，所述芳樟醇合酶CcLS的氨基酸序列如SEQIDNo.2所示。SEQIDNo.2由582个氨基酸残基组成。本专利技术的芳樟醇合酶CcLS，来源于樟树(Cinnamomumcamphora(L.)presl)，命名为樟树芳樟醇合酶CcLS。进一步地，本专利技术包括由序列SEQIDNo.2所示的氨基酸的N端或/和C端连接蛋白标签得到的融合蛋白。进一步地，本专利技术还包含具有在SEQIDNo.2所示的氨基酸序列基础上缺失、置换、插入或添加一个至几个氨基酸的衍生序列且具有该序列的蛋白质具有芳樟醇合酶活性。例如，所述氨基酸序列组成的蛋白的保守性变体、生物活性片段或衍生物，只要该蛋白的片段或蛋白变体与前述氨基酸序列同源性在90％以上，均属于本专利技术保护范围之列。优选地，所述蛋白的保守性变体、生物活性片段或衍生物的氨基酸序列与SEQIDNo.2所示的氨基酸序列具有95％以上的同一性，例如96％、97％、98％、99％或100％。在另一个方面，本专利技术提供了所述芳樟醇合酶CcLS的编码基因，所述编码基因的核苷酸序列如SEQIDNo.1所示。进一步地，所述核苷酸可包含其保守置换的变体(例如简本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种芳樟醇合酶CcLS，其特征在于，所述芳樟醇合酶CcLS的氨基酸序列如SEQIDNo.2所示。/n

【技术特征摘要】
1.一种芳樟醇合酶CcLS，其特征在于，所述芳樟醇合酶CcLS的氨基酸序列如SEQIDNo.2所示。


2.权利要求1所述的芳樟醇合酶CcLS的编码基因，其特征在于，所述编码基因的核苷酸序列如SEQIDNo.1所示。


3.一种重组载体，其特征在于，包含权利要求2所述的芳樟醇合酶CcLS的编码基因。


4.一种重组细胞，其特征在于，包含权利要求3所述的重组载体或表达权利要求1所述的芳樟醇合酶CcLS。


5.根据权利要求4所述的重组细胞，其特征在于，所述重组细胞为大肠杆菌，优选大肠杆菌表达菌株Transetta(DE3)。


6.权利要求1所述的芳樟醇合酶CcLS、权利要求2所述芳樟醇合酶CcLS的编码基因、权利要求3所述的重组载体或权利要求4或权利要求5所述的重组细胞在制备芳...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨孝廉，
申请(专利权)人：深圳天雄生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44