一种白肋烟烘焙过程中美拉德反应产物的判定和检测方法技术

本发明专利技术提供一种白肋烟烘焙过程中美拉德反应产物的判定和检测方法。所述判定方法包括：将白肋烟叶样品进行粉碎和致香成分萃取，采用气相色谱‑三重四级杆串联质谱分析萃取溶液，对萃取溶液进行致香成分分析，确定烘焙样品较对照样品增加的致香成分，采用变化倍数法对白肋烟烘焙过程中美拉德反应特征致香产物进行判定。本发明专利技术还提供一种白肋烟烘焙过程美拉德反应产物的检测方法。本发明专利技术提供的方法具有简单高效、灵敏度高、选择性好和准确度高等优点，适用于白肋烟烘焙过程中美拉德反应特征致香产物的检测和判定。

【技术实现步骤摘要】
一种白肋烟烘焙过程中美拉德反应产物的判定和检测方法
本专利技术涉及致香成分检测领域，尤其涉及一种白肋烟烘焙过程美拉德反应产物的判定和检测方法。
技术介绍
混合型卷烟是一种重要的卷烟产品类型，占有很高的市场份额和较多的消费群体。白肋烟处理工艺是混合型卷烟生产的关键环节，其主要工艺为加料和高温烘焙。美拉德反应是白肋烟加料烘焙处理过程中进行的最主要的反应。该反应是烟叶中的氨基化合物(如氨基酸、胺、多肽或蛋白质等)与糖类物质发生缩合、重排、裂解、聚合等一系列反应的一类复杂反应。白肋烟烘焙过程中的美拉德反应特征产物包括吡嗪、呋喃、吡咯、吡啶、醛、醇、酯、醚等多种类致香成分，构成了混合型卷烟特有香吃味的物质基础，对混合型卷烟的感官质量具有显著影响。美拉德反应特征产物的判定和准确测定对白肋烟处理工艺研究及混合型卷烟产品质量提高都具有重要作用。目前，已报道的美拉德反应致香产物的鉴定和检测方法多是糖和氨基酸在模型体系中美拉德反应产物的测定方法，而白肋烟中含有多种糖和氨基化合物，其烘焙过程中发生的美拉德反应较模型体系更为复杂，且烟草是全世界公认的最复杂化学体系之一，鉴定出的成分已达9825种，基质极其复杂，已报道模型体系中的美拉德反应致香产物的鉴定和检测方法显然不适用于白肋烟烘焙过程中美拉德反应特征产物的鉴定和检测。目前鲜见专门针对白肋烟烘焙过程中美拉德反应特征产物的鉴定和检测方法。因此，建立一种有效的美拉德反应特征产物的判定方法以及快速、准确的白肋烟烘焙过程美拉德反应特征产物的检测方法是十分必要的。
技术实现思路
本专利技术实施例提供一种白肋烟烘焙过程美拉德反应产物的判定方法。本专利技术提供的白肋烟烘焙过程美拉德反应产物判定方法填补了现有技术空白，具有简单高效、灵敏度高、选择性好和准确度高等优点，适用于白肋烟烘焙过程美拉德反应特征致香产物的检测和判定。本专利技术实施例提供一种白肋烟烘焙过程美拉德反应产物的判定方法，包括：将白肋烟叶样品进行粉碎和致香成分萃取，采用气相色谱-三重四级杆串联质谱分析(GC-MS/MS)萃取溶液，对萃取溶液进行致香成分分析，确定烘焙样品较对照样品增加的致香成分，采用变化倍数法对白肋烟烘焙过程中美拉德反应特征致香产物进行判定。根据本专利技术实施例提供的一种白肋烟烘焙过程中美拉德反应产物的判定方法，萃取溶剂为甲基叔丁基醚、二氯甲烷、环己烷或甲醇；优选的，所述萃取溶剂为甲醇；内标物为乙酸苯乙酯，浓度为1～2mg/mL。本专利技术中，采用上述萃取溶剂，能够对烟草中的致香成分进行有效萃取。尤其是采用上述优选萃取溶剂，能够进一步提高致香成分的有效萃取及萃取效率。根据本专利技术实施例提供的一种白肋烟烘焙过程中美拉德反应产物的判定方法，还包括：取3～6g所述烟末样品，加入20～50mL萃取溶剂和40～100μL内标物，超声萃取1～2h，静置5±1min，然后进行气相色谱-三重四级杆串联质谱分析测定；优选的，采用保留时间确认和标准加入法进行定性分析，采用内标法比较两组样品的检测结果。根据本专利技术实施例提供的一种白肋烟烘焙过程中美拉德反应产物的判定方法，还包括：将白肋烟叶样品进行烘干、粉碎，在相对湿度60±3％，温度20±1℃的条件下平衡12～24h，然后将平衡后的白肋烟叶样品在40±1℃温度下烘1～2h后粉碎，过40目筛网，得烟末样品；所述白肋烟叶样品包括经烘焙处理的烘焙样品和未经烘焙处理的对照样品。本专利技术中，采用上述处理方法得到的烟末样品在保持致香成分不挥发的情况下，保持样品间水分一致。根据本专利技术实施例提供的一种白肋烟烘焙过程中美拉德反应产物的判定方法，所述气相色谱条件：色谱柱为DB-WAX30m×0.25mm×0.25μm，HP-INNOWax30m×0.25mm×0.25μm或DB-530m×0.25mm×0.25μm；进样口温度230～260℃；升温程序：初始温度45～60℃保持2～5min，以1～4℃/min升至200℃，再以3～10℃/min升至240℃，保持5～15min；载气：He，1mL/min；进样量：1μL；进样模式：不分流进样；和/或，所述质谱条件：离子源：电子轰击EI+；电子能量：70eV；离子源温度：230℃；传输线温度：250℃；倍增电压：500V；质量分析器：四级杆；扫描模式：全扫描，扫描范围：35～350amu。根据本专利技术实施例提供的一种白肋烟烘焙过程中美拉德反应产物的判定方法，所述气相色谱条件：色谱柱，DB-WAX30m×0.25mm×0.25μm；进样口温度250℃；升温程序：初始温度50℃保持3min，以2℃/min升至200℃，再以5℃/min升至240℃，保持10min。载气：He，1mL/min；进样量：1μL；进样模式：不分流进样。本专利技术中，在白肋烟烘焙过程中美拉德反应产物的判定过程中，通过采用上述气相色谱和质谱条件，能够使得各致香成分得到有效分离，提高了分析的准确性。根据本专利技术实施例提供的一种白肋烟烘焙过程中美拉德反应产物的判定方法，所述致香成分分析包括：通过NIST谱库匹配确定目标致香成分，然后比较标准样品与待测样品中目标致香成分保留时间的一致性，分离鉴定出目标致香成分；采用目标致香成分的峰面积与内标峰面积的比值，对样品进行分析。根据本专利技术实施例提供的一种白肋烟烘焙过程中美拉德反应产物的判定方法，所述变化倍数法：计算白肋烟加料烘焙后致香成分的含量与未烘焙对照样的比值，选择阈值为2倍；变化倍数≥2，则认为烘焙后该致香成分变化显著，判定为美拉德特征致香产物。本专利技术实施例还提供一种白肋烟烘焙过程中美拉德反应产物的检测方法，所述美拉德反应产物通过所述判定方法确定，包括：对白肋烟叶样品的萃取液进行气相色谱-三重四级杆串联质谱分析测定，计算白肋烟烘焙过程中美拉德特征致香产物含量。根据本专利技术实施例提供的一种白肋烟烘焙过程中美拉德反应产物的检测方法，包括：取烘焙后的白肋烟叶样品，在40±1℃温度下烘1～2h后粉碎，过40目筛网；准确称取1～3g烟末样品，加入20～60mL甲醇和20～60μL乙酸苯乙酯内标，超声萃取1～2h，静置5min后，用取上层萃取液经0.45μm过滤后，进行气相色谱-三重四级杆串联质谱分析测定，计算白肋烟烘焙过程中美拉德特征致香产物含量。根据本专利技术实施例提供的一种白肋烟烘焙过程中美拉德反应产物的检测方法，气相色谱条件：色谱柱：DB-WAX毛细管柱(30m×0.25mm×0.25μm)；升温程序：初始温度40～50℃，保持2～5min，以3～6℃/min的速率升温至55～80℃，再以2～5℃/min速率升温至140～160℃，保持1～3min，以5～10℃/min的速率升温至190～210℃，保持2～4min，再以10～25℃/min的速率升温至230～245℃，保持4～6min；进样口温度：250℃；进样量：1μL，不分流进样；恒流模式，柱流量1mL/min；和/或，质谱分析条件：EI电离模式，电离能70ev；离子源温度：230℃；传输线温度：250℃；Q1和Q3温度：150℃；碰撞气：N2，流速1.5mL/本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种白肋烟烘焙过程中美拉德反应产物的判定方法，其特征在于，包括：将白肋烟叶样品进行粉碎和致香成分萃取，采用气相色谱-三重四级杆串联质谱分析萃取溶液，对萃取溶液进行致香成分分析，确定烘焙样品较对照样品增加的致香成分，采用变化倍数法对白肋烟烘焙过程中美拉德反应特征致香产物进行判定。/n

【技术特征摘要】
1.一种白肋烟烘焙过程中美拉德反应产物的判定方法，其特征在于，包括：将白肋烟叶样品进行粉碎和致香成分萃取，采用气相色谱-三重四级杆串联质谱分析萃取溶液，对萃取溶液进行致香成分分析，确定烘焙样品较对照样品增加的致香成分，采用变化倍数法对白肋烟烘焙过程中美拉德反应特征致香产物进行判定。


2.根据权利要求1所述的白肋烟烘焙过程中美拉德反应产物的判定方法，其特征在于，萃取溶剂为甲基叔丁基醚、二氯甲烷、环己烷或甲醇；优选的，所述萃取溶剂为甲醇；内标物为乙酸苯乙酯，浓度为1～2mg/mL。


3.根据权利要求2所述的白肋烟烘焙过程中美拉德反应产物的判定方法，其特征在于，还包括：取3～6g所述烟末样品，加入20～50mL萃取溶剂和40～100μL内标物，超声萃取1～2h，静置5±1min，然后进行气相色谱-三重四级杆串联质谱分析测定；优选的，采用保留时间确认和标准加入法进行定性分析，采用内标法比较两组样品的检测结果。


4.根据权利要求1所述的白肋烟烘焙过程中美拉德反应产物的判定方法，其特征在于，还包括：将白肋烟叶样品进行烘干、粉碎，在相对湿度60±3％，温度20±1℃的条件下平衡12～24h，然后将平衡后的白肋烟叶样品在40±1℃温度下烘1～2h后粉碎，过40目筛网，得烟末样品；所述白肋烟叶样品包括经烘焙处理的烘焙样品和未经烘焙处理的对照样品。


5.根据权利要求1-4任一项所述的白肋烟烘焙过程中美拉德特征致香产物的判定方法，其特征在于，所述气相色谱条件：色谱柱为DB-WAX30m×0.25mm×0.25μm，HP-INNOWax30m×0.25mm×0.25μm或DB-530m×0.25mm×0.25μm；进样口温度230～260℃；升温程序：初始温度45～60℃保持2～5min，以1～4℃/min升至200℃，再以3～10℃/min升至240℃，保持5～15min；载气：He，1mL/min；进样量：1μL；进样模式：不分流进样；和/或，所述质谱条件：离子源：电子轰击EI+；电子能量：70eV；离子源温度：230℃；传输线温度：250℃；倍增电压：500V；质量分析器：四级杆；扫描模式：全扫描，扫描范围：35～350amu；
优选的，所述气相色谱条件：色谱柱，DB-WAX30m×0.25mm×0.25μm；进样口温度250℃；升温程序：初始温度50℃保持3min，以2℃/min升至200℃，再以5℃/min升至240℃，保持10min。载气：He，1mL/min；进样量：1μL；进样模式：不分流进样。


6.根据权利要求1-5任一项所述的白肋烟烘焙过程中美拉德反应产物的判定方法，其特征在于，所述致香成分...

【专利技术属性】
技术研发人员：张杰，周骏，蒋成勇，白若石，欧亚非，杜国荣，马雁军，徐同广，杨振民，矫海楠，朱景溯，刘德水，芦楠，曹伏军，田书霞，胡林，
申请(专利权)人：上海烟草集团有限责任公司，上海烟草集团北京卷烟厂有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31