经遗传修饰的禽及其重构方法技术

本文公开了转基因构建体、使用其的方法及通过此类方法提供的转基因禽，所述转基因构建体包含(i)第一核苷酸序列，其中由所述第一核苷酸序列编码的蛋白质的活性在外源诱导剂的存在下导致生殖细胞死亡，和(ii)第二核苷酸序列，所述第二核苷酸序列将所述构建体靶向禽生殖细胞。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】经遗传修饰的禽及其重构方法
本专利技术涉及用于从生殖细胞产生经遗传修饰的和/或野生型禽(例如鸡)的方法、以及使用此类方法产生的禽。
技术介绍
从分离的生殖细胞生产禽品种目前是一个在很大程度上效率低下且困难的方法。一个与经遗传修饰的禽的产生相关的具体问题是含有遗传修饰的生殖细胞稳定地传递到禽的后代和此类禽的后续世代中。特别地，当使用常规方法时，生殖细胞的传递效率特别低下，这是供体生殖细胞((可能经遗传修饰或可能未经遗传修饰))与内源性生殖细胞在形成功能性配子方面竞争的结果。尽管二倍体生殖细胞可以从一种禽移植到宿主禽中，但是由后续形成的配子产生的后代的比例是可变的，一些或所有后代是由源自内源性((宿主鸟))生殖细胞的配子形成的(Nakamura等(2010)ReprodFertDev22(8):1237-1246；Song等(2014)BiolReprod90(1):15)。内源性(宿主)生殖细胞可以使用辐射或化疗试剂(例如busulphan)破坏，但是这些毒性试剂也可以杀伤动物以及内源性生殖细胞。Tagami使用化学处理来产生无菌替代宿主本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种转基因构建体，其包含(i)第一核苷酸序列，其中由所述第一核苷酸序列编码的蛋白质的活性在外源诱导剂的存在下导致生殖细胞死亡，和(ii)第二核苷酸序列，所述第二核苷酸序列将所述构建体靶向禽生殖细胞。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20181012 GB 1816633.01.一种转基因构建体，其包含(i)第一核苷酸序列，其中由所述第一核苷酸序列编码的蛋白质的活性在外源诱导剂的存在下导致生殖细胞死亡，和(ii)第二核苷酸序列，所述第二核苷酸序列将所述构建体靶向禽生殖细胞。


2.根据权利要求1所述的转基因构建体，其中所述第一核苷酸序列包含细胞凋亡诱导结构域，并且其中所述外源诱导剂是能够激活所述细胞凋亡结构域以引起生殖细胞凋亡的二聚化剂。


3.根据权利要求1或权利要求2所述的转基因构建体，其中所述第一核苷酸序列编码细胞凋亡诱导酶。


4.根据权利要求3所述的转基因构建体，其中所述外源诱导剂选自AP20187配体FK1012、AP1501或AP1903。


5.根据权利要求2或权利要求3所述的转基因构建体，其中所述外源诱导剂是二聚化稳定药物。


6.根据权利要求1所述的转基因构建体，其中所述第一核苷酸序列编码能够将非细胞毒性前药转化为杀伤所述生殖细胞的细胞毒性剂的酶，任选地其中所述外源诱导剂是被所述酶转化为杀伤所述生殖细胞的细胞毒性剂的前药。


7.根据权利要求3所述的转基因构建体，其中所述凋亡诱导酶是Caspase，任选地其中所述Caspase选自哺乳动物Caspase9、iCaspase9或鸡化CaspaseaviCaspase9。


8.根据前述权利要求中任一项所述的转基因构建体，其中所述第二核苷酸序列靶向选自在禽生殖细胞中特异性表达的基因的基因位点，所述基因由DAZL、DDX4、DMRT1、MIR383、TDRD15、TDRD5、FKB6、GASZ、DMRTB1、TDRD9、GTSF1、MOV10L1、STK31、RNF17、FDFT1、GNG10、DDX43、KCNH7、SOX21、TUBA1B和PNLDC1组成，或选自以下项的RNA编码基因：MSTRG.9846(2:40789480...

【专利技术属性】
技术研发人员：M麦格鲁，M伍德科克，
申请(专利权)人：爱丁堡大学理事会，
类型：发明
国别省市：英国;GB