NK细胞协同刺激聚合物胶束的制备方法及应用技术

本发明专利技术公开了NK细胞协同刺激聚合物胶束的制备方法及应用，利用PEG‑PTMC聚合物将IL‑15和IL‑2同时负载，制备NK细胞协同刺激聚合物胶束(PEG‑PTMC‑IL‑2/IL‑15)，具有较高的肿瘤抑制率，同时可有效促进肿瘤细胞的凋亡。

【技术实现步骤摘要】
NK细胞协同刺激聚合物胶束的制备方法及应用
本专利技术属于生物医药
，具体涉及NK细胞协同刺激聚合物胶束的制备方法及应用。
技术介绍
癌症是当今社会严重影响人类健康、威胁生命的主要疾病之一。自然杀伤细胞(naturekillercell，NKcell)是机体抗肿瘤的主要免疫细胞之一，其无需预先致敏即可直接杀伤肿瘤、病毒感染等细胞，近年来受到广泛关注。然而，NK细胞对肿瘤细胞的杀伤功能受到多种因素限制，在免疫治疗过程中，如何高效激活NK细胞是亟待解决的问题之一。NK细胞表面多种活化性受体的协同刺激是NK细胞充分活化的必要前提。白介素-15(Interleukin-15,IL-15)是由单核细胞等免疫细胞分泌的一种可溶性细胞因子，其不但是NK细胞定向发育的刺激因子，能从外周血单核细胞中将NK细胞纯化出来，对NK细胞具有潜在的靶向作用；同时还可显著提高NK细胞的杀伤活性。细胞因子白介素-2(Interleukin-2,IL-2)是主要由T细胞分泌的一种细胞因子，对于促进NK细胞在体内的稳态平衡、增强NK细胞的免疫应答具有重要意义。...

【技术保护点】
1.一种NK细胞协同刺激聚合物胶束的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：/n1)向IL-2和IL-15的混合水溶液中加入催化量的TCEP，室温下进行反应，得到反应液；/n2)向步骤1)得到的反应液中加入DBM-PEG-PTMC，室温下进行反应，得到反应物；/n3)将步骤2)得到的反应物依次经透析、离心收集上清、浓缩后得NK细胞协同刺激聚合物胶束。/n

【技术特征摘要】
1.一种NK细胞协同刺激聚合物胶束的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)向IL-2和IL-15的混合水溶液中加入催化量的TCEP，室温下进行反应，得到反应液；
2)向步骤1)得到的反应液中加入DBM-PEG-PTMC，室温下进行反应，得到反应物；
3)将步骤2)得到的反应物依次经透析、离心收集上清、浓缩后得NK细胞协同刺激聚合物胶束。


2.根据权利要求1所述NK细胞协同刺激聚合物胶束的制备方法，其特征在于：
IL-2和IL-15的质量之和与DBM-PEG-PTMC的质量之比为1∶5～20。


3.根据权利要求1或2所述NK细胞协同刺激聚合物胶束的制备方法，其特征在于：
步骤1)中，室温下搅拌反应30～40min；
步骤2)中，室温下搅拌反应0.5～2h。


4.根据权利要求3所述NK细胞协同刺激聚合物胶束的制备方法，其特征在于，步骤3)的具体步骤为：
3.1)将步骤2)得到的反应物置于3000～3500Da透析袋中透析1～2天，除去催化剂以及杂质，期间每4±0.5h换一次透析水；
3.2)透析结束后收集样品，1000～2000rpm/min离心5～20min，弃去下层絮状沉淀，收集上清液；
3.3)对步骤3.2)得到的上清液进行超滤浓缩除去未反应的IL-2和IL-15，得到NK细胞协同刺激聚合物胶束。


5.根据权利要求1所述NK细胞协同刺激聚合物胶束的制备方法，其特征在于：
步骤2)中，所述DBM-PEG-PTMC采用以下方法获得：
S1.制备N3-PEG-PTMC和alkynyl-DBM：
在氮气氛围和催化剂TBD存在的条件下，N3-PEG-OH和...

【专利技术属性】
技术研发人员：邵东燕，黄庆生，朱博博，白婷，孔杰，师俊玲，
申请(专利权)人：西北工业大学，
类型：发明
国别省市：陕西;61