一种基于荧光共振能量转移的GPC3检测方法技术

一种基于荧光共振能量转移的GPC3检测方法，以GPC3适配体为识别探针，GPC3适配体能够特异性识别和结合GPC3蛋白，基于纳米金‑碳量子(AuCDs)‑GPC3适配体和磁性石墨烯(Fe

【技术实现步骤摘要】
一种基于荧光共振能量转移的GPC3检测方法
本专利技术属于光学传感
，具体涉及一种基于荧光共振能量转移的GPC3检测方法。
技术介绍
磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3（GPC3）是一种硫酸类肝素蛋白多糖。常用的GPC3检测方法是酶联免疫吸附测定(enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA)，利用抗原和抗体间的特异性反应进行分析检测，但是ELISA存在价格高、稳定性差、不易储存和运输等问题。适配体(aptamer)，被称为“人工替代抗体”，是一种人工设计的单链寡核苷酸(ssDNA或RNA)，具有以三级结构(如发卡、口袋、凸环等)特异识别靶分子的作用。专利技术专利CN106636108A公开了一种特异性结合GPC3的核酸适配体及其应用，利用结合毛细管电泳的SELEX技术筛选与肝癌标志物GPC3特异性结合的适配体，获得具有特异结合GPC3的适配体序列G625，并利用该GPC3适配体制备肝癌血清诊断试剂、肝癌组织切片染色试剂以及肝癌相关的活体成像造影剂。荧光共振能量转移（fluorescenceresonanceenergyt本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于荧光共振能量转移的GPC3检测方法，按以下步骤进行：/n步骤1：荧光共振供体AuCDs-GPC3

【技术特征摘要】
1.一种基于荧光共振能量转移的GPC3检测方法，按以下步骤进行：
步骤1：荧光共振供体AuCDs-GPC3Apt的制备
AuCDs的制备：往葡萄糖溶液添加HAuCl4溶液，搅拌均匀，滴加脱水柠檬酸三钠（SCT）溶液继续搅拌、加热，反应完成后冷却、离心，得到AuCDs溶液；
AuCDs-GPC3Apt的制备：量取AuCDs和GPC3Apt，在室温且避光的条件下搅拌混合一定时间，得到AuCDs-GPC3Apt溶液；
步骤2：荧光共振能量转移的反应体系的构建
称量Fe3O4/GO粉末，加入超纯水定容，破碎，分散，即得Fe3O4/GO分散液；
将Fe3O4/GO溶液和AuCDs-GPC3Apt溶液混合，孵育，使AuCDs的荧光淬灭，形成AuCDs-GPC3Apt-Fe3O4/GOFRET反应体系；用荧光分光光度计进行扫描，固定激发波长为350nm，测量其440nm处荧光强度，记作F0；
步骤3：GPC3工作曲线的绘制
将不同浓度的GPC3溶液加入到AuCDs-GPC3Apt-Fe3O4/GOFRET反应体系，孵育，用荧光分光光度计进行扫描，固定激发波长为350nm，测量其44...

【专利技术属性】
技术研发人员：李桂银，陈伟，米丹红，王仲民，王博，周治德，
申请(专利权)人：桂林电子科技大学，
类型：发明
国别省市：广西;45