一种用于检测卵巢癌相关基因甲基化的核酸组合物、试剂盒和检测方法技术

本发明专利技术公开了一种用于检测卵巢癌相关基因甲基化的核酸组合物、试剂盒和检测方法，核酸组合物，包括：RASSF1A基因目的位点的甲基化特异性引物和探针；OPCML基因目的位点的甲基化特异性引物和探针；RUNX3基因目的位点的甲基化特异性引物和探针；TFPI2基因目的位点的甲基化特异性引物和探针；ACTB内参基因的特异性引物和探针；本发明专利技术发现的核酸组合物配置成的试剂盒具有检测检测卵巢癌相关基因甲基化结果准确、操作简单、准确性高及敏感性高等优点。

【技术实现步骤摘要】
一种用于检测卵巢癌相关基因甲基化的核酸组合物、试剂盒和检测方法
本专利技术涉及生物检测
，特别是一种用于检测卵巢癌相关基因甲基化的核酸组合物、试剂盒和检测方法。
技术介绍
卵巢癌(OvarianCancer)是妇科最常见并严重威胁妇女生命和健康的恶性肿瘤之一，易于转移和广泛播散，其发病率低于子宫颈癌和子宫内膜癌，居妇科恶性肿瘤第3位，但病死率却超过前两者之和，高居妇科癌症之首。其发病十分隐匿，转移前常无症状，手术不能完全清除病灶，再加上术后化疗作用局限，术后复发率高、预后差。世界卫生组织国际癌症研究机构(IARC)发布的2020年全球最新癌症统计数据显示：每年约有31.4万例新发病例，20.7万例死亡病例。卵巢恶性肿瘤组织类型繁多，其中上皮性卵巢癌(EpithelialOvarianCancer，EOC)最常见，约占80-90％，是目前死亡率最高的妇科恶性肿瘤，高达70％。目前卵巢癌现有临床筛查、诊断方法可归为三大类：影像学(超声，CT，PET/CT，MRI等)，血清学(血清中肿瘤标志物如CA-125的检测)和病理学(组织本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于检测卵巢癌相关基因甲基化的核酸组合物，其特征在于，包括：RASSF1A基因目的位点的甲基化特异性引物和探针；OPCML基因目的位点的甲基化特异性引物和探针；RUNX3基因目的位点的甲基化特异性引物和探针；TFPI2基因目的位点的甲基化特异性引物和探针；ACTB内参基因的特异性引物和探针；/n所述RASSF1A基因目的位点的甲基化特异性引物和探针包括：/n正向引物：5＇-CGGGGTTCGTTTGTGGTTTC-3＇SEQ ID 01，/n反向引物：5＇-CCGATTAAATCGTACTTCGC-3＇SEQ ID 02，/n检测探针：5＇标记物-TCGCGTTTTTAGCGTTTAA...

【技术特征摘要】
1.一种用于检测卵巢癌相关基因甲基化的核酸组合物，其特征在于，包括：RASSF1A基因目的位点的甲基化特异性引物和探针；OPCML基因目的位点的甲基化特异性引物和探针；RUNX3基因目的位点的甲基化特异性引物和探针；TFPI2基因目的位点的甲基化特异性引物和探针；ACTB内参基因的特异性引物和探针；
所述RASSF1A基因目的位点的甲基化特异性引物和探针包括：
正向引物：5＇-CGGGGTTCGTTTGTGGTTTC-3＇SEQID01，
反向引物：5＇-CCGATTAAATCGTACTTCGC-3＇SEQID02，
检测探针：5＇标记物-TCGCGTTTTTAGCGTTTAAAGT-3＇标记物SEQID03；
所述OPCML基因目的位点的甲基化特异性引物和探针包括：
正向引物：5＇-CGGGCGGCGTTTATTTTAATTT-3＇SEQID04，
反向引物：5＇-GCTAACGCGAATCGAAACGAA-3＇SEQID05，
检测探针：5＇标记物-CGTCGCTTATCGGGTTGGGGATGTTT-3＇标记物SEQID06；
所述RUNX3基因目的位点的甲基化特异性引物和探针包括：
正向引物：5＇-TTCGCGGAGGGTTTTAGTGT-3＇SEQID07，
反向引物：5＇-CGACAAAACCCTTCCGTAA-3＇SEQID08，
检测探针：5＇标记物-AGTTTAGGGTTCGAGAGTTTTGGGAGTTCG-3＇标记物SEQID09；
所述TFPI2基因目的位点的甲基化特异性引物和探针包括：
正向引物：5＇-GTTCGTTGGTAAGGCGTTC-3＇SEQID10，
反向引物：5＇-ATAAAAGAACCCCGAACCG-3＇SEQID11，
检测探针：5＇标记物-AGCGTTGCGGGAGGAGGTGC-3＇标记物SEQID12；
所述ACTB内参基因特异性引物和探针包括：
正向引物：5＇-GTGATGGAGAGTTTAGTAAGTT-3＇SEQID13，
反向引物：5＇-GCACTCTTCCAAACGAAACG-3＇SEQID14，
检测探针：5＇标记物-ACCACCACCACACACAATAACAAACACA-3＇标记物SEQID15。


2.一种用于检测卵巢癌相关基因甲基化的试剂盒，其特征在于，包括：PCR反应液，阴性质控品，阳性质控品和无模板对照；PCR反应液包括：RASSF1A基因目的位点的甲基化特异性引物和探针，OPCML基因目的位点的甲基化特异性引物和探针，RUNX3基因目的位点的甲基化特异性引物和探针，TFPI2基因目的位点的甲基化特异性引物和探针，ACTB内参基因的特异性引物和探针，2XPCR缓冲液，dNTP，无核酸酶水，基因组DNA样本和Taq酶；
所述RASSF1A基因目的位点的甲基化特异性引物和探针包括：
正向引物：5＇-CGGGGTTCGTTTGTGGTTTC-3＇SEQID01，
反向引物：5＇-CCGATTAAATCGTACTTCGC-3＇SEQID02，
检测探针：5＇标记物-TCGCGTTTTTAGCGTTTAAAGT-3＇标记物SEQID03；
所述OPCML基因目的位点的甲基化特异性引物和探针包括：
正向引物：5＇-CGGGCGGCGTTTATTTTAATTT-3＇SEQID04，
反向引物：5＇-GCTAACGCGAATCGAAACGAA-3＇SEQID05，
检测探针：5＇标记物-CGTCGCTTATCGGGTTGGGGATGTTT-3＇标记物SEQID06；
所述RUNX3基因目的位点的甲基化特异性引物和探针包括：
正向引物：5＇-TTCGCGGAGGGTTTTAGTGT-3＇SEQID07，
反向引物：5＇-CGACAAAACCCTTCCGTAA-3＇SEQID08，
检测探针：5＇标记物-AGTTTAGGGTTCGAGAGTTTTGGGAGTTCG-3＇标记物SEQID09；
所述TFPI2基因目的位点的甲基化特异性引物和探针包括：
正向引物：5＇-GTTCGTTGGTAAGGCGTTC-3＇SEQID10，
反向引物：5＇-ATAAAAGAACCCCGAACCG-3＇SEQID11，
检测探针：5＇标记物-AGCGTTGCGGGAGGAGGTGC-3＇标记物SEQID12；
所述ACTB内参基因特异性引物和探针包括：
正向引物：5＇-GTGATGGAGAGTTTAGTAAGTT-3＇SEQID13，
反向引物：5＇-GCACTCTTCCAAACGAAACG-3＇SEQID14，
检测探针：5＇标记物-ACCACCACCACACACAATAACAAACACA-3＇标记物S...

【专利技术属性】
技术研发人员：谷红仓，钱飞箭，王云飞，车仙荣，
申请(专利权)人：杭州圣庭医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33