融合蛋白及其应用制造技术

技术编号:29417190 阅读:27 留言:0更新日期:2021-07-23 23:06
提出了融合蛋白及其获得方法和应用、分离的核酸分子、构建体以及重组细胞,所述融合蛋白包括:第一片段,所述第一片段具有T4DNA连接酶活性;以及第二片段,所述第一片段的一端与所述第二片段的一端相连,所述第二片段具有DNA结合结构域。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】融合蛋白及其应用
本专利技术涉及生物领域。具体地,本专利技术涉及融合蛋白及其应用。更具体地,本专利技术涉及融合蛋白及其获得方法和应用、分离的核酸分子、构建体以及重组细胞。
技术介绍
DNA连接酶是一类可以催化两个DNA或者RNA片段之间形成磷酸二酯键的重要分子生物学工具酶。根据连接酶催化的核酸底物构象的不同,连接反应包括缺口连接(Nickligation)、粘性末端连接(Cohesiveendligation)、TA连接(TAligation)、平末端连接(Bluntendligation)及分支连接(Branchligation),其中TA连接和平末端连接在建库接头连接中应用较广,但是效率较低。DNA连接酶的来源多种多样,几乎覆盖了所有物种,其中来源于T4噬菌体的T4DNA连接酶以其独特而显著的平末端或者TA末端连接活性成为了分子克隆、核酸修饰、测序建库中无可替代的一种酶。基于平末端或者TA末端的接头连接是NGS建库中不可缺少的关键步骤,其效率直接影响了后续测序结果的覆盖度和效率。同时,接头连接反应的反应体系也对上下游的操作有较大影响,可以决本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种融合蛋白,其特征在于,包括:/n第一片段,所述第一片段具有T4DNA连接酶活性;以及/n第二片段,所述第一片段的一端与所述第二片段的一端相连,所述第二片段具有DNA结合结构域。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】一种融合蛋白,其特征在于,包括:
第一片段,所述第一片段具有T4DNA连接酶活性;以及
第二片段,所述第一片段的一端与所述第二片段的一端相连,所述第二片段具有DNA结合结构域。


根据权利要求1所述的融合蛋白,其特征在于,所述第二片段具有Sso7dDNA结合蛋白活性或者NFκBp50蛋白活性。


根据权利要求1所述的融合蛋白,其特征在于,所述第一片段具有SEQIDNO:1所示的氨基酸序列。


根据权利要求1所述的融合蛋白,其特征在于,所述第二片段具有SEQIDNO:2所示的氨基酸序列或者SEQIDNO:3所示的氨基酸序列。


根据权利要求1所述的融合蛋白,其特征在于,进一步包括纯化片段和/或筛选片段。


根据权利要求5所述的融合蛋白,其特征在于,所述纯化片段选自His和Flag标签的至少一种。


根据权利要求5所述的融合蛋白,其特征在于,所述筛选片段具有卡那霉素抗性和/或氨苄青霉素抗性。


根据权利要求1所述的融合蛋白,其特征在于,具有SEQIDNO:4或5所示的氨基酸序列。


一种分离的核酸分子,其特征在于,所述分离的核酸分子编...

【专利技术属性】
技术研发人员:王琦郭斐郭苗苗李敬郑越董宇亮章文蔚徐崇钧
申请(专利权)人:深圳华大生命科学研究院
类型:发明
国别省市:广东;44

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