一种高免疫原性的多肽二价抗原蛋白及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种高免疫原性的多肽二价抗原蛋白及其制备方法和应用。本发明专利技术通过将两个相同的抗原肽X通过连接肽尾首连接获得的二价重组抗原蛋白；其中，所述抗原肽X为包含抗原表位的短肽，所述短肽由6‑15个氨基酸组成；所述连接肽为(AP)nA，连接方式为X‑(AP)nA‑X，其中，n＝3、4、5、6或7。试验证明，本申请提供的多肽二价抗原蛋白免疫原性显著增强，无需偶联载体蛋白即可刺激动物体产生针对多肽的特异性抗体，这说明二价抗原在B细胞的激活过程中是必要的，为快速制备6×His‑Tag的单克隆抗体及类似多肽的单克隆抗体及短肽相关序列的免疫评价奠定基础。

【技术实现步骤摘要】
一种高免疫原性的多肽二价抗原蛋白及其制备方法和应用
本专利技术属于免疫学
，具体涉及一种高免疫原性的多肽二价抗原蛋白及其制备方法和应用。
技术介绍
组氨酸标签(His-tag)，由六个His残基组成(HHHHHH)，其分子量小，基本对目的蛋白本身特性几乎没有影响，不会改变目的蛋白本身的可溶性和生物学功能，在融合蛋白结晶后对蛋白的结构没有影响；His-Tag的免疫原性相对较低，可将纯化的蛋白直接注射入动物体内进行免疫并制备抗体；更重要的是它使蛋白质的纯化变得极为方便，根据组氨酸上的咪唑环可以与二价金属离子结合的原理，人们可以利用金属离子亲和层析技术纯化带有His标签的蛋白。因此，His-tag是最常用的一种蛋白表达标签，插入在目的蛋白的C末端或N末端均可，另外该标签也可以和其它的亲和标签一起构建双亲和标签使用，便于目的蛋白的纯化和检测。因为His-Tag的免疫原性相对较低，以实验小鼠为宿主制备的His标签单抗的通常制备方法是：人工合成6*His多肽，必要时在末端添加偶联载体用到的特殊氨基酸。合成好此多肽后，通过化学方法将此多肽与载体本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种高免疫原性的多肽二价抗原蛋白，其特征在于，将两个相同的抗原肽X通过连接肽尾首连接获得的二价重组抗原蛋白；所述抗原肽X为包含抗原表位的短肽，所述短肽由6-15个氨基酸组成；所述连接肽为(AP)nA，连接方式为X-(AP)nA-X，其中，n＝3、4、5、6或7。/n

【技术特征摘要】
20200814 CN 20201081890171.一种高免疫原性的多肽二价抗原蛋白，其特征在于，将两个相同的抗原肽X通过连接肽尾首连接获得的二价重组抗原蛋白；所述抗原肽X为包含抗原表位的短肽，所述短肽由6-15个氨基酸组成；所述连接肽为(AP)nA，连接方式为X-(AP)nA-X，其中，n＝3、4、5、6或7。


2.根据权利要求1所述多肽二价抗原蛋白，其特征在于，所述抗原肽X的氨基酸序列为HHHHHH。


3.根据权利要求1所述的多肽二价抗原蛋白，其特征在于，所述抗原肽X包含PCV3Cap蛋白抗原表位140KHSRYFT146，其氨基酸序列为KHSRYFT；所述连接肽为(AP)5A，连接方式为KHSRYFT-(AP)5A-KHSRYFT。


4.根据权利要求1所述的多肽二价抗原蛋白，其特征在于，所述抗原肽X包含PCV3Cap蛋白抗原表位140KHSRYFT146，其氨基酸序列为TSKKKHSRYFTPKPI；所述连接肽为(AP)5A，连接方式为TSKKKHSRYFTPKPI-(AP)5A-TSKKKHSRYFTPKPI。


5.一种高免疫原性的多肽二价抗原蛋白的制备方法，其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈玉梅，张龙现，史平玲，张磊，娄岳，王彦伟，田媛媛，
申请(专利权)人：河南中泽生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：河南;41