抗体偶联物制造技术

本发明专利技术提供一种提高tau蛋白质的免疫学的测定中的灵敏度的技术。具体而言，本发明专利技术提供使2种以上的抗tau蛋白质抗体与载体结合而得到的抗体偶联物等。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抗体偶联物
本专利技术涉及抗体偶联物等。
技术介绍
阿兹海默病(AD)是最一般认知症的一种，其是以遍布大脑皮质、大脑边缘系的神经细胞内的神经原纤维变化，以及细胞外的淀粉样蛋白班的蓄积为组织学特征的神经变性疾病。神经原纤维变化的超微形态，主要由包含异常磷酸化的tau蛋白质(pTau)的双螺旋细丝(PairedHelicalFilaments(PHF))构成。已报告：tau蛋白质(包含磷酸化tau蛋白质)可以用作阿兹海默病等的神经变性疾病的诊断标记物，以及体液中的tau蛋白质的免疫学的测定方法(专利文献1以及2)。现有技术文献专利文献[专利文献1]日本特表平8-502898号公报[专利文献2]日本特表平9-506771号公报
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题体液等样品中的tau蛋白质的免疫学的测定的灵敏度需要进一步提高。解决技术问题的技术手段本专利技术的专利技术人进行深入研究的结果，在免疫学的测定中，发现通过使用使2种以上的抗tau蛋白质抗体与载体结合而得到的抗体偶联物，与使用单个的抗tau蛋白质抗体时相比，tau蛋白质的检出灵敏度提高，从而完成了本专利技术。也就是说，本专利技术如下。〔1〕、一种抗体偶联物，其通过使2种以上的抗tau蛋白质抗体与载体结合而得到。〔2〕、根据〔1〕所述的抗体偶联物，其中，所述2种以上的抗tau蛋白质抗体是2种以上的抗人tau蛋白质抗体。〔3〕、根据〔2〕所述的抗体偶联物，其中，2种以上的抗tau蛋白质抗体包含：第1抗体，其识别存在于序列编号1的氨基酸序列中153位～169位之间的抗原表位；和第2抗体，其识别存在于序列编号1的氨基酸序列中188位～207位之间的抗原表位第2抗体。〔4〕、根据〔3〕所述的抗体偶联物，其中，所述第1抗体识别的抗原表位是PPGQK(序列编号2)，所述第2抗体识别的抗原表位是DRSGYS(序列编号3)。〔5〕、根据〔1〕～〔4〕中任一项所述的抗体偶联物，其中，载体是标记载体。〔6〕、一种试剂盒，其包含：(i)使2种以上的抗tau蛋白质抗体与载体结合而得到的抗体偶联物；以及(ii)与抗体偶联物中所含的抗tau蛋白质抗体相比识别不同的抗原表位的抗tau蛋白质抗体。〔7〕、根据〔6〕所述的试剂盒，其中，所述不同的抗原表位是存在于序列编号1的氨基酸序列中170位～187位之间或209位～233位之间的抗原表位。〔8〕、根据〔7〕所述的试剂盒，其中，所述不同的抗原表位是PPAPKTP(序列编号4)或PPTREPK(序列编号5)。〔9〕、一种tau蛋白质的检出方法，其包括：使用使2种以上的抗tau蛋白质抗体与载体结合而得到的抗体偶联物，检出样品中的tau蛋白质的步骤。〔10〕、根据〔9〕所述的方法，其中，样品是从人采集的体液样品。〔11〕、根据〔9〕或〔10〕所述的方法，其进一步包括使下述抗tau蛋白质抗体与样品接触的步骤，所述抗tau蛋白质抗体与抗体偶联物中所含的抗tau蛋白质抗体相比识别不同的抗原表位。专利技术的效果通过使用本专利技术的抗体偶联物，在夹心免疫分析等的免疫学的测定中，与使用单个的抗tau蛋白质抗体时相比，tau蛋白质的检出灵敏度提高。使用了本专利技术的抗体偶联物进行tau蛋白质的检出，可以用于阿兹海默病等的神经变性疾病的高精度诊断。附图说明[图1]图1是表示使用了杂合偶联物的总tau蛋白质的测定中，基于由各标准溶液的平均计数值和浓度作出的标准曲线而算出的各样品(LoQ1～LoQ5)的浓度和，测定各样品(LoQ1～LoQ5)10次(n＝10)时的计数值的变动系数(CV)的散点图，以及基于精密度图(precisionprofile)求出的定量限界值(LoQ(CV20％))的图。[图2]图2是表示在使用了抗体混合物的总tau蛋白质的测定中，基于由各标准溶液的平均计数值和浓度作出的标准曲线而算出的各样品(LoQ1～LoQ5)的浓度，和将各样品(LoQ1～LoQ5)测定10次(n＝10)时的计数值的变动系数(CV)的散点图，以及基于精密度图求出的定量限界值(LoQ(CV20％))的图。本专利技术的具体实施方式本专利技术提供使2种以上的抗tau蛋白质抗体与载体结合而得到的抗体偶联物(也称为“杂合偶联物”)。tau蛋白质优选人tau蛋白质。人tau蛋白质包含多个的同源异构体，已知有4～6种的同源异构体在成人脑中被检出，而在胎儿期的脑中只有1种同源异构体被检出。这样的同源异构体的多样性，是通过存在于人第17号染色体的一个基因的选择性mRNA拼接产生的。这些同源异构体相互不同的点在于，有无C末端部分中的3个或4个的重复区域和N末端部分中的29个或58个的氨基酸残基的区域的插入。在本说明书中，将tau蛋白质的氨基酸编号，以与序列编号1所示的最长的同源异构体(441氨基酸)对应的氨基酸编号的形式表示。tau蛋白质包含修饰tau蛋白质。作为修饰tau蛋白质，例如，可举出磷酸化tau蛋白质。磷酸化tau蛋白质是指，含有羟基的氨基酸残基(丝氨酸残基、苏氨酸残基、酪氨酸残基)被磷酸化的tau蛋白质。抗tau蛋白质抗体是将tau蛋白质的氨基酸序列的至少一部分作为抗原表位而进行识别的抗体。2种以上的抗tau蛋白质抗体是，例如，可以是2～5种，优选2～4种，更优选2～3种，特别优选2种的抗tau蛋白质抗体。优选2种以上的抗tau蛋白质抗体分别识别tau蛋白质中的不重复的抗原表位。2种以上的抗tau蛋白质抗体，包含第1抗体以及第2抗体。第1抗体识别的抗原表位，在序列编号1的氨基酸序列中，可以优选存在于153位～169位之间，更优选155位～167位之间，进一步更优选157位～165位之间，也可以特别优选为PPGQK(159位～163位之间，序列编号2)。第2抗体识别的抗原表位，在序列编号1的氨基酸序列中，可以优选存在于188位～207位之间，更优选190位～204位之间，进一步更优选192位～201位之间，也可以特别优选为DRSGYS(193位～198位之间，序列编号3)。序列编号1的氨基酸序列中第1抗体识别的抗原表位与第2抗体识别的抗原表位之间的氨基酸残基数，例如可以是18个氨基酸以上，优选20个氨基酸以上，更优选22个氨基酸以上，再更优选24个氨基酸以上，特别优选26个氨基酸以上。所述抗原表位间的氨基酸残基数，例如可以是44个氨基酸以下，优选41个氨基酸以下，更优选38个氨基酸以下，再更优选35个氨基酸以下，特别优选33个氨基酸以下。更具体而言，所述抗原表位间的氨基酸残基数，例如可以是18～44个氨基酸，优选20～41个氨基酸，更优选22～38个氨基酸，再更优选24～35个氨基酸，特别优选26～33个氨基酸。2种以上的抗tau蛋白质抗体识别的抗原表位，可以是非修饰肽或修饰肽中的任一种。作为修饰肽，例如本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗体偶联物，其通过使2种以上的抗tau蛋白质抗体与载体结合而得到。/n

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】20181122 JP 2018-2195581.一种抗体偶联物，其通过使2种以上的抗tau蛋白质抗体与载体结合而得到。


2.根据权利要求1所述的抗体偶联物，其中，
所述2种以上的抗tau蛋白质抗体是2种以上的抗人tau蛋白质抗体。


3.根据权利要求2所述的抗体偶联物，其中，
2种以上的抗tau蛋白质抗体包含：第1抗体，其识别存在于序列编号1的氨基酸序列中153位～169位之间的抗原表位；和第2抗体，其识别存在于序列编号1的氨基酸序列中188位～207位之间的抗原表位。


4.根据权利要求3所述的抗体偶联物，其中，
所述第1抗体识别的抗原表位是PPGQK(序列编号2)，所述第2抗体识别的抗原表位是DRSGYS(序列编号3)。


5.根据权利要求1～4中任一项所述的抗体偶联物，其中，
载体是标记载体。


6.一种试剂盒，其包含以下：
(i)使2种以上的...

【专利技术属性】
技术研发人员：G詹尼斯，M道威，石井雄一，冈田凉，
申请(专利权)人：富士瑞必欧株式会社，
类型：发明
国别省市：日本;JP