【技术实现步骤摘要】
一种金针菇FL1980菌种的微卫星DNA标记指纹图谱的鉴定方法及其构建方法与应用
本专利技术属于金针菇菌种的检测
，具体涉及一种金针菇FL1980菌种的微卫星DNA标记指纹图谱的鉴定方法及其构建方法与应用。
技术介绍
金针菇(Flammulinafiliformis)是一种普遍栽培的食用菌，通常分为白色和黄色品种。其栽培历史悠久，生产总量逐年提升，目前已成为我国工厂化食用菌企业中发展速度最快、规模最大的一个品种。我国工厂化栽培金针菇的日产量约占我国食用菌工厂化总产量的47.12％。金针菇营养丰富、味道鲜美且兼具药用价值，不仅富含蛋白质、矿物质和维生素等各种营养成分，而且具有抗肿瘤、增强免疫调节、抗病毒、降血脂、抗疲劳和护肝等多种药用保健作用，深受消费者喜爱。优质菌种在金针菇单产和质量中的贡献率举足轻重。我国的金针菇工厂化栽培菌株以国外选育的首潮产量高、生长周期短和耐储藏的白色菌株为主导。金针菇育种工作相对滞后，也是导致目前国产菌株市场占有率小的原因。但是相对于目前主导的工厂化菌株而言，我国有着丰富的金针...
【技术保护点】
1.一种金针菇FL1980菌种的微卫星DNA标记指纹图谱的鉴定方法，其特征在于：所述指纹图谱由6对微卫星DNA标记组成，具体序列如下：/n
【技术特征摘要】
1.一种金针菇FL1980菌种的微卫星DNA标记指纹图谱的鉴定方法，其特征在于：所述指纹图谱由6对微卫星DNA标记组成，具体序列如下：
相应带型编号组合为：(2+9)/(5+12)/(6+8)/(2+6)/6/(1+3)。
2.权利要求1所述的金针菇FL1980菌种的微卫星DNA标记指纹图谱的构建方法，其特征在于：包括，
(1)菌丝培养：将金针菇菌种转接到马铃薯葡萄糖琼脂固体培养基上，25℃培养5～10d后收集菌丝；
(2)基因组DNA的提取：用TAKARA公司的TaqHotStart扩增试剂盒提取上述菌丝的基因组DNA，紫外分光光度法检测总基因组DNA浓度和纯度，调整样品DNA的浓度一致；
(3)微卫星DNA分子标记的检测：对上述提取的DNA进行基因微卫星DNA标记的PCR扩增；
(4)电泳检测：将上述PCR扩增得到的产物与甲酰胺加样缓冲液混匀，变性，上机检测；
(5)GeneMapper数据分析；找到相应带型编号组合为：(2+9)/(5+12)/(6+8)/(2+6)/6/(1+3)的菌种。
3.根据权利要求2所述的金针菇FL1980菌种的微卫星DNA标记指纹图谱的构建方法，其特征在于：所述步骤(2)基因组DNA的提取，其具体方法包括：
(1)将菌丝样本加入液氮充分研磨；
(2)向研磨好的粉末中迅速加入360μLBufferSTE和40μLBufferSDS，迅速涡旋混匀后，将离心管放在65℃水浴15min，水浴过程中颠倒离心管以混合样本数次；
(3)加入5μLRNaseSolution至裂解液中，涡旋混匀，室温静置15-30min；
(4)加入140μLBufferPS，涡旋震荡30s，冰上放置10min；
(5)室温下，13000g离心5min，小心转移400μL上清液至新的离心管中；
(6)加入600μLBufferPBD至样品中，涡旋混匀30s；
(7)把DNA结合柱装在收集管，转移一半混合液至柱子中，8000g离心1min；
(8)倒弃滤液把柱子装回收集管，转移剩余混合液至柱子中，8000g离心1min；
(9)倒弃滤液把柱子装回收集管，加入600μLBufferGW2至柱子中，8000g离心1min；
(10)重复步骤9；
(11)倒弃滤液把柱子装回收集管，10000g离心2min去除柱子中残留的乙醇；
(12)将柱子转移至新的1.5ml离心管中，加入30μL预热至65℃的BufferAE至柱子的膜中央，室温静置2min，10000g离心1min；
(13)取2μLD...
【专利技术属性】
技术研发人员：吴莹莹，李燕，鲍大鹏，茅文俊，杨瑞恒，陈洪雨，
申请(专利权)人：上海市农业科学院，
类型：发明
国别省市：上海;31
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。