一种类囊体膜与NK细胞的融合细胞及其构建方法技术

本发明专利技术提供了一种类囊体膜与NK细胞的融合细胞及其构建方法，涉及生物学技术领域。类囊体膜与NK细胞的融合细胞的构建方法包括将类囊体纳米囊泡与NK细胞进行融合；其中每4×10

【技术实现步骤摘要】
一种类囊体膜与NK细胞的融合细胞及其构建方法
本专利技术涉及生物学
，尤其是涉及一种类囊体膜与NK细胞的融合细胞及其构建方法。
技术介绍
过继性免疫细胞治疗通过采集人体自身免疫细胞，经过体外培养，使其数量扩增，靶向性杀伤功能增强，然后再回输到患者体内，从而来杀灭血液及组织中的病原体、癌细胞、突变的细胞。过继性免疫细胞治疗已被证实具有克服癌症治疗瓶颈的能力。自然杀伤细胞(NKcell)占血液中的淋巴细胞的10～20％，是免疫监测中最重要的天然免疫细胞之一，已被发现对癌细胞具有快速和有效的免疫。与T细胞和B细胞不同，NK细胞具有通过抑制或激活性细胞表面受体直接靶向癌细胞的能力，可以在没有预先致敏的情况下通过释放穿孔素颗粒酶等细胞因子杀死癌细胞。多项研究证明NK细胞在体内外均具有杀伤肿瘤的能力，并且取决于NK细胞激活受体(例如NKG2D)的表达水平，其可以与在肿瘤细胞表面的过度表达NKG2D配体相结合，从而杀伤肿瘤细胞。尽管NK细胞在控制肿瘤生长方面具有活性，但它们易受肿瘤微环境中(TME)的多种免疫抑制机制的影响。许多与癌症相关的可溶本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种类囊体膜与NK细胞的融合细胞的构建方法，其特征在于，所述方法包括：将类囊体纳米囊泡与NK细胞进行融合；/n其中每4×10

【技术特征摘要】
1.一种类囊体膜与NK细胞的融合细胞的构建方法，其特征在于，所述方法包括：将类囊体纳米囊泡与NK细胞进行融合；
其中每4×106至6×106个NK细胞加入粒径为200-500nm，浓度为5-80μg的类囊体纳米囊泡，通过聚乙二醇对细胞进行诱导融合。


2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述诱导融合包括加入聚乙二醇混匀后孵育5-8min，然后离心弃上清；再加入缓冲液对沉淀进行重悬，二次离心后获得的沉淀为融合细胞。


3.根据权利要求1或权利要求2所述的构建方法，其特征在于，所述聚乙二醇的质量体积比为45％-55％；
优选地，所述聚乙二醇的相对分子量为1600-4000；
优选地，所述聚乙二醇的添加体积为300-800μL。


4.根据权利要求2所述的构建方法，其特征在于，所述离心与二次离心的条件为：室温1000-1200rpm，离心5-10min。


5.根据权利要求2所述的构建方法，其特征在于，所述缓冲液选自以下任一种：PBS或细胞培养液；所述缓冲液的添加体积为2-5mL。


6.根据权利要求2所述的构建方法，...

【专利技术属性】
技术研发人员：谢海燕，雷垚，武广昊，刘厚莉，
申请(专利权)人：北京理工大学，
类型：发明
国别省市：北京;11