本发明专利技术涉及功能微生物筛选与应用技术领域，具体提供了一种新型枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis），并提供了该菌株在畜禽养殖中的应用。所述枯草芽孢杆菌已于2020年11月16日保藏于中国武汉 武汉大学的中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M2020742。该菌株能有效防控常见肠道致病菌和猪流行性腹泻病毒（PEDV），提高饲料利用率，应用前景广泛。泛。
【技术实现步骤摘要】
一种具有抑菌和抗病毒功能的枯草芽孢杆菌及其应用
[0001]本专利技术涉及功能微生物筛选与应用
，具体涉及一种具有抑菌和抗病毒功能的枯草芽孢杆菌及其应用。
技术介绍
[0002]目前饲料工业中应用最广、需求量最大的绿色饲料添加剂是生物酶制剂和微生态制剂。微生态制剂又名益生素、促生素、生菌剂以及活菌剂，是从自然界或动物上分离、鉴定或生物组建的有益微生物，经培养、发酵、干燥、加工等特殊工艺制成。微生态制剂能有效促进动物体调节肠道微生态平衡，增强机体免疫功能，并能高效转化饲料，改善生产性能。
[0003]由多种益生菌复合配制而成复合微生态制剂具有促进生长、调整正常菌群平衡、提高免疫力、提高饲料转化率等多种功效。1989年美国食品及药品管理局公布了可以用作饲料添加剂的微生物种类，共有如下４２种：米曲霉、黑曲霉、凝结芽孢杆菌、迟缓芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、嗜淀粉拟杆菌、多毛拟杆菌、栖瘤胃拟杆菌、产琥珀酸拟杆菌、青春双岐杆菌、动物双岐杆菌、两歧双岐杆菌、婴儿双岐杆菌、长双岐杆菌、嗜热双岐杆菌、嗜酸乳杆菌、短乳杆菌、保加利亚乳杆菌、干酪乳杆菌、纤维二糖乳杆菌、弯曲乳杆菌、德氏乳杆菌、发酵乳杆菌、瑞士乳杆菌、乳酸乳杆菌、胚芽乳杆菌、罗氏乳杆菌、肠膜明串珠菌、乳酸片球菌、啤酒片球菌、戊糖片球菌、费氏丙酸杆菌、谢氏丙酸杆菌、酿酒酵母、乳脂链球菌、双醋酸乳链球菌、粪链球菌、中链球菌、乳链球菌、嗜热链球菌。目前，应用于微生态制剂的菌种主要有乳酸杆菌、链球菌、双歧杆菌、酵母菌、某些芽孢杆菌等。
[0004]我国开始饲用微生态制剂的研究起步于20世纪70年代。1989年我国农业部公布了可以直接饲喂动物的饲料级微生物添加剂菌种12个，即干酪乳杆菌、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、粪链球菌、乳链球菌、枯草芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌、乳酸片菌、沼泽红假单孢菌、啤酒酵母、产假丝酵母、曲霉。2001年又公布地衣芽孢杆菌为可直接使用的菌种。2013年公布的《饲料添加剂品种目录(2013)》中涉及动物养殖与饲料的微生物添加剂已增至30余种。
[0005]针对饲料微生态制品的研究也有大量公开报道，例如，齐情等观察微生态制剂对绿壳蛋鸡生产性能的作用效果，发现微生态制剂可以提高蛋鸡的产蛋率及蛋清浓度，蛋黄颜色没有明显变化；可以提高蛋鸡对粗纤维的分解能力；能够防治绿壳蛋鸡脂肪肝的发生。陈家祥等在肉鸡日粮中添加地衣芽孢杆菌后，结果发现肉鸡日增重显著提高。戴荣国报道，通过对断奶仔猪饲喂酵母菌、乳酸菌及芽孢杆菌复合微生态制剂，能在不同程度上对料重比、平均日增重及腹泻率有所改善。张红艳等研究报道，液体复合微生态制剂可提高断奶仔猪对饲料的利用率，平均日增重较对照组提高41.12%~51.78%。张双等试验结果说明，日粮中添加微生态制剂（100g/头）对奶牛热应激的预防和调节效果明显。高堂亮等研究微生态制剂对肉牛生长性能和血清生化指标的影响，分别饲喂全混合日粮和微生态制剂，结果表明，与对照组相比，平均日增重、平均日采食量显著提高（Ｐ＜0.05），料重比显著降低（Ｐ＜0.05），对血清生化指标没有显著影响（Ｐ＞0.05）。
[0006]随着养殖业规模的扩大，饲料工业得到了迅猛发展。抗生素的滥用引起动物内源
性感染或继发二次感染，耐药菌株的产生，畜禽细胞免疫、体液免疫功能的下降，动物肠道菌群失调以及它们在畜禽产品中的残留等等。基于这些原因，很多国家反对将抗生素过量使用，甚至通过立法对愈来愈多的药物品种加以限制。随着人民对食品安全及畜牧产业的重视程度越来越高，微生态制剂势必会为我国畜牧行业带来良好的经济效益及广阔的发展前景。
技术实现思路
[0007]本专利技术为解决现有技术问题，提供了一种新型枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis），并提供了该菌株在畜禽养殖中的应用。所述枯草芽孢杆菌能有效防控常见肠道致病菌和猪流行性腹泻病毒（PEDV），提高饲料利用率，应用前景广泛。
[0008]本专利技术一方面提供了一株枯草芽孢杆菌DB243（Bacillus subtilis DB243），已于2020年11月16日保藏于中国武汉 武汉大学的中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M2020742。
[0009]本专利技术另一方面提供了一种微生物制剂，包含上述枯草芽孢杆菌DB243。
[0010]所述微生物制剂还包含地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌，凝结芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、丁酸梭菌、屎肠球菌、乳酸菌、粪肠球菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌中的任意一种或多种的组合。
[0011]所述微生物制剂为菌粉。
[0012]所述微生物制剂中枯草芽孢杆菌DB243的活菌量不低于109CFU/g。
[0013]本专利技术还提供了一种饲料添加剂，包含上述微生物制剂。
[0014]所述饲料添加剂还包含酶制剂、中草药、乳化剂、多糖中的任意一种或多种的组合。
[0015]本专利技术还提供了所述饲料添加剂在畜禽养殖中的应用。
[0016]本专利技术所述枯草芽孢杆菌DB243对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌等多种病原菌均具有显著的抑菌效果，尤其是对K88大肠杆菌、O78大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑菌效果最强，抑菌圈直径达到23mm，效果非常显著。该菌株还能有效抑制猪流行性腹泻病毒的复制，具有较强的抗病毒能力，与对照组相比，接种枯草芽孢杆菌DB243上清液的实验组Vero细胞的CT值提高了93.8%，病毒含量显著低于对照组。
[0017]枯草芽孢杆菌DB243对人工胃肠液有很强的耐受性，在人工胃液中1h和2h后的存活率均为100%；在人工肠液中1h和2h后的存活率也均为100%。该菌株能够显著提高饲料利用率，改善仔猪生产性能，并能有效预防仔猪腹泻，提高仔猪的成活率。与对照组相比，饲喂枯草芽孢杆菌DB243菌粉的实验组仔猪的平均日增重提高了22.5%，料肉比降低了15.4%；实验组仔猪的腹泻率和死淘率分别降低了59.9%和76.0%。
[0018]本专利技术提供的枯草芽孢杆菌DB243可单独或与其他微生物、酶制剂、中草药、乳化剂、多糖类进行组合，作为饲料添加剂广泛应用于畜禽养殖，效果显著。
[0019]说明书附图图1为DB243菌株的菌落形态图；图2 为DB243菌株蛋白质谱峰图。
具体实施方式
[0020]下面结合具体实施例进一步阐述本专利技术。对于实施例中所用到的具体方法或材料，本领域技术人员可以在本专利技术技术思路的基础上，根据已有的技术进行常规的替换选择，而不仅限于本专利技术实施例的具体记载。
[0021]本专利技术所选用的设备和试剂可以选自市售任意一种。
[0022]实施例1 菌株的分离与筛选1、样品来源：山东省潍坊市高密养殖场猪的肠道粪便。
[0023]2、菌株分离与筛选：称取1g猪肠道粪便，置于9mL无菌生理盐水中，得到菌悬液；将菌悬液置于80℃水浴锅中，处理10min，取出，迅速冷却；将处理过菌悬液以10倍梯度稀释至合适浓度，取100uL于营养琼本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一株枯草芽孢杆菌，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌的保藏编号为CCTCC NO：M2020742。2.权利要求1所述的枯草芽孢杆菌在畜禽养殖中的应用。3.一种微生物制剂，其特征在于，所述的微生物制剂包含权利要求1所述的枯草芽孢杆菌。4.如权利要求3所述的微生物制剂，其特征在于，所述的微生物制剂还包含地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌，凝结芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、丁酸梭菌、屎肠球菌、乳酸菌、粪肠球菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌中的任意一种或多种的组合。5.如权利要求3...
【专利技术属性】
技术研发人员：凌红丽，彭虹旎，李宁，周英俊，陈琳，梁莉，赵磊，
申请(专利权)人：山东康地恩生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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