一种检测杀螟硫磷的荧光比率型免疫分析方法技术

本发明专利技术提供了一种杀螟硫磷的荧光比率型免疫分析方法。通过在微孔板中包被杀螟硫磷包被原，以杀螟硫磷纳米抗体融合碱性磷酸酶(Nb

【技术实现步骤摘要】
一种检测杀螟硫磷的荧光比率型免疫分析方法


[0001]本专利技术属于免疫检测
，更具体地，涉及了一种检测杀螟硫磷的荧光比率型免疫分析方法。

技术介绍

[0002]农药是指在农业上用于防治病虫及调节植物生长、除草等药剂。杀螟硫磷作为一种常见的有机磷农药，已在蔬菜水果种植中作为杀虫剂得到广泛应用。然而，由于杀螟硫磷的广泛使用和不当处理而造成的农药污染，已对环境和民众健康造成一定的负面影响。杀螟硫磷作为有机磷农药的一种，能够抑制生物体内乙酰胆碱酯酶活性，即使浓度比较低，也会抑制胆碱导致中枢神经传递受损，进一步损害人体健康；长期低浓度积累，也可能会造成致命后果。因此，正确管理和使用农药，准确评价农药污染是保障人体健康、保障食品质量安全的首要要求。传统的采用气相色谱、高效液相色谱、质谱等金标准方法对农产品中的农药残留虽然可以进行高精度测定痕量的农药残留，但是这些方法对仪器设备的要求高、耗时长，且需要比较专业的操作技巧，限制了其现场的应用，因此，开发出快速、简便、选择性检测杀螟硫磷的替代方法具有重要意义。
[0003]基于抗原抗体特异性结合反本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测杀螟硫磷的荧光比率型免疫分析方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.壳聚糖修饰的铂纳米颗粒的合成：将壳聚糖先溶解于醋酸缓冲液中，在搅拌条件下，往壳聚糖溶液中滴加H2PtCl6溶液，混合后室温搅拌一定时间，随后加入新制的NaBH4溶液，继续室温搅拌，获得Ch
‑
Pt NPs，储存备用；S2.微孔板的包被：将杀螟硫磷包被原加入微孔板中，温育一段时间，随后洗去包被液；将板拍干，加入一定体积封闭液，温育一段时间后，将板拍干，于烘箱中烘干，储存备用；S3.标准曲线的建立：将不同浓度的杀螟硫磷标准溶液与抗体同时加入步骤S2得到的微孔板中，温育一定时间后，洗板，加入AAP溶液温育，随后加入步骤S1制备的Ch
‑
Pt NPs和OPD溶液，温育，测定在360nm激发下，记录400～650nm范围内的荧光发射光谱，计算荧光强度比值I
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/I
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和(I
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/I
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)/(I
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/I
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)0，其中，(I
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/I
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)0指杀螟硫磷浓度为0时的荧光强度峰比值，以杀螟硫磷浓度为横坐标，(I
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/I
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)/(I
430
/I
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)0为纵坐标绘制标准曲线；S4.样品中杀螟硫磷浓度的测定：将等体积处理好的样品替代杀螟硫磷标准品溶液，按照步骤S3的步骤操作，将测到的(I
430
/I
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)/(I
430
/I
568...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗林，吴卓裕，徐振林，王弘，孙远明，沈玉栋，雷红涛，
申请(专利权)人：华南农业大学，
类型：发明
国别省市：