一种核桃仁多肽及其制备方法技术

本发明专利技术属于多肽制备技术领域，具体公开了一种核桃仁多肽及其制备方法。本发明专利技术通过超声波辅助复合酶提取核桃仁多肽的方法，有效地提高核桃仁多肽的提取率，同时通过核桃仁多肽与壳聚糖溶液、离子型交联剂间的反应，将核桃仁多肽制备成微粒，能够有效地掩盖核桃仁多肽酶解过程中存在的苦味，抑制微生物的生长，并且能够提高对核桃仁多肽的载量，进一步增强核桃仁多肽的作用效果，拓宽其应用范围。

【技术实现步骤摘要】
一种核桃仁多肽及其制备方法
本专利技术属于多肽制备
，涉及一种核桃仁多肽及其制备方法。
技术介绍
我国核桃资源非常丰富，产量居世界之首，核桃食用价值很高，保健功能非常突出。核桃仁的蛋白质含量为14％～17％，其中含人体所需的8种必需氨基酸接近联合国粮农组织(FAO)和世界卫生组织(WHO)规定的标准，是一种很好的植物蛋白。核桃所含的核桃蛋白是一种极优质的植物蛋白，除用于初级食品的制作外，还可作为食品基料或食品添加剂使用，应用前景广阔。目前，具有高附加值的核桃多肽已成为核桃蛋白的主要加工方向之一。生物活性肽是现今研究的热点活性物质之一，具有多种生理活性，而且与其它蛋白质类药物相比，它被机体吸收的效率更高，因此受到越来越多的关注。目前核桃多肽生产主要以脱油核桃粕为原料，利用化学法或酶法降解而成。酶法与传统酸法、碱法加工相比，具有不可比拟优点，如不会有任何有害残留物质，具有高度专一性和高效性，酶制剂用量小，反应条件温和，营养成分损失少，易操作，能耗低等，但酶法提取时间长，易生微生物，且酶解之后会产生苦味，所以亟需开发出一种能够有效地提取保存核桃多肽的方法。专利文献CN103468773A公开了一种核桃仁多肽的提取方法，包括以下步骤：(1)球磨粉碎：取脱油核桃粉，加入水，并加木瓜蛋白酶，采用球磨机对脱油核桃粉进行湿法粉碎得到超细粉体悬浊液；(2)酶水解：将悬浊液与球罐分离，向溶液中补充水，调整pH至6.0-7.0，继续加入木瓜蛋白酶，在55-65℃条件下，超声波处理20-30min，之后60℃条件下搅拌酶水解10-30min后离心即得。该专利技术通过将球磨超微粉碎、超声提取、木瓜蛋白酶酶解三者联合，对脱油核桃粉进行超微粉碎，颗粒细化，细胞破碎，蛋白质等大分子物质暴露溶解释放，超声处理进一步促使核桃蛋白从破碎的细胞中释放溶解，使多肽转化率大幅度提高。专利文献CN103652314A公开了一种微囊化核桃肽及其制备方法，该微囊化核桃肽以冷榨核桃粕为原料，经酶解后包埋而得，所述的包埋壁材是质量比为1：0.1-5的羧甲基纤维素钠和β-环糊精。本专利技术制备的微囊化核桃肽蛋白质含量≥85％、肽含量≥80％、黄曲霉素B1≤4.0ug/kg。并且，本专利技术的制备方法操作简单，所生产的核桃肽具有溶解性好，稳定性高的特点。
技术实现思路
本专利技术技术主要提供一种核桃仁多肽，通过超声波辅助复合酶提取核桃仁多肽的方法能够有效地提高核桃仁多肽的提取率，同时通过将核桃仁多肽与壳聚糖溶液、离子型交联剂进行反应，将核桃仁多肽制备成微粒，能够有效地掩盖核桃仁多肽存在的苦味，抑制微生物的生长，提高对核桃仁多肽的载量，进一步增强核桃仁多肽的作用效果，拓宽其应用范围。本专利技术是通过以下技术方案以实现上述目的：一种核桃仁多肽的制备方法，包括以下步骤：S1、核桃仁浸泡后，去皮、均浆10～30min，调节pH值为7～8，利用超声波辅助搅拌，浸泡过夜后离心，去油层和下层沉淀，调节pH值为4～5，搅拌静置后离心，取沉淀层水洗至中性，在真空干燥箱中冷冻干燥，制得核桃蛋白粉；S2、将步骤S1制得的核桃蛋白粉在复合酶的作用下进行酶解，得到酶解产物；S3、将步骤S2得到的酶解产物进行沸水浴灭酶5～15min，之后进行离心，得到酶解液，利用凝胶电泳法对核桃仁多肽进行分离纯化，即得核桃仁多肽初产物；S4、称取配方量的壳聚糖溶于水中形成壳聚糖溶液，之后加入配方量步骤S3制备得到的核桃仁多肽初产物和离子型交联剂，在室温下进行搅拌，然后将得到的产物进行离心，冷冻干燥，最终得到核桃仁多肽。优选地，所述步骤S1中超声波辅助搅拌时间为1～2h，浸泡过夜后离心时间为0.5～1.5h，搅拌静置后离心时间为0.5～1h。优选地，所述步骤S2中所述复合酶为碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和Protamex酶。优选地，所述复合酶的重量为核桃饼粕的1％～5％。优选地，所述酶解过程中的酶解温度为45～55℃，酶解时间为30～60min。优选地，所述离子型交联剂为三聚磷酸钠。优选地，所述核桃仁多肽初产物、壳聚糖与离子型交联剂的重量份数之比为(2～3)：(3～6)：1。进一步地，所述核桃仁多肽初产物、壳聚糖与离子型交联剂的重量份数之比为2：4：1。相应地，本专利技术还请求保护上述核桃仁多肽制备方法所制得的核桃仁多肽。因此，与现有技术相比，本专利技术的优势在于：(1)在本专利技术中，通过超声波辅助复合酶酶解的提取方法，有效地提高了对核桃仁多肽的提取率，并且通过凝胶电泳法使得最终能够得到较纯净的核桃仁多肽。(2)本专利技术以壳聚糖作为载体，三聚磷酸钠为交联剂，通过壳聚糖中带正电的基团与三聚磷酸钠中带负电的基团间的静电作用相互吸引，使壳聚糖长链团聚形成纳米粒，之后将核桃仁多肽承载于纳米粒中，制备得到核桃仁多肽，该核桃仁多肽能够有效解决蛋白质酶解过程中产生苦味的问题，同时提高对核桃仁多肽的载量，增强核桃仁多肽的抗氧化作用，进一步拓宽其应用范围。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例1、本专利技术核桃仁多肽及其制备方法配方：碱性蛋白酶10g、木瓜蛋白酶10g、Protamex酶10g、核桃仁多肽初产物10g、壳聚糖15g和三聚磷酸钠5g。制备方法：S1、核桃仁浸泡后，去皮、均浆10min，调节pH值为7，利用超声波辅助搅拌1h，浸泡过夜后离心0.5h，去油层和下层沉淀，调节pH值为4，搅拌静置后离心0.5h，取沉淀层水洗至中性，在真空干燥箱中冷冻干燥，制得核桃蛋白粉；S2、将步骤S1制得的核桃蛋白粉在复合酶的作用下进行酶解，酶解温度为45℃，酶解时间为30min，得到酶解产物；S3、将步骤S2得到的酶解产物进行沸水浴灭酶5min，之后进行离心，得到酶解液，利用凝胶电泳法对核桃仁多肽进行分离纯化，即得核桃仁多肽初产物；S4、称取配方量的壳聚糖溶于水中形成壳聚糖溶液，之后加入配方量步骤S3制备得到的核桃仁多肽初产物和三聚磷酸钠，在室温下进行搅拌，然后将得到的产物进行离心，冷冻干燥，最终得到核桃仁多肽。实施例2、本专利技术核桃仁多肽及其制备方法配方：碱性蛋白酶10g、木瓜蛋白酶5g、Protamex酶15g、核桃仁多肽初产物10g、壳聚糖20g和三聚磷酸钠5g。制备方法：S1、核桃仁浸泡后，去皮、均浆20min，调节pH值为8，利用超声波辅助搅拌1.5h，浸泡过夜后离心1h，去油层和下层沉淀，调节pH值为5，搅拌静置后离心0.75h，取沉淀层水洗至中性，在真空干燥箱中冷冻干燥，制得核桃蛋白粉；S2、将步骤S1制得的核桃蛋白粉在复合酶的作用下进行酶解，酶解温度为50℃，酶解时间为45min，得到酶解产物；...

【技术保护点】
1.一种核桃仁多肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：/nS1、核桃仁浸泡后，去皮、均浆10～30min，调节pH值为7～8，利用超声波辅助搅拌，浸泡过夜后离心，去油层和下层沉淀，调节pH值为4～5，搅拌静置后离心，取沉淀层水洗至中性，在真空干燥箱中冷冻干燥，制得核桃蛋白粉；/nS2、将步骤S1制得的核桃蛋白粉在复合酶的作用下进行酶解，得到酶解产物；/nS3、将步骤S2得到的酶解产物进行沸水浴灭酶5～15min，之后进行离心，得到酶解液，利用凝胶电泳法对核桃仁多肽进行分离纯化，即得核桃仁多肽初产物；/nS4、称取配方量的壳聚糖溶于水中形成壳聚糖溶液，之后加入配方量步骤S3制备得到的核桃仁多肽初产物和离子型交联剂，在室温下进行搅拌，然后将得到的产物进行离心，冷冻干燥，最终得到核桃仁多肽。/n

【技术特征摘要】
1.一种核桃仁多肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、核桃仁浸泡后，去皮、均浆10～30min，调节pH值为7～8，利用超声波辅助搅拌，浸泡过夜后离心，去油层和下层沉淀，调节pH值为4～5，搅拌静置后离心，取沉淀层水洗至中性，在真空干燥箱中冷冻干燥，制得核桃蛋白粉；
S2、将步骤S1制得的核桃蛋白粉在复合酶的作用下进行酶解，得到酶解产物；
S3、将步骤S2得到的酶解产物进行沸水浴灭酶5～15min，之后进行离心，得到酶解液，利用凝胶电泳法对核桃仁多肽进行分离纯化，即得核桃仁多肽初产物；
S4、称取配方量的壳聚糖溶于水中形成壳聚糖溶液，之后加入配方量步骤S3制备得到的核桃仁多肽初产物和离子型交联剂，在室温下进行搅拌，然后将得到的产物进行离心，冷冻干燥，最终得到核桃仁多肽。


2.如权利要求1所述的核桃仁多肽的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中超声波辅助搅拌时间为1～2h，浸泡过夜后离心时间为0.5～1.5h，搅拌静置后离心时间为0.5～1h。

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【专利技术属性】
技术研发人员：王中振，谢涛，谢骞，刘家生，
申请(专利权)人：广州市金龟寿药品有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44