【技术实现步骤摘要】
一种应用鸡法氏囊原代细胞培养禽脑脊髓炎病毒的方法
本专利技术创造属于生物
，尤其是涉及一种应用鸡法氏囊原代细胞培养禽脑脊髓炎病毒的方法。
技术介绍
禽脑脊髓炎又称流行性震颤，是由小RNA病毒科肠道病毒属的禽脑脊髓炎病毒引起的。该病主要危害4周龄以下雏鸡，引起雏鸡共济失调，头颈部快速振颤，产蛋鸡产蛋一过性下降且孵育后代发病等，给养禽业造成严重经济损失。禽脑脊髓炎病毒目前多采用卵黄囊接种6日龄SPF鸡胚进行增殖，该方法可保证病毒滴度，但培养时间长，收获工艺繁琐，鸡胚质量不易控制，成本高等缺点给规模生产带来不便。部分文献报道该病毒可在鸡胚成纤维细胞，鸡肾细胞，鸡胚脑神经细胞上生长，但生长过程中不产生细胞病变且增殖后病毒滴度低，亦不利于规模化培养。因此，选取适于禽脑脊髓炎病毒增殖的细胞，不仅可提高病毒滴度且生产过程易于控制，培养时间短，成本低，有利于禽脑脊髓炎病毒的规模培养。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术创造旨在克服现有技术中的缺陷，提出一种应用鸡法氏囊原代细胞培养禽脑脊髓炎病毒的方法。
【技术保护点】
1.一种培养禽脑脊髓炎病毒的方法，其特征在于：所述方法中应用鸡法氏囊原代细胞作为体外培养体系，将鸡法氏囊组织按照组织细胞原代培养方法制备培养成原代细胞，向鸡法氏囊原代细胞接种预先制备的禽脑脊髓炎病毒种毒进行培养，接入后收获时经冻融即得禽脑脊髓炎病毒，制得的禽脑脊髓炎病毒的滴度达到10
【技术特征摘要】
1.一种培养禽脑脊髓炎病毒的方法，其特征在于：所述方法中应用鸡法氏囊原代细胞作为体外培养体系，将鸡法氏囊组织按照组织细胞原代培养方法制备培养成原代细胞，向鸡法氏囊原代细胞接种预先制备的禽脑脊髓炎病毒种毒进行培养，接入后收获时经冻融即得禽脑脊髓炎病毒，制得的禽脑脊髓炎病毒的滴度达到106.5～7.0EID50/0.2mL。
2.根据权利要求1所述的培养禽脑脊髓炎病毒的方法，其特征在于：培养禽脑脊髓炎病毒过程中的细胞培养浓度为1×106/mL～6×106/mL，细胞维持液血清浓度为1％～3％。
3.根据权利要求1所述的培养禽脑脊髓炎病毒的方法，其特征在于：培养禽脑脊髓炎病毒过程中的细胞培养浓度为2×106/mL～4×106/mL，细胞维持液血清浓度为2％～3％。
4.根据权利要求1所述的培养禽脑脊髓炎病毒的方法，其特征在于：所述禽脑脊髓炎病毒种毒的接种量为3％～9％。
5.根据权利要求1所述的培养禽脑脊髓炎病毒的方法，其特征在于：所述禽脑脊髓炎病毒种毒的接种量为5％～7％。
6.根据权利要求1所述的培养禽脑脊髓炎病毒的方法，其特征在于：病毒收获时间为接种后1d～9d。
7.根据权利要求1所述的培养禽脑脊髓炎病毒的方法，其特征在于：病毒收获时间为接种后3d～7d。
8.根据权...
【专利技术属性】
技术研发人员：李守军，范莉莉，唐荣宏，王显兵，王冬雪，厚华艳，车艳杰，
申请(专利权)人：天津瑞普生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：天津;12
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