细胞规模化培养方法及所使用的微载体技术

本申请公开一种微载体，其包括凝胶分子和外基质分子，所述凝胶分子和外基质分子混合之后诱导进行凝胶化反应，生成水凝胶微载体；其中，所述凝胶分子为海藻酸钠或海藻酸钙，所述外基质分子为胶原蛋白、基质胶蛋白、硫酸软骨素、纤连蛋白和壳聚糖中的一种或一种以上的组合。本申请中的微载体的主要成分含有海藻酸钙复合材料。该材料的最大优势是在钙离子螯合剂存在下，材料易于膨胀变形，从而降低了材料与细胞之间的接触面积，细胞在轻微的物理剪切力下，即可脱落，实现细胞与微载体分离。整个过程不需要胰酶参与，即可实现细胞分离。

【技术实现步骤摘要】
细胞规模化培养方法及所使用的微载体
本申请涉及一种细胞培养
，尤其涉及一种细胞规模化培养方法及所使用的微载体。
技术介绍
伴随干细胞技术的发展，细胞治疗为许多重大疾病如肿瘤、肝肾器官衰竭、神经-内分泌系统疾病如帕金森、糖尿病等的根治提供了可能。但作为临床植入的细胞产品在制备过程中要避免各种蛋白、酶的引入，给细胞规模化培养工作带来了困难。尤其针对贴壁依赖型细胞的规模化培养，尚需胰酶消化来收集培养好的细胞，胰酶的引入增加了后续细胞产品纯化的工艺流程，增加了产品的生产成本。
技术实现思路
本申请的目的是，克服现有技术的不足，提供一种无需胰酶消化的细胞规模化培养方法，以及实现该培养方法的微载体。为达到以上技术目的，本申请采用的技术方案如下：第一方面，是一种微载体，其包括凝胶分子和外基质分子，所述凝胶分子和外基质分子混合之后诱导进行凝胶化反应，生成水凝胶微载体；其中，所述凝胶分子为海藻酸钠或海藻酸钙，所述外基质分子为胶原蛋白、基质胶蛋白、硫酸软骨素、纤连蛋白和壳聚糖中的一种或一种以上的组合。<br>所述水凝胶微载本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种微载体，其特征在于，其包括凝胶分子和外基质分子，所述凝胶分子和外基质分子混合之后诱导进行凝胶化反应，生成水凝胶微载体；其中，所述凝胶分子为海藻酸钠或海藻酸钙，所述外基质分子为胶原蛋白、基质胶蛋白、硫酸软骨素、纤连蛋白和壳聚糖中的一种或一种以上的组合。/n

【技术特征摘要】
1.一种微载体，其特征在于，其包括凝胶分子和外基质分子，所述凝胶分子和外基质分子混合之后诱导进行凝胶化反应，生成水凝胶微载体；其中，所述凝胶分子为海藻酸钠或海藻酸钙，所述外基质分子为胶原蛋白、基质胶蛋白、硫酸软骨素、纤连蛋白和壳聚糖中的一种或一种以上的组合。


2.如权利要求1所述的微载体，其特征在于，所述水凝胶微载体的干燥粉剂浸泡在含钠离子和钙离子螯合剂的溶液中会膨胀变形。


3.如权利要求2所述的微载体，其特征在于，所述钙离子螯合剂为磷酸根、碳酸根、碳酸氢根、柠檬酸根或EDTA中的任意一种。


4.一种微载体的制备方法，用于制备如权利要求1～3任意一项所述的微载体，其特征在于，其包括如下步骤：
分别配制凝胶分子溶液和外基质分子溶液；
将碳酸钙粉末与所述凝胶分子溶液混合，再与所述外基质分子溶液混合形成预混液；
通过流体颗粒化技术促进所述预混液发生凝胶化反应，生成水凝胶微载体；
对所述水凝胶微载体进行干燥和灭菌处理，得到微载体的干燥粉剂。


5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述凝胶分子溶液的浓度为10～50g/L，所述外基质分子溶液的浓度为1～50g/L。


6.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述预混液中的所述凝胶分子溶液的浓度在10g/L以上。


7.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述流体颗粒化技术选用高压静电场技术、气体锐孔喷雾技术、微流控技术或乳化技术中的任意一种。


8.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述生成水凝胶微载体之后，再加入1～10g/L的壳聚糖溶液中，进行聚电解质络合反应，生成具有壳核结构的水凝胶微载体。


9.如权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述水凝胶微载体与壳聚糖溶液的体积比为1：2～10；所...

【专利技术属性】
技术研发人员：于炜婷，郑国爽，高毅，彭青，李阳，
申请(专利权)人：南方医科大学珠江医院，
类型：发明
国别省市：广东;44