一种细胞外囊泡磁性印迹材料及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种细胞外囊泡磁性印迹材料及其制备方法与应用，该磁性印迹材料包括磁性颗粒基体，磁性颗粒基体表面具有细胞外囊泡印记；该磁性印迹材料的制备方法包括以下步骤：(1)制备磁性颗粒并进行表面官能团修饰；(2)将模板细胞外囊泡连接在磁性颗粒表面；(3)在磁性颗粒表面沿着细胞外囊泡生长出聚合物识别层；(4)超声清洗除去模板囊泡，得到表面具有细胞外囊泡印记的磁性印迹材料；该磁性印迹材料能够应用在体外分离细胞外囊泡。该磁性印迹材料能够高效地从细胞培养基、血浆及其他体液中捕获分离细胞外囊泡，捕获效率高，制备过程简单、产量大、成本低，使用方便、易于保存、无需大型仪器辅助，能够回收重复利用，可进一步降低成本。

【技术实现步骤摘要】
一种细胞外囊泡磁性印迹材料及其制备方法与应用
本专利技术涉及一种印迹材料及其制备方法与应用，更具体地，涉及一种细胞外囊泡磁性印迹材料及其制备方法与应用。
技术介绍
细胞外囊泡(EVs)是一种由磷脂双分子层膜包裹的，直径介于30-200nm的细胞外囊泡，包括肿瘤细胞、内皮细胞、免疫细胞、血小板等多种细胞均可分泌。近年来，越来越多的研究表明，细胞外囊泡作为体内细胞间远程通信的一种手段，内包含丰富的DNA、RNA和蛋白质等物质。尤其对肿瘤细胞分泌的细胞外囊泡而言，其中包含多种癌症特异性的蛋白质及核苷酸(mRNA，microRNA，以及DNA片段)，可作为癌症诊断、预测和治疗监测的循环生物标志物。然而，目前还没有标准有效的方法可以获得高纯度、高产量的细胞外囊泡。现有的获取方法有超速离心法、超滤和尺寸排阻色谱法、聚乙二醇沉淀法和免疫磁珠分离法，其中超速离心法是目前最常用的细胞外囊泡分离方法，可以处理较大量的样本并获得相对纯净的细胞外囊泡，但其耗时较长、仪器要求较高和较低的回收率，使得超高速离心法的使用范围得到限制；超滤和尺寸排阻色谱法处理样品体积过大，不本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种细胞外囊泡磁性印迹材料，其特征在于，包括磁性颗粒，所述磁性颗粒表面具有细胞外囊泡印记。/n

【技术特征摘要】
1.一种细胞外囊泡磁性印迹材料，其特征在于，包括磁性颗粒，所述磁性颗粒表面具有细胞外囊泡印记。


2.根据权利要求1所述的细胞外囊泡磁性印迹材料，其特征在于，所述磁性颗粒为Fe3O4@SiO2磁性颗粒，所述磁性颗粒粒径为450～600nm。


3.一种权利要求1所述的细胞外囊泡磁性印迹材料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)制备磁性颗粒并进行表面官能团化；
(2)将模板细胞外囊泡连接在磁性颗粒表面；
(3)通过硅氧烷聚合反应，在磁性颗粒表面沿着胞外囊泡生长出聚合物识别层；
(4)超声清洗除去磁性颗粒表面的模板细胞外囊泡，得到具有细胞外囊泡印记的细胞外囊泡磁性印迹材料。


4.根据权利要求3所述的细胞外囊泡磁性印迹材料的制备方法，其特征在于，所述步骤1中对磁性颗粒进行表面功能化时先将磁性颗粒在水中分散为1～2mg/mL的溶液，再加入体积分数为1％-5％的功能化硅烷试剂得到混合溶液，使其在室温下反应。


5.根据权利要求3所述的细胞外囊泡磁性印迹材料的制备方法，其特征在于，所述步骤2中通过共价键将模板细胞外囊泡连接在磁性颗粒表面，包括以下步骤：
(21)活化磁珠表面氨基或者磁性颗粒表面羧基，得到活化后的磁性颗粒；
(22)超速离心纯化得到细胞外囊泡，将细胞外囊泡与活化后的磁性颗粒在缓冲溶液中反应，得到表面连接有细胞外囊泡的磁性颗粒复合物，其中，细胞外囊泡和磁性颗粒的质量比为0.5～5μg：1...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋玉君，杨婧婧，
申请(专利权)人：南京大学，
类型：发明
国别省市：江苏;32