一种ES2肽的无抗凝活性肝素化修饰并联合紫杉醇的结合物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供一种ES2肽的无抗凝活性肝素化修饰并联合紫杉醇的结合物及其制备方法和应用，属于生物医药技术领域。本发明专利技术通过控制相关工艺条件，可以制备得到不同结合度的PTX‑无抗凝活性肝素～CYS‑ES2肽结合物。制备得到的ES2肽的无抗凝活性肝素化修饰并联合紫杉醇的结合物与ES2肽相比，保留了ES2肽抗新生血管生成与抗肿瘤活性，整合了肝素和紫杉醇的抗肿瘤等，使其具有更高的稳定性、亲水性、靶向性等特性，因此具有更好的使用效果和应用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种ES2肽的无抗凝活性肝素化修饰并联合紫杉醇的结合物及其制备方法和应用
本专利技术属于生物医药
，具体涉及一种ES2肽的无抗凝活性肝素化修饰并联合紫杉醇的结合物及其制备方法和应用。
技术介绍
公开该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。内皮抑素(Endostatin,ES)是目前最有效的内源性新生血管生成抑制剂之一，能够有效的抑制机体内的病理性的新生血管的生成过程，具有广谱的抗肿瘤能力，且没有明显的毒性作用。国内外研究学者经过多年努力，发现ES具有自身独特的抗血管生成和抗肿瘤活性。2005年9月，国家食品药品监督管理局批准了国产新型重组人血管内皮抑素(Endostar，恩度)在国内上市，将其联合化疗药物用于晚期非小细胞肺癌的治疗。ES2(IVRRADRAAVP，SEQIDNO.1)是ES中的一段由11个氨基酸组成的多肽序列，包含ES中的氨基酸60-70序列和三个表面暴露的精氨酸残基Arg62，Arg63和本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种ES2肽的无抗凝活性肝素化修饰物，其特征在于，其由胱胺中的氨基通过酰胺化反应与无抗凝活性肝素中的羧基相连后ES2肽的羧基再次通过酰胺化反应与胱胺中游离的氨基结合而成，结构式如下：/nGSHP～CYS-(ES2)n；/n式中，n＝1～10；GSHP的分子量为3000～8000Da。/n

【技术特征摘要】
1.一种ES2肽的无抗凝活性肝素化修饰物，其特征在于，其由胱胺中的氨基通过酰胺化反应与无抗凝活性肝素中的羧基相连后ES2肽的羧基再次通过酰胺化反应与胱胺中游离的氨基结合而成，结构式如下：
GSHP～CYS-(ES2)n；
式中，n＝1～10；GSHP的分子量为3000～8000Da。


2.如权利要求1所述的ES2肽的无抗凝活性肝素化修饰物，其特征在于，所述ES2肽的无抗凝活性肝素化修饰物还修饰有紫杉醇即ES2肽的无抗凝活性肝素化修饰并联合紫杉醇的结合物，具体的，其由胱胺上的氨基通过酰胺键与乙二醇断裂肝素上的羧基相连，紫杉醇的羟基通过酯键与GSHP中的羧基相连以及ES2肽的羧基通过酰胺键与胱胺上的游离氨基连接形成，结构式如下：
(PTX)n1-GSHP～CYS-(ES2)n2；
式中，n1＝1～5，n2＝1～10，GSHP的分子量为1000Da～8000Da，抗凝活性不高于40％；
优选的，所述n1＝2，n2＝10，分子量为3000～8000Da，抗凝活性不高于20％。


3.权利要求1所述的ES2肽的无抗凝活性肝素化修饰物的制备方法，其特征在于，包括：
S1、制备GSHP～CYS结合物：将GSHP溶解于水中，加入EDCI和NHS作为催化剂活化GSHP中的羧基，活化完成后调节pH至弱碱性，然后缓慢加入CYS溶液进行反应，反应完成后，反应产物经纯化即得GSHP～CYS结合物；
S2、制备GSHP～CYS-ES2结合物：将ES2溶解于水中，加入EDCI和NHS作为催化剂，活化后，缓慢加入上述GSHP～CYS溶液继续反应，反应结束后，反应产物经纯化后即得GSHP～CYS-ES2结合物。


4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中，调节pH至弱碱性具体为加入碱液调节pH至7.40左右；加入CYS溶液后反应时间控制为8～15h，优选为10h；反应产物纯化步骤包括透析和干燥步骤；或，
所述步骤S2中，活化时间控制为10-60min，优选为45min；缓慢加入GSHP～CYS溶液继续反应，反应时间控制为12～48h，优选为24h；反应产物纯化步骤包括透析、干燥。


5.权利要求2所述的ES2肽的无抗凝活性肝素化修饰并联合紫杉醇的结合物的制备方法，其特征在于，包括：
S1、制备GSHP～CYS结合物：将GSHP溶解于水中，加入EDCI和NHS作为催化剂活化GSHP中的羧基，活化完成后调节pH至弱碱性，然后缓慢加入CYS溶液进行反应，反应完成后，反应产物经纯化即得GSHP～CYS结合物；
S2、制备GSHP～CYS-TBA结合物：将上述GSHP～CYS溶于双蒸水中，加入Dowex离子交换树脂，搅拌后过滤除去...

【专利技术属性】
技术研发人员：谭海宁，孙凤，侯慧文，王洁，唐雯，李妍，符家爱，卢鲁，
申请(专利权)人：山东大学，
类型：发明
国别省市：山东;37