一种稳定同位素标记的克伦丙罗的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种稳定同位素标记的克伦丙罗的制备方法，以3,5‑二氯‑4‑氨基苯乙酮(II)为原料，经溴代反应制备得到化合物(III)，再经过改进的盖布瑞尔(Gabriel)合成反应，即与二甲酰氨基钠胺基化反应，得到化合物(IV)，后经水解、还原得到化合物(VI)，再经还原胺化反应生成目标化合物(I)。本发明专利技术所述的制备方法，工艺设计合理，原料价格便宜，实验过程可控，操作简便，可方便的合成所需要的各种标记化合物，如D标记、

【技术实现步骤摘要】
一种稳定同位素标记的克伦丙罗的制备方法
本专利技术属于药物制备
，尤其是涉及一种稳定同位素标记的克伦丙罗的制备方法。
技术介绍
克伦丙罗属于一种β2-受体激动剂，除可用于支气管炎和喘息性支气管炎的治疗外，还被用作饲料添加剂以增加瘦肉组织的比率，其残留物会在动物体内积累，2011年国务院食品安全委员会办公室《“瘦肉精”专项整治方案》〔食安办(2011)14号〕明确将克伦丙罗列入并禁止其应用于动物饲料中。目前国内关于食品中克伦丙罗残留检测方法前处理繁琐，基质效应前处理等对测定结果影响较大。发达国家一般采用同位素稀释质谱法，能够有效校正方法中出现的误差，显著提高检测方法的稳定性。同位素稀释质谱法(IsotopeDilutionMassSpectrometry,IDMS)采用稳定性同位素标记化合物作为内标试剂，很好地结合了色谱的分离能力和质谱的定性能力，己被定为国际上食品安全检测最权威的仲裁检测方法，并被美国、欧盟、日本等发达国家列为相关检验标准。同位素稀释质谱法(IsotopeDilutionMassSpectrometry,IDMS)采用稳定性同位素标记化合物作为内标试剂，很好地结合了色谱的分离能力和质谱的定性能力，通过检测相应质量数的离子的比值与标准的比值比较可达到准确定量的目的，同时有效消除样品前处理过程中引起的基质效应和回收率差异，提高了检测准确度，IDMS是唯一一种可用于微量、痕量和超痕量元素权威的测量方法。同时，稳定同位素标记试剂作为内标试剂应用于同位素稀释质谱法时，一般要求有至少3个质量数的差异。在国内，该方法所使用的同位素标记的克伦丙罗完全依赖于进口产品，其价格、货期等因素严重制约了IDMS技术在我国相关检测领域的应用。高效低成本地制备符合内标试剂要求的稳定同位素标记的克伦丙罗具有重要的意义。目前中国专利CN105968021A中报道了稳定同位素标记的克伦丙罗的合成方法，但该方法同位素标记的原料昂贵，且合成过程中的中间体难分离纯化，胺化过程中副产物较多，合成步骤长，整体收率较低，合成成本高昂，不适应大批量制备等问题，无法从根本上解决制约我国检测领域依赖进口产品的现状。基于上述情况，本专利技术创造性地设计了一条较为合理的制备路线，通过简单易得的原料3,5-二氯-4-氨基苯乙酮和同位素标记的丙酮为原料，制备了稳定性同位素标记的克伦丙罗，合成路线短，总收率以3,5-二氯-4-氨基苯乙酮计可达27.6％，得到的产物具有较高化学纯度与同位素丰度，可以作为食品质检领域的内标物，具有重要的实际应用价值。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术旨在克服上述现有技术中存在的缺陷，提供一种高效稳定的同位素标记的克伦丙罗的制备方法，该方法以3,5-二氯-4-氨基苯乙酮为起始原料，通过五步常规化学反应得到目标产物。为达到上述目的，本专利技术的技术方案是这样实现的：一种稳定同位素标记的克伦丙罗的制备方法，包括以下步骤：(1)化合物II在溶剂中，经溴代试剂作用得到中间体III；(2)中间体III在溶剂中，经胺基化试剂二甲酰氨基钠反应得到中间体IV；(3)中间体IV在酸性条件下水解得到中间体V；(4)中间体V在溶剂中，经还原剂作用得到中间体VI；(5)中间体VI在溶剂中，与稳定性同位素标记的丙酮经还原胺化反应得到目标化合物I；反应路线如下：进一步地，所述步骤(1)中，所述溶剂为氯仿，乙酸乙酯，四氢呋喃，甲醇，乙腈或者上述溶剂的混合溶剂，优选乙酸乙酯和氯仿的混合溶剂；所述步骤(1)中，所述溴代试剂为溴化铜、溴素或NBS，优选溴化铜；化合物II与溴代试剂的摩尔比为(1：1)～(1：12)，优选为(1：2)。进一步地，所述步骤(1)中的反应温度为25℃～100℃，优选为80℃；所述步骤(1)中的反应时间为1～48h，优选为16h。进一步地，所述步骤(2)中，所述溶剂为二氯甲烷、三氯甲烷、1,2-二氯乙烷、四氢呋喃、乙腈、N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜或N-甲基吡咯烷酮，优选乙腈；所述化合物(III)与胺化试剂的摩尔比为(1：1)～(1：5)。进一步地，所述步骤(2)中，反应温度为10℃～100℃，反应时间为1～48h。进一步地，所述步骤(3)中，酸性条件为盐酸或硫酸试剂或者上述酸性试剂的有机溶液；优选地，所述步骤(3)中的酸性试剂为盐酸水溶液或者盐酸有机溶液，更优选地，为盐酸水溶液，其浓度为5％～37％。进一步地，所述步骤(4)中所述溶剂为甲醇、乙醇、四氢呋喃或上述混合溶剂，更优选地，所述溶剂为甲醇；所述还原剂为硼氢化钠、硼氢化钾、乙硼烷或氢气，优选硼氢化钾；更优选地，所述步骤(4)中化合物(V)与还原剂的摩尔比为(1：1)～(1：3)，更优选地，摩尔比为(1：3)。进一步地，所述步骤(5)中的溶剂为氘代甲醇、氘代乙醇、四氢呋喃或者上述混合溶剂，优选氘代甲醇；所述步骤(5)中的氘代甲醇为CH3OD或CD3OD,更优选地，所述溶剂为CH3OD。进一步地，所述步骤(5)中的稳定性同位素标记的丙酮，可为丙酮-D6、丙酮-13C3或丙酮-2-13C；所述步骤(5)中的还原剂为硼氢化钠、硼氢化钾、四氢铝锂、氘代硼氢化钠、氘代四氢铝锂、氘代硼氢化钾、氢气或氘气，优选硼氘化钠或硼氢化钠；所述步骤(5)中，所述化合物VI与还原剂的摩尔比为(1：1)～(1：3)，更优选地，摩尔比为1：1.5。相对于现有技术，本专利技术的有益效果是：本专利技术的稳定同位素标记的克伦丙罗的制备方法步骤简短，同位素丰度不稀释。本专利技术路线不需要使用价格昂贵的同位素标记的异丙胺作为标记试剂，所用稳定性同位素标记试剂D标记丙酮或13C标记的丙酮价格便宜。且反应步骤中将关键的同位素化合物合成步置于最后步骤，极大地提高了工艺的可操作性和原子经济性，更关键的是不需要经过至少5步反应来合成同位素标记的异丙胺，极地降低了标记化合物的合成成本，重现性和稳定性更高，可方便的合成所需要的各种标记化合物，如D标记、13C标记或者D/13C双标记化合物。制备路线及方法未有文献报道，得到的稳定同位素标记的克伦丙罗化学纯度大于99％，同位素丰度大于98％，总收率以3,5-二氯-4-氨基苯乙酮计可达27.6％，本制备方法得到的稳定同位素标记的克伦丙罗可以作为食品质检领域的内标物，具有重要的实际应用价值。附图说明构成本专利技术的一部分的附图用来提供对本专利技术的进一步理解，本专利技术的示意性实施例及其说明用于解释本专利技术，并不构成对本专利技术的不当限定。在附图中：图1为实施例5制得的克伦丙罗-D7的ESI-MS谱图；图2为实施例5制得的克伦丙罗-D7的1HNMR谱图。具体实施方式除有定义外，以下实施例中所用的技术术语具有与本专利技术所属领域技术人员普遍理解的相同含义。以下实施例中所用的试验试剂，如无特殊说明，均为常规生化试剂；所述实验方法，如无特殊说明，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种稳定同位素标记的克伦丙罗的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：/n(1)化合物II在溶剂中，经溴代试剂作用得到中间体III；/n(2)中间体III在溶剂中，经胺基化试剂二甲酰氨基钠反应得到中间体IV；/n(3)中间体IV在酸性条件下水解得到中间体V；/n(4)中间体V在溶剂中，经还原剂作用得到中间体VI；/n(5)中间体VI在溶剂中，与稳定性同位素标记的丙酮经还原胺化反应得到目标化合物I；/n反应路线如下：/n

【技术特征摘要】
1.一种稳定同位素标记的克伦丙罗的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)化合物II在溶剂中，经溴代试剂作用得到中间体III；
(2)中间体III在溶剂中，经胺基化试剂二甲酰氨基钠反应得到中间体IV；
(3)中间体IV在酸性条件下水解得到中间体V；
(4)中间体V在溶剂中，经还原剂作用得到中间体VI；
(5)中间体VI在溶剂中，与稳定性同位素标记的丙酮经还原胺化反应得到目标化合物I；
反应路线如下：





2.根据权利要求1所述的一种稳定同位素标记的克伦丙罗的制备方法，其特征在于：
所述步骤(1)中，所述溶剂为氯仿，乙酸乙酯，四氢呋喃，甲醇，乙腈或者上述溶剂的混合溶剂，优选乙酸乙酯和氯仿的混合溶剂；
所述步骤(1)中，所述溴代试剂为溴化铜、溴素或NBS，优选溴化铜；
化合物II与溴代试剂的摩尔比为(1：1)～(1：12)，优选为(1：2)。


3.根据权利要求1所述的一种稳定同位素标记的克伦丙罗的制备方法，其特征在于：
所述步骤(1)中的反应温度为25℃～100℃，优选为80℃；
所述步骤(1)中的反应时间为1～48h，优选为16h。


4.根据权利要求1所述的一种稳定同位素标记的克伦丙罗的制备方法，其特征在于：
所述步骤(2)中，所述溶剂为二氯甲烷、三氯甲烷、1,2-二氯乙烷、四氢呋喃、乙腈、N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜或N-甲基吡咯烷酮，优选乙腈；
所述化合物(III)与胺化试剂的摩尔比为(1：1)～(1：5)。


5.根据权利要求1所述的一种稳定同位素标记的克伦丙罗的制备方法，其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员：张磊，曹炜东，韩世磊，
申请(专利权)人：阿尔塔天津标准物质研究院有限公司，天津阿尔塔科技有限公司，
类型：发明
国别省市：天津;12