一种大口黑鲈脑细胞系及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种大口黑鲈脑细胞系及其应用，所述大口黑鲈脑细胞系已于2021年03月25日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：CCTCC NO:C202166。本发明专利技术所述的大口黑鲈脑细胞系MSBr传代稳定，目前已成功传代超过65代且生长状态良好，且该细胞系适用范围广泛，不仅可用于病毒分离鉴定、病原功能研究、环境污染物检测、基因筛选和功能分析及鱼类肿瘤研究等，同时还可用于水产动物病毒性疾病的监测、诊断及流行病学调查研究，相关病毒性疾病的诊断试剂盒开发和疫苗研制等，具有较大的应用价值和社会经济价值。用价值和社会经济价值。用价值和社会经济价值。

【技术实现步骤摘要】
一种大口黑鲈脑细胞系及其应用


[0001]本专利技术属于水生生物细胞与水产养殖病害防控
，具体涉及一种大口黑鲈脑细胞系及其应用。

技术介绍

[0002]水生动物(主要为鱼类)的细胞培养研究晚于哺乳动物，始于20世纪60年代。1962年，Woft和Quimby建立了世界上第一个鱼类细胞系，即虹鳟鱼生殖腺细胞系。此后，鱼类细胞培养研究十分迅速，全世界已报道的鱼类细胞系有275株。我国鱼类细胞的培养始于20世纪70年代末，张念慈等建立的草鱼吻端组织二倍体细胞株是我国首个鱼类细胞系。目前建立的鱼类细胞系大约有70多株，多数来自于海水鱼类。细胞株作为具有生物活性的体外材料，有着活体鱼无法比拟的优点:细胞的培养和维持不需要大型的养殖设备，成本低；细胞个体大小均一，遗传背景极为相似，实验条件可以精确控制，重现性好。因此鱼类的细胞系是进行病毒学研究、环境毒物检测、生理学、免疫学、基因功能分析、细胞工程育种和种质保存等研究的重要材料和模型。目前鱼类原代细胞的建立技术虽然较为成熟，但是要获得针对病毒敏感的传代细胞系仍存着较大的偶然性和困难性，所以建立一株目标本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种大口黑鲈脑细胞系，其特征在于，所述大口黑鲈脑细胞系的保藏编号为：CCTCC NO:C202166。2.根据权利要求1所述的一种大口黑鲈脑细胞系，其特征在于，所述大口黑鲈脑细胞系的培养温度为28℃。3.根据权利要求1所述的一种大口黑鲈脑细胞系，其特征在于，所述大口黑鲈脑细胞系的培养过程中，胎牛血清的体积浓度为10％或15％。4.如权利要求1所述的大口黑鲈脑细胞系的构建方法，其特征在于，所述方法包括：S1、取大口黑鲈麻醉后，抽干血液后在75％酒精中浸泡2min，然后在无菌条件下取大口黑鲈的脑组织；S2、将脑组织经无菌PBS缓冲液漂洗后，置于AIM培养液中浸泡30min；S3、将脑组织剪成1mm3大小，加入胰蛋白酶于28℃消化20min；S4、利用包含体积浓度20％FBS的M199培养基终止消化后，所得的细胞悬液过细胞网筛，过滤后的细胞悬液于1000r/min离心7min；S5、离心后去上清，利用包含体积浓度20％FBS的M199培养基重悬沉淀得到重悬...

【专利技术属性】
技术研发人员：袁军法，戴彩姣，余利，李莉娟，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：