一种胃肠道菌群测定方法技术

本发明专利技术公开了一种胃肠道菌群测定方法，涉及微生物检测技术领域，包括以下步骤：制备样品液、振摇、稀释、培养、证实试验、水浴、产气对照、分类学分析以及测序；本发明专利技术涉及的测定方法更加科学合理，通过产气管数可准确测定液体样品中微生物的数量以及肠道菌群结构，并且可获得肠道菌群测序报告，科学的预测人体健康发展趋向，有利于指导人们健康管理，定量测量细菌微生物群的偏离，可弥补或至少部分地解决个体胃肠道菌群失调或其程度的治疗。

【技术实现步骤摘要】
一种胃肠道菌群测定方法
本专利技术涉及微生物检测
，具体为一种胃肠道菌群测定方法。
技术介绍
胃肠道为从口腔开始且在肛门结束的器官的连续系列，在其整个长度中，胃肠道集群有多种不同物种的微生物，总之，胃肠道的微生物含量为胃肠道的微生物群，组成性微生物或其群组的相对量能够被认为是微生物群的分布，微生物群分布因此产生关于胃肠道中的微生物多样性的信息，以及提供关于存在的微生物或其群组的相对量的信息；人的肠道中寄存着数量巨大、组成复杂的细菌群，也是人体最庞大、最复杂的微生物群落，一般情况下，肠道菌群与人体及外部环境保持着一个平衡状态，对人体的健康起着保护作用，与此同时，许多疾病也可以引起菌落的失调，从而加重病情，肠道细菌的分析是一种非常复杂的工作，随着检测技术的发展，对肠道细菌的认识也在不断推进，目前对于胃肠道菌群的测定通常都需要非常熟练的技术人员来观察和解释检验结果，需要简单、准确的方法来测定液体样品中微生物的数量；为此，我们提出一种胃肠道菌群测定方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种胃肠道菌群测定方法，以本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种胃肠道菌群测定方法，其特征在于，包括以下步骤：/nS1：称取30-40g粪便样品加入高速捣碎杯中，冷冻样品在1-3℃解冻(≤16h)，要融化，加入300-400ml 磷酸盐缓冲液，搅拌3-5分钟，制成1：10的样品液；/nS2：在捣碎杯中的液体应完全覆盖刀片，稀释倍数根据大肠菌群对样品的污染情况，用稀释液将样品制成一系列十倍递增的样品稀释液，将样品振摇均匀；/nS3：选择适宜的三个连续稀释度的样品稀释液，每个稀释度接种3管LST，每管接种1ml，以一定的角度，使吸管的尖部在试管壁上停留2-3s，从制备样品匀液至稀释完毕；/nS4：用吸管吸入三管月桂基硫酸盐胰蛋白(LST)肉汤向样品试管...

【技术特征摘要】
1.一种胃肠道菌群测定方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1：称取30-40g粪便样品加入高速捣碎杯中，冷冻样品在1-3℃解冻(≤16h)，要融化，加入300-400ml磷酸盐缓冲液，搅拌3-5分钟，制成1：10的样品液；
S2：在捣碎杯中的液体应完全覆盖刀片，稀释倍数根据大肠菌群对样品的污染情况，用稀释液将样品制成一系列十倍递增的样品稀释液，将样品振摇均匀；
S3：选择适宜的三个连续稀释度的样品稀释液，每个稀释度接种3管LST，每管接种1ml，以一定的角度，使吸管的尖部在试管壁上停留2-3s，从制备样品匀液至稀释完毕；
S4：用吸管吸入三管月桂基硫酸盐胰蛋白(LST)肉汤向样品试管里吸出，试管放入培养箱中，培养箱温度32-36℃，培养时间36-48H，菌落48-52H；
S5：如所有LST肉汤管均未产气,则可报告为大肠菌群阴性；如有产气者,则进一步作证实试验；
S6：用直径为3mm的接种环将所有36-48H内产气的LST肉汤管培养物移种于EC肉汤管中，将所有接种的EC肉汤管在20-30min放入带盖42.5±0.5℃水浴箱内,培养28±2h；
S6：应以已知为42.5℃产气阳性的大肠杆菌和...

【专利技术属性】
技术研发人员：张小燕，
申请(专利权)人：武汉普渡生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北;42