抗ATRX蛋白的单克隆抗体及其细胞株、制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种可以识别人ATRX抗原的单克隆抗体，分泌细胞株、其制备方法以及其在免疫检测中的用途。上述技术方案选取ATRX蛋白C末端的2273‑2413氨基酸为抗原肽，进行密码子优化，成为适合在大肠杆菌BL21(DE3)表达的基因片段，最后得到的重组蛋白包含GST蛋白标签、ATRX蛋白片段及组氨酸蛋白标签。所述重组蛋白对小鼠进行免疫，经细胞融合、筛选和亚克隆，获得高效分泌抗ATRX蛋白单克隆抗体的小鼠杂交瘤细胞株20A2,以及由该细胞株所分泌的抗ATRX蛋白单克隆抗体。本方案得到的抗体具有高特异性、敏感性，可以特异性识别表达ATRX蛋白的细胞，适用于免疫学检测，特别是免疫组化检测。

【技术实现步骤摘要】
抗ATRX蛋白的单克隆抗体及其细胞株、制备方法和应用
本专利技术涉及生物医学工程领域，特别涉及一种抗ATRX蛋白单克隆抗体及其细胞株、制备方法和应用。
技术介绍
ATRX(Xlinkedalphathalassemia/mentalretardation)是染色质重塑蛋白，在基因表达、DNA修复、复制等过程中有重要作用，主要位于易形成特殊二级结构(如G-四联体)富含GC碱基的异染色质区。研究表明ATRX蛋白主要通过与其他调节因子结合调控基因的表达。肿瘤细胞通常具有无限分裂的能力，保持端粒长度是一个必要条件。研究表明细胞端粒长度的维持有两种方式：(1)端粒酶维持端粒长度；(2)端粒替代延长(alternativelengtheningoftelomeres,ALT)机制。ALT机制不依赖端粒酶，而是通过同源重组的方式维持端粒的长度。约85％的人类肿瘤细施使用端粒酶的激活途径维持端粒长度。其他约15％的肿瘤依赖端粒的替代延长机制。ALT机制多见于间充质细胞来源的肿瘤，包括脑胶质细胞瘤、骨肉瘤、脂肪肉瘤等。研究表明端粒酶途径和ALT机制可在肿本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗ATRX单克隆抗体，由保藏号为CGMCC NO 20772的杂交瘤细胞株产生。/n

【技术特征摘要】
1.一种抗ATRX单克隆抗体，由保藏号为CGMCCNO20772的杂交瘤细胞株产生。


2.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体特异性识别ATRX蛋白。


3.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体的重链可变区的编码DNA序列为SEQID2所示的核苷酸序列，所述单克隆抗体的轻链可变区的编码DNA序列为SEQID3所示的核苷酸序列。


4.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体的重链可变区的氨基酸序列为SEQID4所示的氨基酸序列；所述单克隆抗体轻链可变区的氨基酸序列为SEQID5所示的氨基酸序列。


5.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体为小鼠IgG2a亚型单克隆抗体。


6.一种抗...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈惠玲，杨清海，王小亚，林婷，王丹，
申请(专利权)人：福州迈新生物技术开发有限公司，
类型：发明
国别省市：福建;35