一种人脐带间充质干细胞工作细胞库的程序降温方法技术

本发明专利技术涉及一种细胞程序降温方法，尤其涉及一种人脐带间充质干细胞工作细胞库的程序降温方法。一种人脐带间充质干细胞工作细胞库的程序降温方法，步骤包括：1)冻存液配制：离心管中加入DMSO和间充质干细胞无血清基础培养基，摇晃混合均匀后加入人血白蛋白，摇晃混合均匀，预冷；(2)脐带间充质干细胞的冻存：收集细胞于离心管中，计数，加入预冷的冻存液，重悬后，吸取细胞悬浮液于冻存管中，然后在程序降温仪中进行程序降温；(3)程序降温完成后，转入液氮罐中保存。细胞冻存复苏后，活性更高，其存活率为95％以上。活率为95％以上。

【技术实现步骤摘要】
一种人脐带间充质干细胞工作细胞库的程序降温方法


[0001]本专利技术涉及一种细胞程序降温方法，尤其涉及一种人脐带间充质干细胞工作细胞库的程序降温方法。

技术介绍

[0002]间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)是具有自我复制能力和多向分化潜能的成体干细胞，它能够发育成硬骨、软骨、脂肪和其他类型的细胞，因此已成为细胞治疗的重要候选种子细胞。
[0003]由于干细胞治疗的应用越来越多，人脐带间充质干细胞作为间充质干细胞的一种，其是指存在于新生儿脐带组织中的一种多功能干细胞，它能分化成许多种组织细胞，具有广阔的临床应用前景。目前对研究主要在人脐带间充质干细胞的液氮保存，人脐带间充质干细胞主要采用非程控温冷冻法和程序降温冷冻法，非程控温冷冻法是直接将人脐带间充质干细胞冷冻鱼
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196℃的液氮下，这种方法保存的最大缺点在于，冷冻过程中有大量冰晶产生，影响复苏后细胞的存活率；而程序降温冷冻法存在冷冻时间过长、冻存液不选择与程序接不相匹配，也会在一定程度上影响细胞复苏后的存活率。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种人脐带间充质干细胞工作细胞库的程序降温方法，其特征在于，步骤包括：(1)冻存液配制：离心管中加入DMSO和间充质干细胞无血清基础培养基，摇晃混合均匀后加入人血白蛋白，摇晃混合均匀，预冷；(2)脐带间充质干细胞的冻存：收集细胞于离心管中，计数，加入预冷的冻存液，重悬后，吸取细胞悬浮液于冻存管中，然后在程序降温仪中进行程序降温；(3)程序降温完成后，转入液氮罐中保存。2.根据权利要求1所述的一种人脐带间充质干细胞工作细胞库的程序降温方法，其特征在于，所述间充质干细胞无血清基础培养基与人血白蛋白的体积比为1：(1.2～1.3)。3.根据权利要求1或2所述的一种人脐带间充质干细胞工作细胞库的程序降温方法，其特征在于，所述DMSO占冷存液体积的9～11％。4.根据权利要求1所述的一种人脐带间充质干细胞工作细胞库的程序降温方法，所述人血白蛋白的浓度为10～20％。5.根据权利要求1所述的人脐带间充质干细胞工作细胞库的程序降温方法，所述步骤(1)的预冷温度为2～8℃；预冷温度时间至少30min。6.根据权利要求1所述的一种人脐带间充质干细胞工作细胞库的程序降温方法，所述冻存管在放入程序降温仪的...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱灏，
申请(专利权)人：华夏源细胞工程集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：