一种纯化分离万寿菊中叶黄素的方法技术

本发明专利技术的目的在于提供一种纯化分离万寿菊中叶黄素的方法，以皂化后的万寿菊浸膏为原料，使用色谱分离纯化手段，采用使用极性或非极性基团修饰的硅胶填料，用有机溶剂或有机溶剂和水的混合液为洗脱剂，实现对原料中叶黄素的纯化，得到含量＞90％的高纯叶黄素。该方法具有溶剂消耗少、稳定性好、载样量大、回收率高，工艺流程简单，操作简便可控等特点，适用于生产化的分离和纯化。生产化的分离和纯化。

【技术实现步骤摘要】
一种纯化分离万寿菊中叶黄素的方法


[0001]本专利技术属于色素制备与精制
，具体涉及一种用色谱分离手段高效纯化分离万寿菊中叶黄素的方法。

技术介绍

[0002]叶黄素，别名类胡萝卜素、胡萝卜醇、植物黄体素、核黄体、万寿菊花素及植物叶黄素等，又名“植物黄体素”，是一种亲油性的物质,通常不溶于水。也是一种重要的抗氧化剂。
[0003]在自然界中与玉米黄素共同存在。广泛存在于蔬菜、花卉、水果等植物中的天然物质，属于“类胡萝卜类”族物质，已知在自然界中存在着600多种类胡萝卜素，其中只有约20种存在于人的血液和组织中。在人体中发现的类胡萝卜素主要包括α一胡萝卜素，β一胡萝卜类，隐黄素、叶黄素、番茄红素和正未黄素。
[0004]医学实验证明植物中所含的天然叶黄素是一种性能优异的抗氧化剂，在食品中加入一定量的叶黄素可预防细胞衰老和机体器官衰老，同时还可预防老年性眼球视网膜黄斑退化引起的视力下降与失明，通过一系列的医学研究，类胡萝卜素已被建议用作癌症预防剂，生命延长剂，溃疡抵制剂，心脏病发作与冠状动脉疾病的抵制剂。同时，叶黄素还可作为饲料添加剂用于家禽肉蛋的着色，同时也已在食品工业中用作着色与营养保健剂。
[0005]叶黄素酯可以在人体自然水解为游离态叶黄素，叶黄素属于类胡萝卜素，是构成蔬菜、水果、花卉等植物色素的主要组分，也是人眼视网膜、黄斑区域的主要组成物质，能防止眼睛的生理结构和功能变异；通过大量的实验证实，叶黄素对视网膜色素变性、黄斑病变和白内障有明显的预防和改善效果；叶黄素的血管扩张功能和强抗氧化性能，可以改善眼部微循环，改善眼部营养供应，防止自由基对眼部的氧化损伤。由于叶黄素不能由人体自身合成，只能通过膳食和营养补充剂摄入。
[0006]叶黄素主要来源于万寿菊鲜花的深加工，市场上产品规格：5％、10％、20％、30％、50％、60％、80％、90％(市场上认可度最高规格是10％、20％和90％)。国家卫生部公告2008年第12号文件：国家卫生部批准叶黄素酯为新资源食品，可以广泛用于与食品及医药领域，每天用量为小于12mg。
[0007]叶黄素无毒安全，具有优异的生理功效，符合食品添加剂“天然”，“营养”，“多功能”的发展方向，与其它有益互补营养元素一起添加剂食品中，可有效的食品营养保健作用，随着提取工艺和食品工业化水平完善的提高，叶黄素在保健食品等领域的前景将越来越广阔。
[0008]鉴于以上技术背景及发展前景，提出本专利技术。

技术实现思路

[0009]本专利技术的目的在于提供一种纯化分离万寿菊中叶黄素的方法，该方法的原理是依靠固定相表面吸附作用，混合物中的组分在固定相中、随着流动相移动的迁移速度不同，从而按一定的次序由固定相中流出，根据色谱图接取目标馏分即可得到含量＞90％的产品。
[0010]为了实现上述专利技术目的，本专利技术采用了以下技术方案：
[0011]一种纯化分离万寿菊中叶黄素的方法，采用色谱的分离机理，使用有机溶剂或有机溶剂和水的混合溶液洗脱，收集目标解析液。
[0012]皂化后万寿菊浸膏的制备：
[0013]1)提取过程：将万寿菊花粉碎，用石油醚提取叶黄素、将提取液进行减压浓缩；
[0014]2)皂化过程：选用乙醇/甲醇/异丙醇等有机溶剂中的一种或几种，选用氢氧化钠或氢氧化钾进行皂化反应，温度：50～60℃，时间：1～4h，再用纯化水洗涤去除多余的皂化物质和水溶性杂质，5％乙醇去除脂溶性杂质；
[0015]3)干燥过程：真空冷冻干燥，真空度15～50Pa，温度-40℃，干燥时间20～24小时即得皂化后万寿菊浸膏。
[0016]皂化后的万寿菊浸膏用有机溶剂溶解，样品浓度为1～80mg/mL，有机溶剂为甲醇，乙醇，乙腈，丙酮，异丙醇，二氯甲烷，正庚烷，正己烷、石油醚、四氢呋喃，乙酸乙酯等常用溶剂中的一种或多种。
[0017]色谱分离模式所用的填料为极性或非极性基团修饰的硅胶，其中极性基团为：通过C1～C30正链烷基与硅胶连接氯原子、溴原子、氰基、磺酸基、羟基、二醇基、羧基、氨基、二氨基、酰胺基、苯基极性基团中的一种或多种，每个C1～C30正链烷基连接链上极性基团的个数为1个以上，极性基团的键合量为0.5～8.0μmol/m2；非极性基团为：C1～C30的正链烷烃、芳烃中的一种或多种，非极性基团的键合量为0.5～8.0μmol/m2。以上键合基团的种类和键合数量均可以调控。其粒径为5μm～100μm(优选10μm～60μm)，孔径为(优选)，形状为不规则形或球形。
[0018]所用流动相为有机溶剂或有机溶剂和水溶液混合溶液，其中有机溶剂为甲醇，乙醇，乙腈，丙酮，异丙醇，二氯甲烷，正庚烷，正己烷、石油醚、四氢呋喃，乙酸乙酯等常用溶剂中的一种或多种。
[0019]上柱吸附的载样量是上样样品质量与填料质量之比，载样量可达0.1％～20％。
[0020]依据检测仪监控峰形曲线收集目标解析液，获得高纯叶黄素产品为含量大于90％。
[0021]本专利技术所述纯化分离万寿菊中叶黄素的纯化方法，具体步骤如下：
[0022]1)皂化后万寿菊浸膏的制备：
[0023]将万寿菊花粉碎，用石油醚提取叶黄素、将提取液进行减压浓缩，选用乙醇/甲醇/异丙醇等有机溶剂中的一种或几种，选用氢氧化钠或氢氧化钾进行皂化反应，温度：50～60℃，时间：1～4h，再用纯化水洗涤去除多余的皂化物质和水溶性杂质，5％乙醇去除脂溶性杂质，真空冷冻干燥，真空度15～50Pa，温度-40℃，干燥时间20～24小时即得皂化后万寿菊浸膏，称取适量皂化后的万寿菊浸膏样品，用洗脱液配制成浓度为1～80mg/mL的溶液，超声助溶，作为上样溶液；
[0024]2)采用柱系统分离，色谱柱内径4.6～1000mm；采用色谱分离纯化体系，所用填料是极性与非极性基团修饰的硅胶。其粒径为5～100μm(优选10～60μm)，孔径为(优选比表面积50～800m2/g，形状为不规则形或球形；其中有机溶剂为甲醇，乙醇，乙腈，丙酮，异丙醇，二氯甲烷，正庚烷，正己烷、石油醚、四氢呋喃，乙酸乙酯等常用溶
剂中的一种或多种；流速为0.01～1.0倍柱体积/min；上样量为0.1～20％。依据检测谱图的峰形曲线收集目标解析液，该方法可以得到含量＞90％的产品。
[0025]本专利技术具有如下优点：
[0026]1、高选择性：本专利技术提出对皂化后的万寿菊浸膏，使用色谱法进行分离纯化，该方法分离选择性好、分离效率高，适合于得到高纯叶黄素产品。
[0027]2、载样量大，回收率高，易于实现工业化生产。
[0028]3、工艺溶剂消耗量少，流程简单，重复性好，操作简单可控，易实现自动化，过程稳定。
附图说明
[0029]图1实施例1叶黄素纯化制备谱图。
[0030]图2实施例1叶黄素纯化后产品分析图，液相纯度94.55％，含量大于90％。
具体实施方式
[0031]现结合实例，对本专利技术做进一步说明本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种纯化分离万寿菊中叶黄素的方法，其特征在于：将经过皂化反应的万寿菊浸膏溶解后，应用色谱分离模式，以有机溶剂、或有机溶剂和水的混合体系为流动相洗脱，收集目标解析液，获得高纯叶黄素产品。2.按照权利要求1所述一种纯化分离万寿菊中叶黄素的方法，其特征在于：皂化后的万寿菊浸膏用有机溶剂溶解，样品浓度为1～80mg/mL，有机溶剂为甲醇，乙醇，乙腈，丙酮，异丙醇，二氯甲烷，正庚烷，正己烷、石油醚、四氢呋喃，乙酸乙酯等常用溶剂中的一种或多种，洗脱所使用流动相的种类依据不同键合填料而优化调整。3.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：色谱分离模式所用的填料为极性或非极性基团修饰的硅胶，其中极性基团为：通过C1～C30正链烷基与硅胶连接氯原子、溴原子、氰基、磺酸基、羟基、二醇基、羧基、氨基、二氨基、酰胺基、苯基极性基团中的一种或多种，每个C1～C30正链烷基连接链上极性基团的个数为1个以上，极性基团的键合量为0....

【专利技术属性】
技术研发人员：丰加涛，郭志谋，梁鑫淼，
申请(专利权)人：中国科学院大连化学物理研究所，
类型：发明
国别省市：