一种脱细胞小肠粘膜下层/聚乳酸-羟基乙酸共聚物复合支架及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种脱细胞小肠粘膜下层/聚乳酸

【技术实现步骤摘要】
一种脱细胞小肠粘膜下层/聚乳酸
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羟基乙酸共聚物复合支架及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及组织修复
，具体而言，涉及一种脱细胞小肠粘膜下层/聚乳酸
‑
羟基乙酸共聚物复合支架及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]目前，由于环境污染问题，某些人群过度饮酒和吸烟的问题，以及一些地区人群咀嚼槟榔的习惯，世界各地喉咽和颈部食管癌的发病率有所增加。相当比例的此类癌症患者需要进行喉咽切除和/或食管切除术，这将不可避免地导致组织缺失。其中，大的组织缺失通常使用患者自体肌皮瓣或肠段进行修复，而这些手术具有一定的破坏性，可能会导致患者的继发性疾病，因此外科医生和研究人员们一直在积极寻找合适的组织修复材料来解决上述问题。
[0003]喉咽和颈部食管组织均表现出分层结构，前者由粘膜层、纤维层、肌肉层和筋膜层组成，后者由粘膜层、粘膜下层、肌肉层和外部纤维层组成。目前，已有前人开发出修复此类组织的材料。例如：沈等人将上皮细胞和成纤维细胞接种在聚酯氨酯支架上，复制了喉咽的粘膜层和纤维层；库潘等人在丁酸酯
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羟基戊酸酯共聚物(PHBV)和聚己内酯(PCL)支架上共培养上皮细胞和平滑肌细胞，复制了食管的粘膜层和肌肉层；侯等人开发了一种以交联聚氨酯为肌肉层，脱细胞食管粘膜为粘膜层的食管组织双层支架。
[0004]现有技术中，为了满足强度等机械性能的要求，支架的整体或者大部分采用的是合成高分子材料，导致其整体生物活性未达到最佳；同时现有技术中也未在支架内引入有利于促进组织修复的微观结构，导致其修复效果未达理想。
[0005]鉴于此，为了在支架中运用更多的生物活性天然高分子材料，并引入有助于组织修复的微观结构，特提出本专利技术。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供一种脱细胞小肠粘膜下层/聚乳酸
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羟基乙酸共聚物复合支架及其制备方法和应用以解决上述技术问题。
[0007]专利技术人发现，小肠粘膜下层(SIS)能促进胃和膀胱等器官的平滑肌再生，聚乳酸
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羟基乙酸(PLGA)支持上皮细胞的增殖和排布，以及腺体的形成。因此，提供了一种用于喉咽和/或颈部食管组织修复的双层复合支架，其脱细胞SIS用于肌肉层，PLGA纳米纤维用于粘膜层。
[0008]本专利技术是这样实现的：
[0009]本专利技术提供了一种脱细胞小肠粘膜下层/聚乳酸
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羟基乙酸共聚物复合支架的制备方法，复合支架制备方法包括：将含聚乳酸
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羟基乙酸共聚物的纺丝液电纺到脱细胞小肠粘膜下层上，制得脱细胞小肠粘膜下层/聚乳酸
‑
羟基乙酸共聚物复合支架。
[0010]在本专利技术应用较佳的实施方式中，上述纺丝液中聚乳酸
‑
羟基乙酸共聚物的浓度
为8
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15wt/v％。
[0011]在本专利技术应用较佳的实施方式中，上述聚乳酸
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羟基乙酸共聚物中乳酸和乙醇酸单体的比值为70
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90:10
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30，粘度η＝1.5
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3.5dL/g；优选地，所述聚乳酸
‑
羟基乙酸共聚物中所述乳酸和乙醇酸单体的比值为85：15，粘度η＝3.1dL/g。
[0012]在本专利技术应用较佳的实施方式中，上述纺丝液的溶剂为2,2,2
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三氟乙醇，纺丝液中聚乳酸
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羟基乙酸共聚物的浓度为10wt/v％。
[0013]在本专利技术应用较佳的实施方式中，上述电纺时的电纺电压为15
‑
20kV，电纺时间为1
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2h，电纺的针孔出口流量为0.5
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5mL/h，针尖距离接收器的距离为15
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20cm。
[0014]在本专利技术应用较佳的实施方式中，上述脱细胞小肠粘膜下层由2
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10层的单层脱细胞小肠粘膜下层组成。
[0015]在本专利技术应用较佳的实施方式中，上述脱细胞小肠粘膜下层的制备包括如下步骤：将去除浆膜、肌层和粘膜的小肠进行脱细胞，脱细胞的方法包括先用丙酮和乙醇的混合液处理小肠粘膜下层，然后依次进行胰蛋白酶和EDTA孵育、SDS和表面活性剂处理、过氧乙酸和乙醇处理；
[0016]优选地，丙酮和乙醇的混合液的体积比为2
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3:1，胰蛋白酶和EDTA孵育的时间为4
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10h；表面活性剂为TritonX
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100，SDS和表面活性剂处理时间为20
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48h；过氧乙酸和乙醇处理时间为10
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40min，过氧乙酸的质量浓度为0.1
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5％，乙醇的体积百分数为2
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30％。
[0017]在本专利技术应用较佳的实施方式中，上述复合支架的制备方法还包括将电纺制得的脱细胞小肠粘膜下层/聚乳酸
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羟基乙酸共聚物复合支架进行真空干燥，然后进行灭菌；
[0018]优选地，真空干燥时间为10
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40h，真空干燥温度为30
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35℃；优选地，灭菌是辐照灭菌，辐照灭菌是采用钴60以20
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25kGy为辐射剂量辐照灭菌。
[0019]本专利技术还提供了一种由上述的脱细胞小肠粘膜下层/聚乳酸
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羟基乙酸共聚物复合支架的制备方法制得的脱细胞小肠粘膜下层/聚乳酸
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羟基乙酸共聚物复合支架。
[0020]在本专利技术应用较佳的实施方式中，上述脱细胞小肠粘膜下层/聚乳酸
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羟基乙酸共聚物复合支架中聚乳酸
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羟基乙酸共聚物纤维的直径为500
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1000nm。
[0021]本专利技术还提供了一种由上述的脱细胞小肠粘膜下层/聚乳酸
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羟基乙酸共聚物复合支架的制备方法制得的脱细胞小肠粘膜下层/聚乳酸
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羟基乙酸共聚物复合支架或上述的脱细胞小肠粘膜下层/聚乳酸
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羟基乙酸共聚物复合支架在制备组织修复材料中的应用，组织修复材料为喉咽组织修复材料和/或颈部食管组织修复材料。
[0022]在本专利技术应用较佳的实施方式中，上述复合支架的脱细胞小肠粘膜下层支持肌肉层细胞的生长，复合支架的聚乳酸
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羟基乙酸共聚物层支持粘膜层细胞的生长。
[0023]本专利技术具有以下有益效果：
[0024]本专利技术制备了一种脱细胞小肠粘膜下层/聚乳酸
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羟基乙酸共聚物复合支架，复合支架的形态类似于喉咽和颈部食管组织的层状结构。复合支架中，脱细胞小肠粘膜下层的残留DNA量少，具有低免疫原性和高生物活性，聚乳酸
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羟基乙酸共聚物呈纳米纤维排布，可促进粘膜细胞迁移和生长，且复合支架具有良好的力学性能。经验证，细胞与支架各层本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种脱细胞小肠粘膜下层/聚乳酸
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羟基乙酸共聚物复合支架的制备方法，其特征在于，所述复合支架制备方法包括：将含聚乳酸
‑
羟基乙酸共聚物的纺丝液电纺到脱细胞小肠粘膜下层上，制得脱细胞小肠粘膜下层/聚乳酸
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羟基乙酸共聚物复合支架。2.根据权利要求1所述的脱细胞小肠粘膜下层/聚乳酸
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羟基乙酸共聚物复合支架的制备方法，其特征在于，所述纺丝液中所述聚乳酸
‑
羟基乙酸共聚物的浓度为8
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15wt/v％；优选地，所述聚乳酸
‑
羟基乙酸共聚物中所述乳酸和乙醇酸单体的比值为70
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90:10
‑
30，粘度η＝1.5
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3.5dL/g；优选地，所述聚乳酸
‑
羟基乙酸共聚物中所述乳酸和乙醇酸单体的比值为85：15，粘度η＝3.1dL/g；优选地，所述纺丝液的溶剂为2,2,2
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三氟乙醇，所述纺丝液中所述聚乳酸
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羟基乙酸共聚物的浓度为10wt/v％。3.根据权利要求2所述的脱细胞小肠粘膜下层/聚乳酸
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羟基乙酸共聚物复合支架的制备方法，其特征在于，所述电纺时的电纺电压为15
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20kV，电纺时间为1
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2h，所述电纺的针孔出口流量为0.5
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5mL/h，针尖距离接收器的距离为15
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20cm。4.根据权利要求3所述的脱细胞小肠粘膜下层/聚乳酸
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羟基乙酸共聚物复合支架的制备方法，其特征在于，所述脱细胞小肠粘膜下层由2
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10层的单层脱细胞小肠粘膜下层组成。5.根据权利要求4所述的脱细胞小肠粘膜下层/聚乳酸
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羟基乙酸共聚物复合支架的制备方法，其特征在于，所述脱细胞小肠粘膜下层的制备包括如下步骤：将去除浆膜、肌层和粘膜的小肠进行脱细胞，所述脱细胞的方法包括先用丙酮和乙醇的混合液处理小肠粘膜下层，然后依次进行胰蛋白酶和EDTA孵育、SDS和表面活性剂处理、过氧乙酸和乙醇处理；优选地，所述丙酮和乙醇的混合液的体积比为2
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3:1，所述胰蛋白酶和EDTA孵育的时间为4
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【专利技术属性】
技术研发人员：裘世杰，邹鹏，梁丽金，谭睿哲，陈琦，
申请(专利权)人：宁波市医疗中心李惠利医院，
类型：发明
国别省市：