本发明专利技术涉及一种锰型高稳定性超氧化物歧化酶在脑卒中的预防和治疗中的应用。本发明专利技术的锰型高稳定性超氧化物歧化酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示。本发明专利技术提供的锰型高稳定性超氧化物歧化酶能够显著预防和降低脑卒中后脑损伤，对于脑卒中有很好的预防和治疗效果。对于脑卒中有很好的预防和治疗效果。
【技术实现步骤摘要】
锰型高稳定性超氧化物歧化酶在脑卒中预防或治疗中的应用
[0001]本专利技术属于生物医药领域，具体涉及脑卒中的预防或治疗。
技术介绍
[0002]脑卒中包括缺血性脑卒中和出血性脑卒中，是由于血管堵塞或血管破裂出血导致的血液不能正常流入大脑而引起的脑组织损伤的一类疾病。缺血性脑卒中占卒中的70％，颈动脉和椎动脉的狭窄闭塞可引起缺血性脑卒中。脑卒中发生后会带来脑组织的损伤，严重者危机生命。缺血及再灌注过程中，可能发生线粒体损伤，钙超载，自由基累积、炎症反应等现象。而脑内产生过量的自由基，导致氧化-抗氧化系统失衡，是重要的一方面。自由基引起脂质、蛋白质和核酸的过氧化，导致神经细胞的损伤和死亡。另外，自由基又通过信号转导、细胞凋亡等途径造成脑组织损伤。
[0003]目前用于治疗自由基损伤的药物包括自由基清除剂(如依达拉奉等)和神经保护剂(如丁苯酞等)。这些药物主要是小分子物质，用于自由基清除及损伤后保护，对于卒中的治疗有一定的效果，但同时也有副作用。另外，通过血管内置入支架和斑块剥脱手术可预防部分病人卒中的发生。因此，依然需要针对脑卒中有良好治疗效果的药物。
技术实现思路
[0004]本申请专利技术人对超氧化物歧化酶对脑卒中的潜在影响进行了探讨，提出了预防和治疗脑卒中症状的新途径。
[0005]具体地，本专利技术提供了锰型高稳定性超氧化物歧化酶(MS-SOD)在制备预防或治疗脑卒中药物中的应用，其中，所述锰型高稳定性超氧化物歧化酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示。
[0006]优选地，所述药物通过口服或注射途径给药；进一步优选地，所述注射为静脉注射或腹腔注射。
[0007]优选地，所述药物的剂型为片剂、胶囊剂、粉针、注射剂或气雾剂。
[0008]优选地，所述药物还包括一种或多种制药学上可接受的辅料，如稀释剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、溶剂和/或缓冲剂等。这些辅料以本领域公知的方式与MS-SOD制备成药，其用量亦是本领域技术人员可知的。
[0009]本专利技术还提供能够防或治疗脑卒中的药物组合物，该药物组合物由有效成分和制药学上可接受的辅料组成，其中，所述有效成分为锰型高稳定性超氧化物歧化酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示。
[0010]优选地，所述药物组合物中超氧化物歧化酶的活力为200U-200000U/天。
[0011]优选地，本专利技术中所述的脑卒中为缺血性脑卒中或出血性脑卒中。
[0012]本专利技术提供的锰型高稳定性超氧化物歧化酶能够显著降低卒中后脑损伤，对于脑卒中的症状有很好的改善和治疗效果。
附图说明
[0013]图1为模型组、MS-SOD1组、MS-SOD2组小鼠脑切片的展示图。其中模型组为脑中动脉缺血模型组；MS-SOD1的小鼠在SOD灌胃4周后(3U/天/克体重)，实施MCAO造模；MS-SOD2组的小鼠在实施MCAO造模后，待小鼠从麻醉中清醒后灌胃SOD(600U)1次。
[0014]图2为小鼠脑梗死面积比。
[0015]图3为小鼠神经功能缺陷评分。
[0016]图4为小鼠肠道紧密连接蛋白蛋白印记实验(Western Blot)结果。
[0017]图5为MS-SOD处理前后斑马鱼脑缺血表型图，虚线区域为脑缺血部位。
[0018]图6为MS-SOD对斑马鱼脑缺血的改善作用(与模型对照组比较，***p<0.001)。
[0019]图7为MS-SOD处理后斑马鱼脑出血表型图。
[0020]图8为MS-SOD对斑马鱼脑出血的改善作用(与模型对照组比较：*p<0.05)。
[0021]图9为MS-SOD对脑出血的运动改善作用轨迹图。
[0022]图10为MS-SOD对脑出血的运动改善作用(运动速度，与模型对照组比较：*p<0.05)。
[0023]图11为MS-SOD对脑出血的血流量改善作用(血流量，与模型对照组比较：**p<0.01，***p<0.001)。
具体实施方式
[0024]下面将结合实施例对本专利技术作进一步阐述，但这些实施例不对本专利技术构成任何限制。
[0025]申请人经多年研究发现，MS-SOD可以调节卒中相关的危险因素、神经炎症反应和卒中后并发症的治疗目标。因此，在本研究中，申请人建立了小鼠中动脉栓塞缺血模型、斑马鱼脑缺血模型、斑马鱼脑出血模型，分别对脑损伤情况、神经功能缺陷等进行了评价与检测，从而分析MS-SOD对脑卒中的预防和治疗作用。
[0026]如没有特别说明，以下实施例中使用的试剂和仪器，均为本领域常规试剂和仪器，可以通过商购途径获得；所使用的实验方法和评分方法，均为本领域常规方法，参数的选择和设置也是常规选择，本领域技术人员根据所描述的内容可以毫无疑义地实施所述方法并获得相应结果。
[0027]实施例1：锰型高稳定性超氧化物歧化酶(MS-SOD)的制备
[0028]以嗜热菌HB27(购自美国ATCC细胞库，保藏编号为ATCC BAA-163)的基因组为模板，以如下引物序列进行扩增得到目的基因：正向引物：5
’-
aagaattcatgccgtacccgttcaagct-3
’
(SEQ ID NO.1)反向引物：5
’-
ctgtcgactcaggctttgttgaagaac-3
’
(SEQ ID NO.2)；用回收试剂盒(购自生工生物工程上海(股份)有限公司)回收扩增产物，用酶EcoRI和SalI双酶切，并连接到用同样酶双酶切的质粒载体pET28a(+)(购自生工生物工程上海(股份)有限公司)中，将重组质粒转化至感受态大肠杆菌BL21(DE3)(购自生工生物工程上海(股份)有限公司)，通过测序筛选MS-SOD核苷酸序列正确的菌株，培养该菌株，得到MS-SOD蛋白。其中，MS-SOD编码基因的核苷酸序列为：
[0029]atgccgtacccgttcaagcttcctgacctaggctacccctacgaggccctcgagccccacattgacgccaagaccatggagatccaccaccagaagcaccacggggcctacgtgacgaacctcaacgccgccctggagaagtac
ccctacctccacggggtggaggtggaggtcctcctgaggcacctcgccgcccttccccaggacatccagaccgccgtgcgcaacaacgggggcgggcacctgaaccacagcctcttctggaggctcctcacccccgggggggccaaggagcccgtgggggagctgaagaaggccattgacgagcagttcgggggcttccaggccctcaaggagaagctcacccaggcggccatgggccggttcggctcgggctgggcctggctcgtgaaggacccctt本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.锰型高稳定性超氧化物歧化酶在制备预防或治疗脑卒中药物中的应用，其中，所述锰型高稳定性超氧化物歧化酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示。2.根据权利要求1所述的应用，其中，所述药物通过口服或注射途径给药。3.根据权利要求2所述的应用，其中，所述注射为静脉注射或腹腔注射。4.根据权利要求1-3中任一项所述的应用，其中，所述药物的剂型为片剂、胶囊剂、粉针、注射剂或气雾剂。5.根据权利要求1-3中任一项所述的应用，其中，所述药物还包括一种或多种制药学上可接受的辅料。6.根...
【专利技术属性】
技术研发人员：孟凡国，
申请(专利权)人：凯睿恒济生物医药杭州有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。