黄柏碱作为治疗肝纤维化药物的应用制造技术

本发明专利技术涉及医药技术领域，具体公开了黄柏碱在制备治疗肝纤维化药物中的应用。本发明专利技术提供了黄柏碱在制备治疗肝纤维化药物中的新应用，经研究发现黄柏碱治疗肝纤维化的主要作用机制是其可以降低肝星状细胞LX

【技术实现步骤摘要】
黄柏碱作为治疗肝纤维化药物的应用


[0001]本专利技术涉及医药
，尤其涉及黄柏碱作为治疗肝纤维化药物的应用。

技术介绍

[0002]肝纤维化作为慢性肝脏疾病的结局，其中心环节是肝细胞损伤引起的肝星状细胞的激活。肝星状细胞的激活可破坏肝脏细胞外基质(Extracellular Membr ane，ECM)生成和降解之间的平衡，使ECM蛋白过多沉积于肝脏，从而引起肝纤维化，甚至肝硬化。肝纤维化既是一种代偿修复反应，又是肝损伤的促进因素。各种病因引起的慢性肝病绝大多数都有肝纤维化的发生，其中25％
‑
40％最终发展为肝硬化甚至肝癌。
[0003]我国是肝病大国，约有4亿肝病患者，肝病发病率和死亡率均高于世界平均水平。在肝纤维化的治疗方面，消除病因治疗是阻止和逆转肝纤维化进展的主要方法。因此，针对肝纤维化发生发展机制及其治疗方法的研究将有可能为治疗大部分肝脏疾病带来希望。目前世界上尚无有效药物来治疗肝纤维化，突破肝纤维化治疗瓶颈将产生极大的社会效益和经济效益。

技术实现思路

[0004]针对现有肝纤维化治疗中存在的上述问题，本专利技术提供黄柏碱作为治疗肝纤维化药物的应用。黄柏碱能够降低肝星状细胞LX
‑
2存活率，且对肝细胞Heparg存活率没有明显影响。
[0005]为达到上述专利技术目的，本专利技术实施例采用了如下的技术方案：
[0006]本专利技术提供了黄柏碱在制备治疗肝纤维化药物中的应用。
[0007]黄柏碱具有较好的降血压、抗肾炎、抑制细胞免疫和抑制中枢神经的作用。本专利技术提供了黄柏碱作为治疗肝纤维化药物的新的应用，经研究发现黄柏碱治疗肝纤维化的主要作用机制是：其可以通过降低肝星状细胞LX
‑
2中肝纤维化主要标志物基因转录生成的mRNA的水平，进而降低肝星状细胞LX
‑
2中肝纤维化主要标志物的表达。同时，黄柏碱能够降低肝星状细胞LX
‑
2存活率，抑制肝星状细胞LX
‑
2的活性，且针对性强，不会对肝星状细胞LX
‑
2以外的肝细胞Heparg产生影响。本专利技术提供的黄柏碱作为治疗肝纤维化药物的新的应用对突破肝纤维化治疗瓶颈具有重大意义。
[0008]所述黄柏碱的结构式为：
[0009][0010]黄柏碱为黄柏的单体组分之一，CAS号：6873
‑
13
‑
8，分子式：C
20
H
24
NO4，分子量
342.414。
[0011]优选的，所述治疗肝纤维化药物为肝星状细胞LX
‑
2存活抑制剂。
[0012]优选的，所述治疗肝纤维化药物为肝星状细胞LX
‑
2增殖抑制剂。
[0013]优选的，所述治疗肝纤维化药物为肝星状细胞LX
‑
2凋亡促进剂。
[0014]优选的，所述治疗肝纤维化药物为肝星状细胞LX
‑
2中肝纤维化标志物基因的转录抑制剂。
[0015]优选的，所述治疗肝纤维化药物中所述黄柏碱的浓度为1
‑
5mg/mL。
[0016]优选的，所述治疗肝纤维化药物中所述黄柏碱的浓度为2
‑
5mg/mL。
[0017]优选的，所述治疗肝纤维化药物中所述黄柏碱的浓度为5mg/mL。
[0018]优选的，所述治疗肝纤维化药物的剂型包括口服制剂和注射给药剂。
[0019]本专利技术提供了黄柏碱在体外降低肝星状细胞LX
‑
2存活率中的应用。
[0020]本专利技术提供的黄柏碱在体外降低肝星状细胞LX
‑
2存活率中的应用，促进了治疗肝纤维化药物的研究和开发。
附图说明
[0021]图1是本专利技术实施例1中不同浓度的黄柏碱对LX
‑
2细胞存活率影响的柱形图；
[0022]图2是本专利技术实施例2中不同浓度的黄柏碱对肝细胞Heparg存活率影响的柱形图；
[0023]图3是本专利技术实施例2中在不同浓度的黄柏碱处理下通过倒置显微镜观察的肝Heparg细胞的形态；
[0024]图4是本专利技术实施例3中不同浓度的黄柏碱对COL1A1、ACTA2基因的mRNA表达水平影响的柱形图；
[0025]图5是本专利技术实施例4中检测的处理组中小鼠肝组织的HYP含量柱形图；
[0026]图6是本专利技术实施例4中检测的处理组中小鼠血清中透明质酸含量柱形图；
[0027]图7是本专利技术实施例4中检测的处理组中小鼠血清中层粘连蛋白含量柱形图。
具体实施方式
[0028]为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。
[0029]实施例1
[0030]黄柏碱能够降低肝星状细胞LX
‑
2存活率
[0031]试验方法：
[0032]将人肝星状细胞LX
‑
2培养于含10％胎牛血清、青霉素(10万U/L)和链霉素(100mg/L)的DMEM培养基中，在37℃、5％CO2条件下培养。按照每孔5
×
103个细胞铺于96孔板，加入不同浓度梯度的黄柏碱，其中，40个孔添加1μL浓度为25μM的黄柏碱，40个孔添加1μL浓度为50μM的黄柏碱，剩余的16个孔设置成对照组(不加黄柏碱，加入等体积的去离子水)，待48h后，加入CCK
‑
8，放置于培养箱4h后置于酶标仪，读取450nm处的吸光度值(OD)。
[0033]给药组与对照组的绝对吸光度值(平均值)百分比定为细胞存活率，按下述公式计算：细胞存活率(％)＝给药组平均OD值/对照组平均OD
×
100％。结果如图1所示，不同浓度
的黄柏碱与LX
‑
2细胞孵育48h后，检测细胞存活率发现黄柏碱(25μM和50μM)能明显降低LX
‑
2细胞存活率。
[0034]实施例2
[0035]黄柏碱对人肝细胞Heparg存活率无明显影响
[0036]将人正常肝Heparg细胞培养于含10％灭活胎牛血清、10万U/L青霉素和100mg/L链霉素的RPMI1640培养液中，细胞在37℃、5％的CO2的培养箱中培养，取对数生长期的细胞用于实验。按照每孔5
×
103个细胞铺于96孔板，加入不同浓度梯度的黄柏碱，其中，40个孔添加1μL浓度为25μM的黄柏碱，40个孔添加1μL浓度为50μM的黄柏碱，剩余的16个孔设置成对照组(不加黄柏碱，加入等体积的去离子水)，待48h后，加入CCK
‑
8，放置于37℃、5％的CO2的培养箱，4h后置于酶标仪，读取450nm处的吸光度(OD)。给药组与空白组的绝对吸光度值(平均本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.黄柏碱在制备治疗肝纤维化药物中的应用。2.如权利要求1所述的黄柏碱在制备治疗肝纤维化药物中的应用，其特征在于：所述治疗肝纤维化药物为肝星状细胞LX
‑
2存活抑制剂。3.如权利要求1所述的黄柏碱在制备治疗肝纤维化药物中的应用，其特征在于：所述治疗肝纤维化药物为肝星状细胞LX
‑
2中肝纤维化标志物基因的转录抑制剂。4.如权利要求1所述的黄柏碱在制备治疗肝纤维化药物中的应用，其特征在于：所述治疗肝纤维化药物中所述黄柏碱的浓度为1
‑
5...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘磊，王鹤，阴佳璐，侯金才，姜国志，张特利，
申请(专利权)人：神威药业集团有限公司，
类型：发明
国别省市：