【技术实现步骤摘要】
一种基于酪胺
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β
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羟化酶催化产章鱼胺的方法
[0001]本专利技术属于章鱼胺的制备
,具体涉及一种基于酪胺
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β
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羟化酶催化产章鱼胺的方法。
技术介绍
[0002]章鱼胺是无脊椎动物神经系统中普遍存在的多种微量生物胺之一。虽然首先被发现存在于软体动物章鱼的唾液腺中,不过章鱼胺生理学意义的研究却首先开展在脊椎动物和节肢动物体内。在脊椎动物神经系统中,章鱼胺被认为是“痕量生物胺”或是“虚假的”神经递质。虽然有迹象表明章鱼胺是调节去甲肾上腺素突触传导的神经递质,但是至今在哺乳动物的中枢神经系统中没有发现特异性的章鱼胺受体。章鱼胺的分布及含量变化对于昆虫和一些软体动物、螨类等的生长、取食、代谢等多种生理和生物效应具有重要的作用。
[0003]它是一种防治肥胖症和Ⅱ型糖尿病的β3
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肾上腺素受体激动剂,对激活胰岛素释放敏感性而发挥作用;具有调节人体新陈代谢、保持血糖平衡、抑制食欲、提高注意力等特殊的药理作用和生理功能,是在防治肥胖症和Ⅱ型糖尿病方面具有良好前景。另外,章鱼胺的存在及含量的变化对各种昆虫的生长和行为具有显著的生物效应。
[0004]目前生产辛弗林的方法主要有物理提取法以及化学法。物理提取法以枳实、枳壳等酸橙植物为原料,以其提取液中得到。此法从中提取得到的纯度不高,一般为50%以下,来源较少,单一的提取方法限制了辛弗林的大量获取,所以并不能很好地进行工业化生产。化学法主要以苯酚为起始原料,通过烷基化 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种基于酪胺
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β
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羟化酶催化产章鱼胺的方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1,构建表达TBH的基因工程菌BL21(DE3)/pET28a
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TBH根据已报导的异色瓢虫来源酪胺
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β
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羟化酶的氨基酸序列进行密码子优化后,全基因合成优化后的序列,亚克隆到载体pET28a上,获得重组质粒pET28a
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TBH,将构建好的重组质粒pET28a
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TBH用氯化钙法转化进入大肠杆菌表达宿主BL21(DE3),得到酪胺
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β
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羟化酶表达菌种BL21(DE3)/pET28a
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TBH;步骤2,培养TBH的基因工程菌BL21(DE3)/pET28a
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TBH挑取表达TBH的基因工程菌BL21(DE3)/pET28a
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TBH的单菌落,接种于LB培养基,37℃培养至OD值达到0.4以上,再加入0.2mM
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1mM的IPTG,15
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30℃培养10
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18小时,离心收集表达酪胺
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β
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羟化酶的基因工程菌BL21(DE3)/pET28a
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TBH;步骤3,收集表达酪胺
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β
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羟化酶的基因工程菌BL21(DE3)/pET28a
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TBH,用pH...
【专利技术属性】
技术研发人员:陈可泉,程莎莎,王昕,乔荣梅,胡鑫峰,冯娇,张阿磊,欧阳平凯,
申请(专利权)人:南京工业大学,
类型:发明
国别省市:
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