一种无细胞体系蛋白质合成方法技术

本申请公开了一种无细胞体系蛋白质合成方法，包括将携带有编码待合成的目标蛋白质的基因的金属有机骨架化合物加入到无细胞体系中进行目标蛋白质的合成。本申请提供的方法，通过沉淀法将基因嵌在金属有机骨架化合物的孔隙中，然后将携带有基因的金属有机骨架化合物置于无细胞体系中，造成大分子拥挤，提高局部的基因浓度，实现无细胞体系的蛋白质高产量表达。表达。

【技术实现步骤摘要】
synthesis system using condensed wheat
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germ extract[J].Journal ofbiotechnology，1996，46(3):275
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282)。这些结果都表明在无细胞体系中模拟大分子拥挤环境有助于增强蛋白质的转录与翻译，可以提高蛋白质的表达量。
[0013]然而这些研究构建的大分子拥挤环境主要还是通过向无细胞体系中添加试剂形成的。这样创造出来的拥挤环境有限，形成的无细胞体系蛋白质表达提升率也有限。因此，需要寻求其他的方法。细胞质被认为是“半固体”的状态，人们认为这种状态会强烈影响到细胞成分的扩散动力学。例如细菌mRNA，它很少从生产部位分散。因此，DNA和mRNA在细菌细胞中都可以看作是不动的，而不是像在典型的体外实验那样在溶液中自由扩散。

技术实现思路

[0014]针对现有技术的以上缺陷，本申请的目的在于提供一种无细胞体系蛋白质合成方法，其是使用金属有机骨架化合物携带基因，通过沉淀法将基因嵌在金属有机骨架化合物的孔隙中，造成大分子拥挤，提高局部的基因浓度，实现无细胞体本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种无细胞体系蛋白质合成方法，其特征在于，包括将携带有编码待合成的目标蛋白质的基因的金属有机骨架化合物加入到无细胞体系中进行目标蛋白质的合成。2.根据权利要求1所述的无细胞体系蛋白质合成方法，其特征在于，所述金属骨架化合物选自类分子筛咪唑骨架ZIF系列、UiO系列、沸石咪唑酯骨架骨架MIL系列中的一种或两种以上。3.根据权利要求2所述的无细胞体系蛋白质合成方法，其特征在于，所述金属骨架化合物为类分子筛咪唑骨架ZIF系列，优选地，所述分子筛咪唑骨架ZIF系列选自ZIF
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8、ZIF
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67、ZIF
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90、ZIF
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11中的一种或两种以上，进一步优选为ZIF
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8。4.根据权利要求2所述的无细胞体系蛋白质合成方法，其特征在于，所述金属骨架化合物为UiO系列，优选为UiO
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66。5.根据权利要求2所述的无细胞体系蛋白质合成方法，其特征在于，所述金属骨架化合物为沸石咪唑酯骨架骨架MIL系列，优选为MIL
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101。6.根据权利要求1～5中任一项所述的无细胞体系蛋白质合成方法，其特征在于，所述携带有编码待合成的目标蛋白质的基因的金属有机骨架化合物是通过将金属盐溶液、有机配体溶液以及编码待合成的目标蛋白质的基因混合采用共沉淀法将编码待合成的目标蛋白质的基因嵌在金属盐溶液与有机配体溶液形成的金属有机骨架化合物的孔隙中。7.根据权利要求6所述的无细胞体系蛋白质合成方法，其特征在于，所述金属盐溶液选自硝酸锌溶液、醋酸锌溶液、硝酸钴溶液、硫酸铜溶液、硫酸亚铁溶液中的一种或两种以上；所述有机配体溶液选自2
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【专利技术属性】
技术研发人员：卢元，戈钧，林钲谚，冯毅，
申请(专利权)人：清华大学，
类型：发明
国别省市：