人PCID2蛋白在制备或筛选抗肿瘤药物中的应用及具有抗肿瘤活性的化合物制造技术

本发明专利技术属于生物技术和基因治疗技术领域，具体涉及一种人PCID2蛋白在制备或筛选抗肿瘤药物中的应用及抗肿瘤化合物。本发明专利技术发现PCID2基因促进肿瘤细胞增殖、调控细胞周期，是调节肿瘤发生发展的关键分子，可作为制备或筛选抗肿瘤药物的靶点蛋白；同时本发明专利技术以人PCID2蛋白为靶点蛋白，通过分子对接技术筛选出了一类靶向PCID2蛋白的抗肿瘤化合物，所述化合物能够显著抑制肿瘤细胞增殖，促进肿瘤细胞凋亡。

【技术实现步骤摘要】
人PCID2蛋白在制备或筛选抗肿瘤药物中的应用及具有抗肿瘤活性的化合物
本专利技术属于癌症精准医疗新靶点及药物
，具体涉及一种人PCID2蛋白在制备或筛选抗肿瘤药物中的应用及具有抗肿瘤活性的化合物。
技术介绍
肿瘤是一种细胞损伤或恶变而无限增殖的疾病，其中肝癌是常见的恶性肿瘤之一，在全球肿瘤发病率中占第六位、死亡率占第四位。我国每年新发肝癌约占全世界的50％以上。肝癌发病隐匿，早期症状不明显，且发生肝内外转移率高，预后极差。肿瘤化疗是目前治疗恶性肿瘤的主要手段。然而，耐药性、尤其是获得性多药耐药性已成为当前肿瘤化疗的主要障碍。绝大多数应用于临床的肿瘤化疗药物是通过诱导肿瘤细胞凋亡而产生治疗效果的，因此，抗凋亡途径是肿瘤细胞发生耐药的主要机制。细胞DNA的活跃复制及有丝分裂的快速循环是维持肿瘤异常增殖的基础，细胞周期特异性靶向治疗也因此被视为最有前途的抗癌策略。但目前临床批准使用的药物由于毒副作用强、靶点特异性差，使针对细胞周期的抑制剂在肿瘤临床治疗中的应用效果令人不满。在正常细胞中，DNA合成复制发生在G0/G1及S期，但肿瘤细胞高强度的DNA复制压力可异常激活染色体脆性位点(commonfragilesites,CFSs)，使DNA复制发生在细胞周期的各个节点，尤其M期，以维持基因组稳定性及质量，这是肿瘤细胞DNA复制的独有特征及缺陷。若能找到协调DNA复制压力的关键靶点，可彻底破坏肿瘤细胞DNA的稳定性，继而从根本上抑制细胞增殖。基于特异性靶向肿瘤细胞DNA合成的动态新疗法有希望改善肿瘤的治疗结局，对应的细胞周期特异性多靶点天然小分子抑制剂的研发为肿瘤的临床治疗重建了希望。目前抗肿瘤的化疗药物由于较强的毒副作用，且特异性和靶向性差，在治疗中仍然存在缺陷。在肝癌治疗领域，尽管使用索拉非尼、索凡替尼和瑞戈非尼对晚期肝癌治疗有一定疗效，但各有缺陷。未来通过靶向HIF-1α、RAAS等细胞生长特异性的多功能分子/通路的拮抗剂研发将对提高肝癌疗效及延长预后具有重要意义。天然药物及其衍生物在肿瘤等重大疾病的治疗中具有广谱的生物学特性，且毒副作用低，在肿瘤特异性靶点拮抗剂的研发方面优势明显。因此，多靶点天然小分子抑制剂开发是肿瘤分子靶向治疗的前景方向，但由于缺乏特异性功能靶点，使得高效拮抗剂的结构性优化无从着手。PCID2是调节细胞周期检查点的关键转运蛋白。本专利技术发现PCID2基因促进肿瘤细胞增殖、调控细胞周期，是调节肿瘤发生发展的关键分子，可作为筛选抗肿瘤药物的靶点蛋白，用于抗肿瘤药物的筛选；同时本专利技术通过分子对接技术筛选出了一类靶向PCID2分子的抗肿瘤化合物，所述抗肿瘤化合物能够显著抑制肿瘤细胞增殖，促进肿瘤细胞凋亡，具有显著的抗肿瘤活性。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种调节肿瘤细胞增殖的关键因子PCID2的新用途，探索肿瘤治疗的新靶点，具体方案为：第一方面，本专利技术提供了一种人PCID2蛋白在制备或筛选抗肿瘤药物中的应用。优选地，所述肿瘤为消化系统肿瘤。优选地，所述肿瘤为肝癌。优选地，所述人PCID2蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。第二方面，本专利技术提供了一种抗肿瘤的药物，所述药物是以人PCID2蛋白为靶点，抑制人PCID2蛋白表达的药物；或，所述药物是以人PCID2蛋白为靶点，阻断人PCID2蛋白与无序蛋白DSS1结合的药物；或，所述药物是以人PCID2蛋白为靶点，抑制人PCID2蛋白的活性的药物。优选地，所述肿瘤为消化系统肿瘤。优选地，所述肿瘤为肝癌。优选地，所述人PCID2蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。第三方面，本专利技术提供了一种以人PCID2蛋白为靶点蛋白筛选抗肿瘤药物的方法，所述方法包括以下步骤：(1)确定人PCID2蛋白与无序蛋白DSS1相互作用的结构域；(2)采用分子对接软件，依据人PCID2蛋白与无序蛋白DSS1相互作用的结构域确定活性中心，设定活性口袋；(3)利用分子对接软件，对小分子化合物库中的化合物进行对接；(4)根据对接结果进行活性筛选。优选地，所述人PCID2蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。第四方面，本专利技术提供了一种通过分子对接技术筛选获得的抗肿瘤药物，具体方案为：一种式(Ⅰ)所示的化合物或其药学上可接受的盐，其中，所述R1为氢、羟基；R2为氢、甲基、甲氧基、卤素、硝基。优选地，所述卤素为氯。第五方面，本专利技术提供了一种式(Ⅰ)所示的化合物或其药学上可接受的盐在制备抗肿瘤药物中的应用。优选地，所述肿瘤为消化系统肿瘤。优选地，所述肿瘤为肝癌。优选地，所述化合物或其药学上可接受盐加入药学上可接受的载体和/或辅料，可制成片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、丸剂、酊剂、酒剂、煎膏剂、合剂的任一种剂型。本专利技术的有益效果是：①本专利技术首先发现人PCID2基因促进肿瘤细胞增殖、调控细胞周期，是调节肿瘤发生发展的关键分子；其次本专利技术发现人PCID2通过DNA合成相关蛋白dCTPpyrophosphatase1(DCTPP1)及thymidylatesynthase(TYMS)维持肿瘤细胞dNTP池稳定性，调节肿瘤细胞高强度的DNA合成压力，确保肿瘤细胞基因组完整性；对于靶向人PCID2蛋白的药物研发对肿瘤分子靶向治疗具有重要的临床意义。②本专利技术通过分子对接技术筛选出了一类靶向人PCID2蛋白的抗肿瘤药物，所述药物能够显著抑制肝癌细胞增殖，促进肝癌细胞凋亡，具有显著地抑制肝癌的活性。附图说明图1TCGA数据库中371例原发性肝癌患者及50例正常人群PCID2mRNA表达水平；图2PCID2在肝癌细胞系中的表达水平；其中，SMCC7721、Huh7、MHCC97H、HCCLM3、Hep3B及PLC为肝癌细胞系；图3PCID2在肝癌组织、癌旁组织中的表达水平；其中，T为肝癌组织，P为癌旁组织；图4慢病毒介导的PCID2基因沉默后的Huh7及Hep3B细胞增殖水平；图5慢病毒介导的PCID2基因沉默后的肝癌细胞Huh7及Hep3B的细胞周期；图6PCID2基因沉默对肝癌细胞Bel-7404、Bel-7402及Huh7克隆形成能力的影响结果；图7慢病毒介导的PCID2基因沉默对肝癌细胞凋亡的影响结果；图8慢病毒介导的PCID2基因沉默对裸鼠体内肝癌细胞成瘤的影响结果；图9PCID2沉默后肝癌细胞DNA合成相关蛋白DCTPP1及TYMS的表达水平；图10PCID2可与细胞周期关键蛋白DCTPP1、TYMS及TK1相互作用结果图；其中，SNX2为阳性对照；图11PCID2结构域示意图及PCID2-DSS1晶体结构示意图；其中，A为PCID2结构域示意图，B为PCID2-DSS1晶体结构示意图；图12分子对接获得的查尔酮类化合物11与PCID2蛋白结合示意图；本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.人PCID2蛋白在制备或筛选抗肿瘤药物中的应用。/n

【技术特征摘要】
1.人PCID2蛋白在制备或筛选抗肿瘤药物中的应用。


2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述肿瘤为消化系统肿瘤。


3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述肿瘤为肝癌。


4.如权利要求1-3任一所述的应用，其特征在于，所述人PCID2蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。


5.一种用于抗肿瘤的药物，其特征在于，所述药物是以人PCID2蛋白为靶点，抑制人PCID2蛋白表达的药物；
或，所述药物是以人PCID2蛋白为靶点，阻断人PCID2蛋白与无序蛋白DSS1结合的药物；
或，所述药物是以人PCID2蛋白为靶点，抑制人PCID2蛋白的活性的药物。


6.如权利要求5所述的用于抗肿瘤的药物，其特征在于，所述肿瘤为消化系统肿瘤。


7.如权利要求6所述的用于抗肿瘤的药物，其特征在于，所述肿瘤为肝癌。


8.如权利要求5-7任一所述的药物，其特征在于，所述人PCID2蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。


9.一种以人PCID2为靶点蛋白筛选抗肿瘤小分子药物的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：...

【专利技术属性】
技术研发人员：白仲添，张保新，席莉莉，周建业，
申请(专利权)人：兰州大学第一医院，
类型：发明
国别省市：甘肃;62